检索结果-南通市图书馆

丁酸梭菌活化g蛋白偶联受体43抑制肠癌发生的机制研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

丁酸梭菌活化G蛋白偶联受体43抑制肠癌发生的机制研究

作者：陈丹凤天津医科大学

学位级别：硕士

目的在全球范围内,结直肠癌（colorectal cancer,CRC）在所有癌症中发病率排名第三,死亡率排名第二,对全球健康造成重大威胁。人体肠道寄居着庞大而多样的微生物,包含约1000种细菌。肠道微生物作为一个整体,参与了人体的营养、免疫以及... 详细信息

目的在全球范围内,结直肠癌（colorectal cancer,CRC）在所有癌症中发病率排名第三,死亡率排名第二,对全球健康造成重大威胁。人体肠道寄居着庞大而多样的微生物,包含约1000种细菌。肠道微生物作为一个整体,参与了人体的营养、免疫以及新陈代谢,与健康和疾病紧密关联。越来越多的证据表明,肠道菌群能影响CRC的发生发展,或可作为CRC防治靶点。和健康人群相比,CRC患者粪便以及肠道的丁酸梭菌明显减少,提示了丁酸梭菌潜在抑制CRC的作用。丁酸梭菌能发酵膳食纤维产生丁酸,影响细胞代谢、基因表达、表观遗传调节和菌群内稳态,改善肠道黏膜的功能,发挥抗炎和抗肿瘤等作用。g蛋白偶联受体43（g-protein coupled receptor 43,gPR43）是一种传递跨膜信号的膜蛋白受体,能被短链脂肪酸激活。gPR43缺失可导致肠道上皮屏障功能受损,增加小鼠对CRC的易感性。本研究旨在探索丁酸梭菌活化gPR43进而抑制肠癌发生的机制。方法丁酸梭菌菌液上清和丁酸钠刺激人CRC细胞株,用CCK-8试剂盒检测不同浓度和时间处理后CRC细胞的增殖水平,Realtime-PCR技术检测g蛋白偶联受体gPR43以及细胞周期依赖激酶抑制因子P21mRNA表达水平。用si RNA介导gPR43基因沉默,探究gPR43在丁酸梭菌上清抑制CRC中的作用。购入4周龄Apc小鼠分成三组:普通饮食（16%脂肪含量）-PBS组、高脂饮食（60%脂肪含量）-PBS组和高脂饮食-丁酸梭菌组,在SPF环境下饲养12w后,杀死小鼠并记录肠道肿瘤数量及大小。HE染色评估肿瘤恶变情况,Real-time PCR法检测结肠肿瘤的gPR43和P21mRNA水平变化。收集临床正常结肠、腺瘤、腺癌组织,免疫组织化学法评估gPR43表达水平的差异。结果（1）随着处理时间的增加,相对较高浓度（20%）的丁酸梭菌上清抑制肠癌细胞增殖作用更加明显。而较低浓度的丁酸梭菌上清几乎不影响细胞增殖。随着丁酸钠刺激浓度的上升,肠癌细胞增殖抑制逐渐明显。而抑制作用并未随丁酸钠刺激时间的延长而增强。（2）运用Realtime-PCR技术检测gPR43和P21的mRNA水平,发现与对照组相比,丁酸梭菌上清和丁酸钠刺激后,gPR43和P21的mRNA水平明显升高。（3）与阴性si RNA组相比,gPR43 si RNA组gPR43mRNA水平明显下降。gPR43的基因沉默明显削弱了丁酸梭菌上清的抗增殖作用。此外,丁酸梭菌上清上调了gPR43和P21mRNA表达,而gPR43 si RNA阻断了丁酸梭菌上清对gPR43和P21表达的上调作用。（4）饲养Apc小鼠12周后,单纯HFD组体重显著高于对照组,而丁酸梭菌干预后,体重未见明显减轻。HFD可显著增加肠道总腺瘤数、结肠腺瘤数和肠道腺瘤负荷,且丁酸梭菌干预明显降低上述指标。HFD组肠道不同大小（﹤1mm,1-2mm,﹥2mm）的腺瘤数量显著增加,丁酸梭菌组﹥1mm腺瘤数量明显降低。HE染色显示70%HFD组小鼠结肠出现高级别上皮内瘤变,而丁酸梭菌组小鼠仅可见少量低级别上皮内瘤变。（5）与单纯高脂饮食组相比,丁酸梭菌组结肠肿瘤组织的gPR43和P21的mRNA水平明显增加。（6）从临床正常结肠组织到腺瘤到腺癌,gPR43表达逐渐降低。结论丁酸梭菌可通过活化gPR43抑制肠癌发生。丁酸梭菌在肠癌防治方面可能拥有广阔前景。

