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Bifidobacterium adolescentis orchestrates CD143^(+)cancer-associated fibroblasts to suppress colorectal tumorigenesis by Wnt signaling-regulated gas1

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Cancer Communications 2023年第9期43卷 1027-1047页

作者： Shujie Chen Lina Fan Yifeng Lin Yadong Qi Chaochao Xu Qiwei Ge Ying Zhang Qiwen Wang Dingjiacheng Jia Lan Wang Jianmin Si Liangjing Wang Department of gastroenterology Sir Run Run Shaw HospitalSchool of MedicineZhejiang UniversityHangzhouZhejiangP. R. China Institute of gastroenterology Zhejiang UniversityHangzhouZhejiangP. R. China Cancer Center Zhejiang UniversityHangzhouZhejiangP. R. China Research Center of Prevention and Treatment of Senescent Disease School of Medicine Zhejiang UniversityHangzhouZhejiangP. R. China Department of gastroenterology Second Affiliated Hospital of Zhejiang University School of MedicineHangzhouZhejiangP. R. China

Background The interplay between gut microbiota and tumor microenvironment(TME)in the pathogenesis of colorectal cancer(CRC)is not well ***,we elucidated the functional role of Bifidobacterium adolescentis(B.a)on CRC and investigated its possible mechanism on the manipulation of cancer-associated fibroblasts(CAFs)in *** Different CRC animal models and various cell line models were established to explore the function of B.a on *** single-cell RNA sequencing(scRNA-seq)or flow cytometry was used to detect the cell subsets in the TME of *** blot,quantitative real-time polymerase chain reaction(qRT-PCR),or immunofluorescence staining were performed to examine the activation of Wnt signaling and growth arrest specific 1(gas1)on CD143+*** immunoprecipitation quantitative real-time PCR(CHIP-qPCR)was performed to investigate the regulation of transcription factor 4(TCF4)on ***-immunofluorescence assay examined the expression level of CD143 and gas1 on tissue *** We found that B.a abundance was significantly reduced in CRC patients from two independent cohorts and the bacteria database of *** with B.a suppressed ApcMin/+spontaneous or AOM/DSS-induced tumorigenesis in ***-seq revealed that B.a facilitated a subset of CD143+CAFs by inhibiting the infiltration of Th2 cells,while promoting the TNF-alpha+B cells in ***143+CAFs highly expressed gas1 and exhibited tumor suppressive ***,gas1 was activated by the Wnt/β-catenin signaling in CD143+CAFs.B.a abundance was correlated with the expression level of CD143 and *** level of CD143+CAFs predicted the better survival outcome in CRC *** These results highlighted that B.a induced a new subset of CD143+CAFs by Wnt signaling-regulated gas1 to suppress tumorigenesis and provided a novel therapeutic target for probiotic-based modulation of TME in CRC.

关键词： Bifidobacterium adolescentis cancer-associated fibroblast colorectal cancer gas1 microbiota single-cell RNA sequencing Wnt/β-catenin signaling

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MicroRNA-33a-5p通过靶向gas1促进膀胱癌的增值与迁移

MicroRNA-33a-5p通过靶向GAS1促进膀胱癌的增值与迁移

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作者：倪可可锦州医科大学

学位级别：硕士

目的通过分析TCGA数据库挖掘膀胱癌中差异表达的miRNAs,并利用细胞生物学实验,初步探究在膀胱癌的发生发展中miR-33a-5p的作用及分子机制。方法本实验对TCGA数据库中的膀胱癌及癌旁组织基因测序数据进行整理分析,筛选出在膀胱癌及癌旁... 详细信息

