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乙醇及其代谢产物对新生大鼠原代培养心房肌细胞乙酰胆碱敏感型钾通道Kir3．1蛋白表达的影响

中华心血管病杂志 2015年第7期43卷 609-613页

作者：赵渊源孙婧菡胡军柏妮于波中国医科大学附属第一医院心血管内科沈阳110001

目的明确乙醇及其代谢产物乙醛对新生SD大鼠原代心房肌细胞乙酰胆碱敏感型钾通道Kir3．1蛋白表达的影响，并探讨该通道及乙醛在急性乙醇中毒引发心律失常的过程中所发挥的效应。方法采用胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶提取并培养150只新生SD大鼠... 详细信息

目的明确乙醇及其代谢产物乙醛对新生SD大鼠原代心房肌细胞乙酰胆碱敏感型钾通道Kir3．1蛋白表达的影响，并探讨该通道及乙醛在急性乙醇中毒引发心律失常的过程中所发挥的效应。方法采用胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶提取并培养150只新生SD大鼠原代心房肌细胞，并采用免疫荧光法进行肌钙蛋白I鉴定。采用细胞计数套件-8（CCK-8）法分别测定200-800mmol／L乙醇及50—500μmol／L乙醛处理24h后细胞的生存率，以确定导致新生sD大鼠原代心房肌细胞凋亡所需的乙醛及乙醇浓度。建立以最大非凋亡浓度（200mmol／L）的乙醇处理24h及相应剂量（100Ixmol／L）乙醛处理24h的新生SD大鼠原代心房肌细胞模型。采用Westernblot法检测乙醇处理组、乙醛处理组及对照组心房肌细胞Kir3．1蛋白的表达情况，并对结果进行统计学分析。结果（1）成功培养新生SD大鼠原代心房肌细胞，细胞免疫荧光鉴定所培养细胞为心肌细胞，且90％以上细胞肌钙蛋白I染色阳性。（2）CCK-8法测定显示400mmol／L以上的乙醇处理组的心肌细胞生存率明显低于对照组（P〈0．05），而200mmol／L及以下的乙醇处理组心肌细胞生存率与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）；400μmol／L以上的乙醛处理组的心肌细胞生存率明显低于对照组（P〈0．05），而350μmol／L及以下的乙醛处理组心肌细胞生存率与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）Westernblot检测显示200mmol／L乙醇及100vmol／L的乙醛处理24h的新生SD大鼠原代房心肌细胞Kit3．1蛋白表达分别高于对照组（44．52±23．07）％及（45．04±22．01）％（P〈0．01），而乙醇组与乙醛组之间Kir3．1蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论急性乙醇及乙醛处理均能够明显上调乙酰胆碱敏感型钾通道Kir3．1蛋白的表达。

关键词：乙醇乙醛肌细胞心脏 g蛋白偶联内向整流钾通道心律失常

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氟西汀对慢性脑缺血大鼠工作记忆损伤的保护作用及其机制的研究

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中国脑血管病杂志 2020年第6期17卷 320-326页

作者：肖敏张力赵宏峰经屏华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院神经内科武汉430014

目的探讨氟西汀对大鼠慢性脑缺血所致工作记忆损伤的改善作用及其作用机制。方法选用Sprague Dawley雄性大鼠44只,采用双侧颈总动脉结扎术建立慢性脑缺血模型,将其分为假手术组(10只)、缺血模型组(12只)、缺血+氟西汀组(12只)、假手术+... 详细信息