关键词：丁酸梭菌丁酸肠癌 g蛋白偶联受体43 P21WAF1 Apcmin/+小鼠

异功散防治幼鼠哮喘短链脂肪酸-g蛋白偶联受体43作用机制研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

世界中医药 2023年第14期18卷 1960-1965页

作者：林晓玲周娟叶丽妍陈佩文叶绮娜刘华陈晓刚广州中医药大学第一临床医学院广州510405 广州中医药大学第一附属医院儿科广州510405 广州妇女儿童医疗中心广州510623

目的:通过动物实验,研究异功散早期干预下支气管哮喘模型幼鼠血清短链脂肪酸(SCFAs)及肺组织g蛋白偶联受体43(gPR43)表达的变化,探索异功散防治哮喘的作用机制。方法:7日龄BALB/c雌性幼鼠共32只,随机分为空白组、模型组、中药组(异功散... 详细信息

目的:通过动物实验,研究异功散早期干预下支气管哮喘模型幼鼠血清短链脂肪酸(SCFAs)及肺组织g蛋白偶联受体43(gPR43)表达的变化,探索异功散防治哮喘的作用机制。方法:7日龄BALB/c雌性幼鼠共32只,随机分为空白组、模型组、中药组(异功散)和益生菌组(酪酸梭菌),以鸡卵清蛋白(OVA)致敏激发法制备哮喘幼鼠模型后,检测其血清SCFAs含量及肺组织gPR43的表达。结果:与空白组比较,模型组血清SCFAs中乙酸浓度升高,丙酸、丁酸浓度降低,但差异均无统计学意义(均P>0.05);肺组织gPR43表达有增高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,中药组及益生菌组血清SCFAs中乙酸浓度升高、丁酸浓度下降,差异均无统计学意义(均P>0.05),但血清乙酸相对比值升高,差异有统计学意义(PgPR43表达显著高于模型组(PgPR43表达之间无显著相关(P>0.05)。结论:异功散的早期干预可能影响了哮喘幼鼠肠道菌群的SCFAs代谢,并上调了肺组织gPR43表达,但对这二者的作用并无显著相关性。

关键词：异功散支气管哮喘短链脂肪酸 g蛋白偶联受体43 动物实验中医药防治机制

基于gPR43/β-arrestin-2/IκBα/NF-κB通路探讨左归降糖通脉方对高糖合并LPS诱导的人脐静脉内皮细胞炎性损伤的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 64-74页

作者：彭岚玉姚敬心李钰佳李定祥刘迅邓奕辉湖南中医药大学中西医结合学院长沙410208 湖南中医药大学中医学院长沙410208

目的:探讨左归降糖通脉方(ZJTP)对高糖合并脂多糖(LPS)损伤后人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响及作用机制。方法:通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞存活率、酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平确定LPS最... 详细信息