目的通过分析TCGA数据库挖掘膀胱癌中差异表达的miRNAs,并利用细胞生物学实验,初步探究在膀胱癌的发生发展中miR-33a-5p的作用及分子机制。方法本实验对TCGA数据库中的膀胱癌及癌旁组织基因测序数据进行整理分析,筛选出在膀胱癌及癌旁组织中差异表达的miRNAs;在筛选出的miRNAs中选择尚未被研究的miR-33a-5p初步探究该miRNA在膀胱癌中的作用及分子机制。利用q RT-PCR检测膀胱癌及癌旁组织和膀胱癌细胞系中miR-33a-5p的表达量;在膀胱癌细胞系5637中分别转染miR-33a-5pmimics和miR-33a-5pinhibitor,通过cck-8、克隆形成、Transwell、细胞划痕等细胞生物学实验研究miR-33a-5p对膀胱癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响。通过Targetscan、Starbase、miRDB数据库预测miR-33a-5p的靶基因,并利用q RT-PCR、Westernblot及双荧光素酶实验验证预测结果。结果本实验通过对435例膀胱癌数据进行整理分析,筛选出高表达miRNAs有153个,低表达miRNAs有21个;在高表达的miRNAs中又筛选出差异性最高的miR-33a-5p进行后续研究。q RT-PCR结果显示膀胱癌组织中miR-33a-5p的表达量明显升高(Pgas1为miR-33a-5p的下游靶基因,并通过q RT-PCR、Westernblot分别处理转染miR-33a-5pmimics和miR-33a-5pinhibitor的膀胱癌细胞系5637发现,转染miR-33a-5pmimics之后,其gas1的m RNA和蛋白表达量均下降(Pgas1的m RNA和蛋白表达量均上升(Pgas1-WT质粒的5637细胞荧光素酶活性明显下降(Pgas1-MUT质粒的5637细胞荧光素酶活性无明显差别。结论miR-33a-5p可以促进膀胱癌的增殖、侵袭、迁移。gas1是miR-33a-5p的下游靶基因,miR-33a-5p在膀胱癌中的促癌作用可能就是通过直接靶向抑制gas1实现的。

关键词： miR-33a-5p 膀胱癌 gas1

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基因c-IAP2和gas1在何杰金及间变性大细胞淋巴瘤中表达

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中国病理生理杂志 2004年第2期20卷 251-255页

作者：李辉曾子华郑佩娥蒋光愉李红夏明汗暨南大学医学院第一附属医院耳鼻喉科广东广州510632 暨南大学医学院病理学教研室广东广州510632 暨南大学医学院第一附属医院病理科广东广州510632

目的 :检测凋亡相关基因c-IAP2和gas1在何杰金氏淋巴瘤 (HL)及间变性大细胞淋巴瘤 (ALCL)组织中的蛋白表达状况及差异 ,探讨此两种基因与HL和ALCL发生发展的相关性。方法 :将 2 88例恶性淋巴瘤标本经HE及CD30、CD15、CD2 0、CD4 5RO免... 详细信息

目的 :检测凋亡相关基因c-IAP2和gas1在何杰金氏淋巴瘤 (HL)及间变性大细胞淋巴瘤 (ALCL)组织中的蛋白表达状况及差异 ,探讨此两种基因与HL和ALCL发生发展的相关性。方法 :将 2 88例恶性淋巴瘤标本经HE及CD30、CD15、CD2 0、CD4 5RO免疫组化染色 ,筛选出 4 5例HL和ALCL ,以免疫组化方法检测c -IAP2和gas1在HL和ALCL中的表达 ,并进行统计分析。结果 :①c -IAP2及gas1分别在两组病例中的表达均有显著差异 (P gas1在大细胞的表达与HL一致 ,在小细胞的表达与ALCL类似。结论 :c-IAP2、gas1在HL和ALCL中的表达存在差异性 ,提示二者与此两种肿瘤的发生相关 ,HL和ALCL可能存在不同的发生机制及不同的信号转导途径受损部位 ;个别病例中存在着HL及ALCL两种瘤细胞的特点 ,表明HL和ALCL存在重叠和过渡 ;c-IAP2和gas1的表达方式有助于HL及ALCL的鉴别诊断。

关键词：淋巴瘤何杰金氏淋巴瘤大细胞细胞凋亡基因 c-IAP2 基因 gas1

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生长抑制特异性蛋白1(gas1)在早孕小鼠子宫内膜蜕膜化中的作用

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中国细胞生物学学报 2020年第12期42卷 2105-2115页

