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中国矫形外科杂志 2009年第17期17卷 1338-1343页

作者：张成俊夏亚一王常德汪静汉华王翠芳兰州大学第二医院骨科研究所兰州730030

[目的]探讨流体切应力(Fss)促成骨细胞增殖、分化作用与细胞周期从g1期向s期转化机制的关系,为确立最佳生理应力刺激骨再生提供依据。[方法]从KM乳鼠颅盖骨提取原代成骨细胞,在体外流体小室内分别受Fss(12dyn/cm2)作用0、0.25、0.5、1、... 详细信息

[目的]探讨流体切应力(Fss)促成骨细胞增殖、分化作用与细胞周期从g1期向s期转化机制的关系,为确立最佳生理应力刺激骨再生提供依据。[方法]从KM乳鼠颅盖骨提取原代成骨细胞,在体外流体小室内分别受Fss(12dyn/cm2)作用0、0.25、0.5、1、2、4h,通过MTT法分析细胞增殖能力,并利用碱性磷酸酶(ALP)的表达评价其分化能力;通过流式细胞仪、免疫荧光染色和RT-PCR测定细胞周期g1/s百分比、细胞周期依赖激酶2和4(CDK2、CDK4)的活性改变及E2F1、p27mRNA的表达实现Fss促成骨细胞由g1期转向s期的测定。[结果]Fss促增殖作用在短期(0.25h、0.5h)明显,并且细胞生长曲线前移;但在1、2、4h却有明显抑制增殖作用。Fss同样增加了ALP的活性,尤其在应力作用0.25、0.5h时显著(比对照达128%和158%);而应力作用1、2、4h后减低了ALP的表达。在Fss作用1h内细胞周期s期百分比增高,作用0.5h后与对照组比较明显增高(Ps期百分比开始下降,当作用时间持续4h后s期百分比下降明显(P1表达量也明显增加;而细胞周期依赖激酶抑制剂p27在流体切应力作用下有所下降。其中流体切应力在0.25h、0.5h明显增加了E2FlmRNA的表达水平(P1h后减退。[结论]适宜的流体切应力通过上调CDK2、CDK4及E2F1,下调p27,使细胞从g1期转化到s期,在流体切应力促成骨细胞增殖、分化机制中起重要作用;并且这种作用有明显的Fss作用时间限制性。

关键词：成骨细胞流体切应力增殖分化细胞周期 g1/s调控点

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流体切应力调控成骨细胞周期g1/s点机制的实验研究

流体切应力调控成骨细胞周期G1/S点机制的实验研究

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作者：张成俊兰州大学

学位级别：硕士

目的:探讨流体切应力（Fss）促成骨细胞增殖、分化作用以及细胞周期从g1期向s期转化机制的关系,为确立最佳生理应力刺激骨再生提供依据。方法:从KM乳鼠颅盖骨提取原代成骨细胞,在体外流体小室内分别受Fss（12dyn/cm）作用0、0.25、0.5、... 详细信息

目的:探讨流体切应力（Fss）促成骨细胞增殖、分化作用以及细胞周期从g1期向s期转化机制的关系,为确立最佳生理应力刺激骨再生提供依据。方法:从KM乳鼠颅盖骨提取原代成骨细胞,在体外流体小室内分别受Fss（12dyn/cm）作用0、0.25、0.5、1、2、4小时,通过MTT法分析细胞增殖能力,利用碱性磷酸酶（ALP）的表达评价其分化性能;通过流式细胞仪、免疫荧光染色和RT-PCR测定细胞周期g1/s百分比、细胞周期依赖激酶2和4（CDK2、CDK4）的活性改变及E2F1、p27、sIVA-1mRNA的表达证明Fss促成骨细胞由g1期向s期的转化。结果:短期内（0.25h、0.5h）Fss促增殖作用明显,并且细胞生长曲线前移;但在1h、2h、4h却有明显抑制增殖作用。Fss同样增加了ALP的活性,尤其在应力作用0.25h、0.5h时显著（比对照达128%和158%）;而应力作用1h、2h、4h后减低了ALP的表达。在Fss作用1h内细胞周期s期百分比增高,作用0.5h后与对照组比较明显增高（Ps期百分比开始下降,当作用时间持续4h后s期百分比下降明显（P1表达量也明显增加;而细胞周期依赖激酶抑制剂p27和细胞凋亡诱导因子sIVA-1在流体应力作用下有所下降。其中流体切应力在0.25h、0.5h明显增加了E2F1mRNA的表达水平（P1h后此效应减退。结论:适宜的流体应力通过上调CDK2、CDK4及E2F1,下调p27、sIVA-1,使细胞从g1期转化到s期,在流体应力促成骨细胞增殖、分化机制中起重要作用;并且这种作用有明显的Fss作用时间限制性。

关键词：成骨细胞流体切应力增殖分化细胞周期 g1/s调控点

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