目的:探讨左归降糖通脉方(ZJTP)对高糖合并脂多糖(LPS)损伤后人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响及作用机制。方法:通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞存活率、酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平确定LPS最适损伤浓度及作用时间、ZJTP含药血清的最佳作用浓度。将HUVECs分为空白组、模型组、ZJTP含药血清组、短链脂肪酸(SCFAs)混合液组。采用ELISA检测内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和TNF-α的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测g蛋白偶联受体43(gPR43)、β-抑制蛋白-2(β-arrestin-2)、核转录因子-κB抑制因子α(IκBα)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达;免疫荧光法(IF)观察NF-κB p65入核情况。运用小干扰核糖核酸(siRNA)的方法观察gPR43在炎性损伤调控中的作用。将干扰后的细胞分为空载体组、ZJTP含药血清组、Si-gPR43组、Si-gPR43+ZJTP含药血清组。ELISA检测IL-1β、IL-6和TNF-α含量;Western blot检测通路蛋白表达;IF观察NF-κB p65入核情况。结果:最适造模条件为1 mg·L^(-1) LPS作用24 h;最佳药物干预条件为5%的ZJTP含药血清作用24 h。与空白组比较,模型组ET-1含量显著升高,NO含量显著下降(PgPR43和IκBα蛋白表达量下降,β-arrestin-2和NF-κB p65蛋白表达量显著升高(P蛋白由核外转移至核内(PgPR43和IκBα蛋白表达升高,β-arrestin-2和NF-κB p65表达下降(PgPR43组比较,ZJTP含药血清干预后IL-1β、IL-6和TNF-α含量显著下降(PgPR43和IκBα蛋白表达量显著上升(P蛋白表达量显著下降(PgPR43/β-arrestin-2/IκBα/NF-κB通路有关。

关键词：人脐静脉内皮细胞炎性损伤左归降糖通脉方 g蛋白偶联受体43 核转录因子-κB

基于gPR43/β-arrestin-2/IκBα/NF-κB通路探讨左归降糖通脉方对糖尿病大鼠血管内皮炎性保护的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国中西医结合杂志 2024年第5期44卷 558-566页

作者：彭岚玉李定祥姚敬心蔡昱哲邓奕辉湖南中医药大学中西医结合学院长沙410208 湖南中医药大学中医学院长沙410208

目的研究左归降糖通脉方对2型糖尿病(T2DM)大鼠血管内皮功能障碍的影响与作用机制。方法高脂饲料喂养联合链脲佐菌素腹腔注射的方法制备模型。将SD大鼠随机分为空白组、模型组、左归降糖通脉方低剂量(12 g/kg,ZJTF-L)组、左归降糖通... 详细信息

目的研究左归降糖通脉方对2型糖尿病(T2DM)大鼠血管内皮功能障碍的影响与作用机制。方法高脂饲料喂养联合链脲佐菌素腹腔注射的方法制备模型。将SD大鼠随机分为空白组、模型组、左归降糖通脉方低剂量(12 g/kg,ZJTF-L)组、左归降糖通脉方高剂量(24 g/kg,ZJTF-H)组、二甲双胍+阿托伐他汀(150 mg/kg+10 mg/kg、西药联用)组、短链脂肪酸(500 mg/kg,SCFAs)组,每组10只。干预结束后,采用透射电镜观察大鼠颈动脉超微结构变化;ELISA检测血清胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbAlc)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管内皮细胞黏附分子1(VCAM-1)、内皮素1(ET-1)、白细胞介素-1 β(IL-1 β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;生化分析法检测血清一氧化氮(NO)的含量;分别采用Western Blot、q PCR检测g蛋白偶联受体43(gPR43)、β-抑制蛋白2(β-arrestin-2)、核因子κB抑制因子α(IκBα)、核因子κB p65(NF-κBp65)的蛋白表达与mRNA水平。结果与空白组比较,模型组体重下降,血糖显著升高(PgPR43、IκBα蛋白表达与mRNA水平显著降低(P蛋白表达与mRNA水平显著升高(PgPR43、IκBα蛋白表达与mRNA水平明显升高(P蛋白表达与mRNA水平明显下降(PgPR43/β-arrestin-2/IκBα/NF-κB信号通路有关。

