检索结果-南通市图书馆

作者：秦伟杰山东大学

学位级别：硕士

研究背景、存在的科学问题及研究意义昆虫的生长发育需要经历生长、繁殖、死亡的生命过程。昆虫必须通过蜕皮激素(20-羟基蜕皮酮,20-hydroxyecdysone,20E)的作用起始蜕皮(molting)才能继续生长。全变态昆虫(holometabolous)的一个世代... 详细信息

研究背景、存在的科学问题及研究意义昆虫的生长发育需要经历生长、繁殖、死亡的生命过程。昆虫必须通过蜕皮激素(20-羟基蜕皮酮,20-hydroxyecdysone,20E)的作用起始蜕皮(molting)才能继续生长。全变态昆虫(holometabolous)的一个世代需要经历卵、幼虫、蛹和成虫四个阶段。每一阶段向下一阶段的过渡以及幼虫阶段不同龄期之间的生长发育都需要蜕皮。棉铃虫(Helicoverpa armigera)属于昆虫纲鳞翅目,它的上述蜕皮行为为研究诸如细胞凋亡、分化、组织重建等生命过程提供了良好的实验平台。目前生命科学领域研究的热点课题之一就是甾醇类激素的膜受体,集中于受体的寻找以及信号传递过程的早期阶段的机制,即甾醇类激素的膜受体是否存在以及激素信号是如何与它们的膜受体结合并将信号传递至胞内的。越来越多的研究表明存在甾醇类激素膜受体,并对膜信号途径进行了初步研究。gβ是异源三聚体g蛋白的亚基,主要功能是与g蛋白γ亚基(gγ)形成gβγ二聚体,并与g蛋白α亚基(gα)形成异源三聚体,接受gPCR信号并将信号向下游传递。有报道显示g蛋白偶联受体(g protein coupled receptors, gPCRs)作为膜受体参与了20E信号途径,并将信号传递至胞内,启动钙离子通道,从而引起细胞程序性死亡。本研究的主要内容集中于gPCR信号途径g蛋白beta亚基(gβ)。本研究的目的在于探索gβ与20E信号途径的方式以及gβ在其中所起的作用。研究结果本文对gβ基因在棉铃虫组织的分布以及发育阶段的转录水平变化进行了初步探索,通过添加外源蜕皮激素的方式研究蜕皮激素对该基因转录水平的影响,并且通过RNA干扰技术研究沉默此基因后对于20E信号途径中的重要基因转录水平的影响。研究发现该基因在棉铃虫四种组织中均有不同程度的表达,并且该基因在棉铃虫变态期的中肠组织中表达量较高,而此时20E滴度正处于峰值。棉铃虫表皮细胞系以及虫体水平的激素刺激实验都表明该基因可被20E上调表达。沉默该基因后,幼虫的生长发育受到影响,20E调控的多个重要转录因子转录水平下调,这表明gβ基因参与20E信号途径。该基因的亚细胞定位也可受20E的诱导而由细胞膜附近向胞质内迁移,这表明20E可通过非基因组途径参与对细胞生命活动的调节。研究结论与意义本文通过研究发现了鳞翅目昆虫棉铃虫中的一种g蛋白p亚基在幼虫发育的变态期中肠组织中高表达,首次发现该基因可直接参与20E信号转导途径,并响应20E的诱导上调：沉默该基因后,幼虫生长发育延迟,与20E途径相关的重要早期基因转录水平受到抑制;并且发现20E可诱导该基因向细胞质内的迁移。本文结果为研究20E通过g蛋白信号途径调节昆虫幼虫蜕皮变态提供了新的数据支持。

关键词：蜕皮变态 gPCR 膜受体 g蛋白 gβ RNA干扰

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Cloning and Expression Analysis of Rrg-Beta1 gene Related to Anthocyanin Biosynthesis in <i>Rosa rugose</i>

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American Journal of Plant Sciences 2018年第11期9卷 2244-2255页

作者： Yenan Wang Mingyuan Zhao Xu Han Lanyong Zhao Zongda Xu College of Forestry Shandong Agricultural University Taian China

As an important signal transduction protein, g protein beta subunit gene encoded by oligonucleotides plays an important role in many physiological, biochemical and environmental stresses in plants. In order to understand the action mode of g protein beta subunit gene, this paper cloned a Wd40 gene related to g protein beta subunit gene, named Rrg-beta1, based on the R. rugose—transcriptome data, using Rosa rugose “Zi zhi” as experimental materials. The full length of cDNA of the gene was obtained by RT-PCR and RACE methods. The total length of this gene is 981 bp, and it encodes 326 amino acids. After bioinformatics analysis, the molecular formula C1601H2520N450O486S11 was predicted;the relative molecular weight was 36,201.00 Da;the theoretical isoelectric point PI value was 6.71;and its instability index was 30.44. The total average hydrophobic index was -0.847. In the secondary structure of Rrg-beta1 protein, there are 17 α-helix, 131 Random coil, and 141 extended peptide chain. gene Bank Blast results showed that the amino acid sequence encoded by Rrg-beta1 was more than 90% homologous with the beta-like protein of Rosa chinensis, Fragaria, Malus, Pyrus, Prunus, Arabidopsis and tobacco, so it can be inferred that the Rrg-beta1 gene is guanine nucleotide-binding protein subunit beta-like protein. Fluorescence quantitative expression analysis of Rrg-beta1 protein decreased with the development of flower color, and it was speculated that it could exert negative regulation effect on flower color. The leaf expression was highest in the tissue part, so it was inferred that the signal was transmitted through the stoma on the leaf.

关键词： Rosa rugose gβ Signal Transduction Drought Stress gene Expression

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