作者：谭淇蔓徐翰婷李南燕刘学庆何俊琳丁裕斌王应雄高茹菲陈雪梅重庆医科大学公共卫生与管理学院生殖生物学实验室生殖与发育国际合作联合实验室重庆400016

该文旨在探讨生长抑制特异性蛋白1(growth arrest specific 1,gas1)在早孕小鼠子宫内膜中的表达规律以及其在子宫内膜蜕膜化中的作用。通过免疫组化、Western blot和RT-qPCR检测gas1在正常妊娠小鼠、假孕小鼠子宫内膜中的表达变化;分别... 详细信息

该文旨在探讨生长抑制特异性蛋白1(growth arrest specific 1,gas1)在早孕小鼠子宫内膜中的表达规律以及其在子宫内膜蜕膜化中的作用。通过免疫组化、Western blot和RT-qPCR检测gas1在正常妊娠小鼠、假孕小鼠子宫内膜中的表达变化;分别构建体内小鼠子宫人工诱导蜕膜化模型和体外小鼠原代子宫内膜基质细胞人工诱导蜕膜化模型,通过Western blot和RT-qPCR检测gas1在两种模型中的表达;在分离的小鼠原代子宫内膜基质细胞中过表达gas1,通过Western blot、RT-qPCR和流式细胞术等方法检测其对蜕膜化、增殖和凋亡的影响;通过Western blot检测gas1在人正常早孕蜕膜组织和自然流产蜕膜组织中的表达。结果表明,gas1在小鼠孕D5、D6、D7的着床点表达显著低于着床旁;在体内和体外人工诱导蜕膜化模型中,gas1在诱导组的表达明显低于非诱导组;而gas1的上调则可通过影响细胞增殖和凋亡抑制蜕膜化。此外,gas1在自然流产患者子宫内膜组织中的表达明显高于正常早孕组。该研究初步表明了gas1可能通过介导细胞增殖和凋亡,影响小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化,从而在调控胚胎着床过程中起重要作用。

关键词：胚胎植入子宫内膜蜕膜化凋亡 gas1

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淋巴瘤HL和ALCL中c-IAP2与gas1的表达及其相关性研究

淋巴瘤HL和ALCL中c-IAP2与gas1的表达及其相关性研究

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作者：李辉暨南大学

学位级别：硕士

目的：检测c-IAP2和gasl在何杰金氏淋巴瘤HL及间变性大细胞淋巴瘤ALCL组织中的表达状况及差异性，探讨此两种基因与HL和ALCL发生的相关性。方法：收集288例恶性淋巴瘤标本，作HE及CD30、CD15、CD20、CD45RO免疫组化染色，筛选出HD和A... 详细信息

目的：检测c-IAP2和gasl在何杰金氏淋巴瘤HL及间变性大细胞淋巴瘤ALCL组织中的表达状况及差异性，探讨此两种基因与HL和ALCL发生的相关性。方法：收集288例恶性淋巴瘤标本，作HE及CD30、CD15、CD20、CD45RO免疫组化染色，筛选出HD和ALCL，以免疫组化方法检测c-IAP2和gasl在HL和ALCL中的表达，光镜下计数阳性细胞，SPSS8.0软件处理结果。结果： 1．经HE、CD30、CD15、CD20及CD45RO免疫组化染色，共筛选出26例HL(另6例标本损坏)和19例ALCL。 2．c-IAP2在HL组瘤细胞的阳性表达率为25／26(96.1％)：15例阳性“+++”，10例阳性“++”，1例为阴性;在ALCL组，1例阳性“++”，5例阳性“+”，其余13例为阴性，两组病例的表达有统计学差异(p＜0.05)。 ***在ALCL组瘤细胞阳性表达率为18／19(94.7％)：8例阳性“+++”，9例阳性“++”，1例阳性“+”，1例阴性表达;在HL组，肿瘤阳性率为18／25(72％)：5例阳性“+++”，7例阳性“++”，6例阳性“+”，其余8例为阴性，两组病例的表达有统计学差异(p＜0.05)。 4．有两个病例为大小细胞混合型，c-IAP2和gasl在大细胞的表达与HL一致，在小细胞的表达与ALCL类似。结论： 1．本研究报道了c-IAP2和gasl在HL和ALCL中的蛋白质水平的表达状况，国内外尚未见文献报道。结果显示c-IAP2、gasl在HL和ALCL中的表达存在差异性，c-IAP2在HL高表达，在ALCL低表达，而gasl的表达则相反，提示c-IAP2和gasl的表达与两种肿瘤的发生相关并存在不同的病理机制及不同的信号传导途径受损部位。鳖南大学医学院淋巴庙HL和ALC中c－［APZ与gtl的裹达及其相关性研究2．个别病例中存在两种肿瘤细胞，它们的兔疫表型及c工和gasl的表达分别模拟了 HL的RS细胞及ALCL瘤细胞的特点，表明HL和ALCL存在重叠和过渡。