关键词：左归降糖通脉方 2型糖尿病 g蛋白偶联受体43 β-抑制蛋白2 核因子κB抑制因子α 核因子κB 中药复方

团头鲂gPR43基因克隆、组织分布及黄连素对其mRNA表达量的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

水生生物学报 2018年第4期42卷 663-672页

作者：陈丹红陈青青刘文斌张定东徐维娜南京农业大学动物与科技学院江苏省水产动物营养重点实验室南京210095 上海交通大学农业与生物学院上海200240

试验采用RACE技术克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)g蛋白偶联受体43(gPR43)基因的c DNA序列,并探究了不同组织中的gPR43 m RNA表达量及黄连素对其表达量的影响。结果显示,克隆得到的团头鲂gPR43基因的c DNA序列全长为2026 bp,含... 详细信息

试验采用RACE技术克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)g蛋白偶联受体43(gPR43)基因的c DNA序列,并探究了不同组织中的gPR43 m RNA表达量及黄连素对其表达量的影响。结果显示,克隆得到的团头鲂gPR43基因的c DNA序列全长为2026 bp,含有1个长度为981 bp的开放阅读框,编码了326个氨基酸。RT-PCR检测发现gPR43在团头鲂的肠道、肌肉、鳃和肝胰腺中具有较高的表达。为期8周的养殖试验选取均重为(80.00±0.90)g的团头鲂320尾,随机分于16个网箱中,饲喂4种不同的试验日粮,分别为正常日粮(脂肪含量为5%)、正常日粮+50 mg/kg黄连素、高脂日粮(脂肪含量为10%)、高脂日粮+50 mg/kg黄连素。结果显示:在肠道组织中,与正常日粮组相比,高脂组的gPR43表达量降低,添加黄连素能够显著升高其表达水平(P蛋白激酶(p38)的表达量均呈现了显著上升(P蛋白激酶(AMPK)的表达量以及2个组织中的饱和脂肪酸(SFA)和单不饱和脂肪酸(MUFA)含量呈现出了相反的趋势。此外,在正常日粮中添加黄连素并不能对上述各指标产生明显的调控效应,有时反而会导致轻微的负调控效应。综上结果表明,黄连素能够显著上调gPR43在高脂抑制下的表达量,同时能够缓解高脂诱导的团头鲂肝胰腺脂肪沉积,改善其脂肪代谢性能。黄连素对于脂肪代谢的调控作用可能通过gPR43受体来实现。

关键词：黄连素团头鲂脂肪代谢性能 g蛋白偶联受体43

黄连素对高脂诱导下团头鲂生长性能、免疫性能及脂肪代谢的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黄连素对高脂诱导下团头鲂生长性能、免疫性能及脂肪代谢的影响

作者：陈青青南京农业大学

学位级别：硕士

试验以团头鲂(Megalobrama amblycephalaa)作为模式动物,通过高脂诱导肝胰脏脂肪沉积,以中草药黄连素作为外源性脂肪代谢调控剂,探讨黄连素对团头鲂生长性能、免疫性能、抗氧化性能、细胞凋亡及脂肪代谢性能的影响;结合体外细胞试验,进... 详细信息