目的探讨氟西汀对大鼠慢性脑缺血所致工作记忆损伤的改善作用及其作用机制。方法选用Sprague Dawley雄性大鼠44只,采用双侧颈总动脉结扎术建立慢性脑缺血模型,将其分为假手术组(10只)、缺血模型组(12只)、缺血+氟西汀组(12只)、假手术+氟西汀组(10只)。氟西汀在缺血1周后经灌胃给药,持续给药4周。假手术组与缺血模型组给予相同体积的等渗盐水。采用改良的水迷宫实验检测各组大鼠的工作记忆表现,该实验持续4 d;采用免疫印迹法检测各组大鼠前额皮质中神经元标记物神经元核、星形胶质细胞标记物S-100β、g蛋白门控内向整流钾离子(girK)通道蛋白(girK1、girK2、girK3)以及分拣连接蛋白27(SNX27)的表达水平并进行组间比较。结果(1)4组大鼠游泳速度组间差异无统计学意义(P>0.05)。在训练试验中,4组大鼠逃逸潜伏期及游泳距离的组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。在记忆保持试验中,与假手术组同时点比较,缺血模型组大鼠在实验第2、3、4天逃逸潜伏期明显延长[第2天:(48.2±6.3)s比(27.4±4.0)s,第3天:(53.9±6.4)s比(29.4±6.3)s,第4天:(41.4±4.9)s比(23.8±3.7)s;均P0.05)。(3)4组大鼠girK1膜蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05),假手术组为参照,缺血模型组、缺血+氟西汀组girK2相对灰度值分别为(1.27±0.07)、(1.06±0.06),缺血模型组、缺血+氟西汀组girK3相对灰度值分别为(1.23±0.08)、(1.00±0.06),缺血模型组girK2及girK3膜表达均高于假手术组,与缺血模型组比较,缺血+氟西汀组girK2及girK3膜表达上调均受到抑制,组间差异均有统计学意义(均PgirK2及girK3的膜表达上调。

关键词：氟西汀脑缺血记忆,短时 g蛋白偶联内向整流钾通道

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鞘内注射右美托咪定对糖尿病神经痛大鼠背根神经节gIRK1表达的影响

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中华麻醉学杂志 2016年第4期36卷 474-477页

作者：李莉黄焕森汪灵芝连肖强阮林西南医科大学附属医院麻醉科泸州市646000 广州医科大学附属第二医院麻醉科 510260

目的评价鞘内注射右美托咪定对糖尿病神经痛大鼠背根神经节g蛋白偶联内向整流钾通道1（gIRK1）表达的影响。方法 SPF级健康成年雄性SD大鼠144只，8～10周龄，体重200～220 g，采用随机数字表法分为4组（n＝36）：正常对照组（C组）、... 详细信息

目的评价鞘内注射右美托咪定对糖尿病神经痛大鼠背根神经节g蛋白偶联内向整流钾通道1（gIRK1）表达的影响。方法 SPF级健康成年雄性SD大鼠144只，8～10周龄，体重200～220 g，采用随机数字表法分为4组（n＝36）：正常对照组（C组）、右美托咪定组（D组）、糖尿病神经痛组（DNP组）和糖尿病神经痛＋右美托咪定组（DD组）。采用腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg的方法制备大鼠糖尿病神经痛模型。D组和DD组于注射枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液或链脲佐菌素后14 d时鞘内注射右美托咪定1.5 μg/kg，C组鞘内注射等容量生理盐水。于注射链脲佐菌素前（T0）、注射链脲佐菌素后14 d（T1）、鞘内注射后2、4和6 h（T2～4）时测定机械痛阈，于T2～4时测定痛阈后处死大鼠取脊髓背根神经节，采用免疫荧光法检测gIRK1阳性细胞数目，Western blot法检测gIRK1的表达。结果与DNP组比较，DD组T2～4时机械痛阈升高，脊髓背根神经节gIRK1阳性细胞计数增加，gIRK1表达上调（P〈0.05）；与D组比较，DD组T2～4时脊髓背根神经节gIRK1阳性细胞计数增加，gIRK1表达上调（P〈0.05）；与C组比较，DNP组T1～4时机械痛阈降低（P〈0.05）。结论鞘内注射右美托咪定通过上调背根神经节gIRK1表达减轻大鼠糖尿病神经痛。

关键词：右美托咪啶糖尿病神经痛神经节脊 g蛋白偶联内向整流钾通道

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