关键词：细胞凋亡何杰金氏淋巴瘤间变性大细胞性淋巴瘤免疫组化 c-IAP2 gas1

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毕赤酵母细胞壁多糖合成相关基因GAS1和MNN2对毕赤酵母表面展示效...

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作者：朱俊华南理工大学

学位级别：硕士

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长链非编码RNA NEAT1通过miR-34a靶向gas1激活PI3K-AKT信号通路对宫颈癌的增殖、侵袭和上皮细胞-间充质转化的影响研究

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中国性科学 2021年第5期30卷 59-63页

作者：刘莹谢锦霞李恒西安市第四医院妇产科西安710004 西安交通大学基础医学院西安710049

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1对宫颈癌细胞增殖、侵袭和上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响和机制研究。方法选取2019年10月购自上海生物细胞研究所的宫颈癌细胞株(Hela细胞)和人宫颈上皮永生化细胞株(H8细胞)作为研究对象。通过实... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1对宫颈癌细胞增殖、侵袭和上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响和机制研究。方法选取2019年10月购自上海生物细胞研究所的宫颈癌细胞株(Hela细胞)和人宫颈上皮永生化细胞株(H8细胞)作为研究对象。通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NEAT1在Hela细胞和H8细胞中的差异表达,分析NEAT1对Hela细胞增殖、侵袭和EMT的影响。miRanda和双荧光素酶报告基因实验分析NEAT1和miR-34a之间的关系,检测NEAT1通过miR-34a对Hela细胞增殖、侵袭与EMT的影响,TargetScan和双荧光素酶报告基因实验分析miR-34a和gas1的关系,检测miR-34靶向gas1激活PI3K-AKT信号通路对Hela细胞增殖、侵袭和EMT的影响。分别用MTT、细胞侵袭实验和Western blot检测细胞的增殖、侵袭和EMT能力。结果 Hela细胞中NEAT1的表达上调(P1),miR-34a表达下调(P1),敲低NEAT1抑制了Hela细胞增殖、侵袭与EMT,NEAT1 3′UTR与miR-34a特异性结合。同时敲低NEAT1和miR-34a的表达,NEAT1表达的下调能部分逆转miR-34a下调对细胞功能的影响。同时过表达NEAT1和miR-34a, NEAT1能部分逆转miR-34a上调对细胞功能的影响。miR-34a和gas13′UTR特异性结合,敲低gas1抑制了Hela细胞增殖、侵袭与EMT,干扰gas1抑制了Hela细胞p-PI3K、p-AKT蛋白的表达。和干扰miR-34a相比,同时抑制gas1和miR-34a的表达能够逆转p-PI3K、p-AKT蛋白的上升。MK2206抑制了Hela细胞增殖、侵袭与EMT,而IGF-1促进了细胞的增殖、侵袭与EMT。结论 NEAT1通过miR-34a靶向gas1激活了PI3K-AKT信号通路,从而促进宫颈癌的发展。

关键词： NEAT1 miR-34a gas1 PI3K-AKT 宫颈癌上皮细胞-间充质转化

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尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种中Fogas1基因的克隆与序列分析

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基因组学与应用生物学 2014年第4期33卷 796-801页