试验以团头鲂(Megalobrama amblycephalaa)作为模式动物,通过高脂诱导肝胰脏脂肪沉积,以中草药黄连素作为外源性脂肪代谢调控剂,探讨黄连素对团头鲂生长性能、免疫性能、抗氧化性能、细胞凋亡及脂肪代谢性能的影响;结合体外细胞试验,进一步探究黄连素的生物安全性并验证其调脂性能。本试验分为以下三个方面的内容:第一章黄连素对高脂投喂的团头鲂生长性能、免疫性能和抗氧化性能的影响为探讨黄连素对团头鲂生长性能、免疫性能及抗氧化性能的影响,试验选取均重为(80.00±0.90)g的团头鲂320尾,随机分于16个网箱中,分别以4种不同的试验日粮(正常脂肪日粮、正常脂肪日粮+50mg/kg黄连素、高脂日粮、高脂日粮+50mg/kg黄连素,其中正常脂肪日粮脂肪含量为5%,高脂日粮脂肪含量为10%)投喂8周,即四组(ND组、NDB组、HD组、HDB组)四重复。养殖试验结束后随即进行为期5天的氨氮应激试验。结果显示,在试验日粮中添加黄连素后,正常脂肪日粮添加黄连素组的增重率(Wg)及特定增长率(SgR)均显著高于其它各组(P0.05)。高脂组的各项免疫参数包括酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LYZ)和蛋白补体C3、C4均显著低于对照组(P0.05);与对照组相比,高脂日粮组的肝胰脏抗氧化指标包括丙二醛(MDA)、蛋白羰基(PC)及脂质过氧化物(LPO)均显著增加(P0.05)。在氨氮应激试验中,高脂日粮添加黄连素组的累计死亡率明显低于其它各组(PgPR43基因克隆、组织分布及黄连素对其mRNA表达量的影响为探讨黄连素对g蛋白偶联受体43(gPR43)mRNA表达量的影响以及对高脂投喂下团头鲂脂肪代谢性能的调控作用,试验设计与养殖管理同试验一。试验采用RACE技术克隆了团头鲂gPR43基因的cDNA序列,并探究了不同组织中的gPR43 mRNA表达量及不同日粮饲喂下团头鲂的肝胰脏、肌肉和肠道中gPR43 mRNA表达的差异。结果显示,克隆得到的团头鲂gPR43基因的cDNA序列全长为2026 bp,含有1个长度为981 bp的开放阅读框,编码了 326个氨基酸。RT-PCR检测发现gPR43在团头鲂的肠道、肌肉、鳃和肝胰脏中具有较高的表达。此外,在肠道组织中,与对照组相比,高脂组的gPR43表达量有明显下调(P0.05)。与对照组相比,高脂组的游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(Tg)、胆固醇(CHO)以及细胞分裂素蛋白激酶(P38)、过氧化物酶体增值因子丫(PPARy)的定量表达均呈现了显著上升(P蛋白激酶(AMPK)的表达量均呈现出了相反的趋势。另外,正常脂肪日粮中添加黄连素并不能对上述各指标产生明显的调控效应,有时反而会产生轻微的负调控效应。以上结果表明,黄连素能够明显缓解高脂诱导的团头鲂肝胰脏脂肪沉积,改善其脂肪代谢性能,而这些作用可能跟gPR43受体有关。第三章黄连素对游离脂肪酸诱导的淡水鱼类肝细胞脂肪沉积的影响为了进一步验证黄连素作为功能性饲料添加剂对于脂肪异位沉积的调控性能及生物安全性,本研究通过体外细胞诱导试验探究了黄连素的作用对草鱼肝细胞活性以及细胞凋亡的影响,并以棕榈酸(PA)诱导肝细胞脂肪沉积,验证黄连素对脂肪过度沉积现象的调控作用。结果显示,黄连素作用6h即能对肝细胞活性产生影响,当其发挥调节作用时,随着添加浓度的提高,细胞活性逐渐降低,5μM时下降的趋势最明显(P<0.05)。同时,

关键词：黄连素团头鲂免疫能力脂肪代谢性能 g蛋白偶联受体43

短链脂肪酸含量对顽固性便秘病人结肠动力的影响及机理

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

短链脂肪酸含量对顽固性便秘病人结肠动力的影响及机理

作者：史益凡南京大学

学位级别：硕士

目的:通过对比分析顽固性便秘患者粪便短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)含量的差异和结肠组织g蛋白偶联受体43(g protein-coupled receptor43,gPR43)及胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)表达的变化,探讨SCFAs在顽固性便秘患者中的作用和临床意义。方法:根据Wexne[1]便秘评分,将顽固性便秘患者分为Eg1组:Wexner评分16～20;Eg2组:Wexner评分21～25;Eg3组:Wexner评分26-30,每组各取20例,均行结肠次全切除、升结肠直肠侧侧吻合术,取升结肠全层肠壁组织作为实验组。选取结肠癌患者10例,行结肠癌根治术,取升结肠全层肠壁组织作为对照组。取所有患者粪便样本提取SCFAs,采用气相色谱-质谱联用技术(gas chromatography-mass spectrometry,gC-MS)对 SCFAs 的含量进行定量检测。分别采用Western-blot、免疫荧光染色和RT-PCR技术检测gPR43以及ChAT在结肠组织中的表达。结果:与对照组相比,实验组粪便中乙酸、丙酸和丁酸的含量均明显减少(PgPR43和ChAT灰度比显著减少(PgPR43和ChAT平均光密度值显著低于对照组(PgPR43和ChAT基因扩增倍数显著低于对照组(PgPR43和ChAT表达显著减少,且与Wexner便秘评分呈负相关,粪便SCFAs含量的减少可能与顽固性便秘的发生与发展密切相关。

关键词：短链脂肪酸 g蛋白偶联受体43 胆碱乙酰转移酶 Wexner便秘评分顽固性便秘

gPR43通过CypD通路调控阿尔茨海默病的线粒体凋亡机制

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

GPR43通过CypD通路调控阿尔茨海默病的线粒体凋亡机制

作者：王小琴重庆医科大学

学位级别：硕士

背景:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种常见的慢性疾病,是导致老年人痴呆的主要疾病之一。多数AD患者大脑存在复杂的神经病理学改变,其中神经损伤被认为在AD病程进展中起着重要作用。g蛋白偶联受体43(g protein-coupled rec... 详细信息

背景:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种常见的慢性疾病,是导致老年人痴呆的主要疾病之一。多数AD患者大脑存在复杂的神经病理学改变,其中神经损伤被认为在AD病程进展中起着重要作用。g蛋白偶联受体43(g protein-coupled receptor 43,gPR43)有神经调节作用,但其在AD中的具体作用机制尚不明确。方法:本研究采用8月龄雄性C57BL/6以及小鼠神经元细胞系HT22为研究对象,采用侧脑室注射Aβ1-42 1mg/ml构建AD动物模型。采用Aβ1-42 10μM构建AD细胞模型。采用水迷宫(MWM)、Y型迷宫、旷场测试(OFT)和新奇事物(NOR)观察小鼠的行为学改变,采用RT-q PCR RNA检测gPR43m RNA水平,采用免疫组化和免疫蛋白印迹实验检测gPR43蛋白水平,利用免疫荧光、苏木精-伊红染色、尼式染色、线粒体功能和凋亡实验检测gPR43对AD小鼠大脑的神经病理学的改变,利用si-RNA对HT22进行si-gPR43细胞的构建,利用亲环素D(Cyclophilin D,Cyp D)的抑制剂环孢菌素A(Cyclosporine A,CSA)对gPR43在AD的神经病理方面的机制的探索。结果:Aβ1-42诱导的AD模型中gPR43在海马和皮质组织中均表达下降,在Aβ1-42注射后4周发现蛋白表达量最低;在Aβ1-42诱导的AD模型中gPR43在海马和皮质组织中均与神经元产生共定位,而与小胶质细胞、星形胶质细胞未发生定位;过表达gPR43减轻AD小鼠的认知能力损害;过表达gPR43减少AD小鼠的神经元细胞死亡和减轻突触损伤;过表达gPR43减轻AD小鼠的线粒体功能损伤和抑制凋亡的发生;gPR43通过亲环素D通路调控AD的凋亡发生。结论:gPR43通过Cyp D信号通路抑制凋亡的发生,减轻AD的小鼠的线粒体功能损伤,改善AD小鼠的认知功能。

关键词：阿尔茨海默病 g蛋白偶联受体43 亲环素D 神经元突触线粒体凋亡