作者：陈平亚毛超杨腊英黄俊生海南大学环境与植物保护学院海口5702282 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点实验室海南省热带农业有害生物检测与控制重点实验室海口571101

采用PCR和RT-PCR的方法,从尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种中克隆得到了Fogas1基因的DNA及cDNA序列,并运用生物信息学的方法对该基因所编码的氨基酸序列进行分析,预测其编码蛋白质的结构和功能。结果表明,Fogas1基因全长1 672 bp,其中... 详细信息

采用PCR和RT-PCR的方法,从尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种中克隆得到了Fogas1基因的DNA及cDNA序列,并运用生物信息学的方法对该基因所编码的氨基酸序列进行分析,预测其编码蛋白质的结构和功能。结果表明,Fogas1基因全长1 672 bp,其中开放阅读框全长1 623 bp,编码含有540个氨基酸残基的蛋白质,该蛋白分子量为58398.1,等电点pI=4.83,为性质稳定的亲水性蛋白。Fogas1蛋白为跨膜蛋白,含有22个丝氨酸磷酸化位点,2个苏氨酸磷酸化位点,8个酪氨酸磷酸化位点。该蛋白在C端有一个信号肽结构,为一种分泌蛋白。通过系统进化树分析,该蛋白在不同种属镰刀菌中高度保守。

关键词： FOC4 gas1 生物信息学分析

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生长阻滞特异基因1在胃癌细胞系和组织中的差异表达及其意义

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中国现代医学杂志 2007年第20期17卷 2460-2462页

作者：赵久达李国元曹成珠贺菊香耿排力青海大学附属医院肿瘤内科青海西宁810001 青海大学医学院病理教研室青海西宁810001

目的探讨gas1在胃癌细胞系和组织中的差异表达及与胃癌发生、发展的关系。方法应用RT-PCR检测gas1在7个胃癌细胞系和23对胃癌配对组织标本中的表达情况,免疫组化检测gasl在43例手术切除的胃癌标本和20例正常胃黏膜组织中的表达情况。结... 详细信息

目的探讨gas1在胃癌细胞系和组织中的差异表达及与胃癌发生、发展的关系。方法应用RT-PCR检测gas1在7个胃癌细胞系和23对胃癌配对组织标本中的表达情况,免疫组化检测gasl在43例手术切除的胃癌标本和20例正常胃黏膜组织中的表达情况。结果7个胃癌细胞系均不表达gas1mRNA;23对胃癌配对组织标本中癌旁组织gas1mRNA阳性表达率高于胃癌组织(P1);20例正常胃黏膜组织中有19例表达gasl蛋白(阳性表达率为95.0%),43例胃癌标本中有2例表达gasl蛋白(阳性表达率为4.65%),两者相比差异具有显著性(P1)。结论gasl在胃癌细胞系中表达缺失,可能与胃癌细胞系的细胞学特征有关;gasl在胃癌表达缺失,可能与胃癌的发生发展有关,gasl可作为判断胃癌生物学行为的一个有用指标。

关键词：胃癌 gas1 免疫组化逆转录聚合酶链反应

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生长停滞特异基因1与肿瘤发生发展关系及其机制研究进展

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现代肿瘤医学 2019年第8期27卷 1436-1440页

作者：李晓琳鲁祥石哈尔滨医科大学附属肿瘤医院乳腺外科黑龙江哈尔滨150086

生长停滞特异基因1(growth arrest specific 1,gas1)是一种表达于细胞中并编码抑制细胞生长的蛋白质,由于其结构特征,我们发现其能引起细胞周期停滞和细胞凋亡。研究发现,gas1与多种类型肿瘤的发生发展密切相关。本文讨论了gas1的结构... 详细信息

生长停滞特异基因1(growth arrest specific 1,gas1)是一种表达于细胞中并编码抑制细胞生长的蛋白质,由于其结构特征,我们发现其能引起细胞周期停滞和细胞凋亡。研究发现,gas1与多种类型肿瘤的发生发展密切相关。本文讨论了gas1的结构、功能及其在肿瘤中的研究进展,并引入TCGA数据库分析结果进行印证。

关键词： gas1 凋亡肿瘤

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