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Expression of c-fos protein and nitricoxide synthase in neurons of cerebral cortex from fetal rats in hypoxia and protective role of Angelica sinensis

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Neural Regeneration Research 2006年第1期1卷 74-77页

作者： Hong Yu Hongxian Zhao Yuling Wu Department of Histology and Embryology Luzhou Medical Collegeof Sichuan Province Luzhou 646000 Sichuan Province China

BACKGROUND： Both c-fos protein and nitricoxide synthase （NOS） have been used as general indexes in relative research about neurons, but it is lack of reports that c-fos protein and NOS are applied synchronously to study the neurons of hypoxic fetal rats in uterus. OBJECTIVE： To study the effect of hypoxia in uterus on the expression of c-fos protein and NOS in neurons of cerebral cortex from fetal rats and whether Angelica sinensis has the protective effect on these neurons in hypoxia. DESIGN： Randomized control experiment.SETTING ： Department of Histology and Embryology, Luzhou Medical College.MATERIALS ： Twelve adult female Wistar rats in oestrum and 1 male Wistar rat with bodymass from 220 to 250 g were chosen. Parenteral solution of Angelica sinensis mainly contained angelica sinensis, 10 mL/ampoule, was provided by Department of Agent of the Second Hospital Affiliated to Hubei Medical University （batch number： 01062310）. METHODS ： This experiment was completed in the Department of Histology and Embryology of Luzhou Medical College from September 2003 to June 2004. ①Twelve adult female Wistar rats in oestrum and 1 male Wistar rat were housed in one rearing cage. Vaginal embolus was performed on conceive female rat at 8： 00 am next day. On the 15^th conceiving day, all conceiving rats were divided randomly into three groups： control group, hypoxia group and Angelica group with 4 in each group. Rats in hypoxia group and Angelica group were modeled with hypotonic hypoxia in uterus. Angelica group： Rats were injected with 8 mL/kg Angelica sinensis injection through caudal veins before hypoxia. Hypoxia group： Rats were injected with the same volume of saline. Control group： Rats were not modeled and fed with normal way. ② Twenty embryos of rats were chosen randomly from each group and then routinely embedded in paraffin. Paraffin sections were cut from the brain of embryos to anterior fontanelle. Double-label staining was used to detect the expression of nNOS and c-fos in neurons of cerebral cortex from

关键词： fos Expression of c-fos protein and nitricoxide synthase in neurons of cerebral cortex from fetal rats in hypoxia and protective role of Angelica sinensis

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后肢去负荷大鼠前扣带回皮质神经元fos表达的时间模式

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神经解剖学杂志 2023年第1期39卷 1-7页

作者：张卓超金坤张勇张婷李辉张富兴董加强空军军医大学人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心西安710032 解放军总医院第一医学中心肝胆胰外科医学部北京100000 空军军医大学基础医学院外语教研室西安710032 空军军医大学第一附属医院消化内科西安

目的:研究模拟失重模型动物前扣带回皮质(anterior cingulated cortex,ACC)神经元激活状况及其变化的时间模式。方法:将SD大鼠随机分成4组。所有动物采用吊尾、头低位方式使后肢去负荷(hind-limb unloading,HU)方式模拟失重生理。第一... 详细信息

目的:研究模拟失重模型动物前扣带回皮质(anterior cingulated cortex,ACC)神经元激活状况及其变化的时间模式。方法:将SD大鼠随机分成4组。所有动物采用吊尾、头低位方式使后肢去负荷(hind-limb unloading,HU)方式模拟失重生理。第一、二组分别经HU处理1 d和4 d。第三、四组动物分别经过HU 1 d和4 d,并进行双轴旋转运动刺激2 h。然后,动物灌流固定、取脑、切片(厚度25μm),采用常规免疫组织化学染色技术卵白素-生物素复合物(ABC)法对ACC内神经元fos蛋白进行免疫反应,3,3′-二氨基联苯胺四盐酸盐水合物(DAB)为呈色剂。统计分析fos阳性神经元数量变化。结果:(1)1-d HU组、4-d HU和1-d HU-旋转组和4-d HU-旋转组动物ACC内fos阳性神经元数目分别是344.98±90.620、389.111±133.774、486.47±182.152和464.444±286.881。(2)HU处理1 d到4 d ACC神经激活数目有增加趋势,旋转刺激后ACC内神经元也有被激活趋势,但统计分析显示各组间无统计学差异。结论:HU处理使ACC内神经元有被激活趋势,但随HU处理时间的延长,ACC神经元活动对HU刺激产生适应。

关键词： fos 后肢去负荷扣带前回皮质免疫组织化学大鼠

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Effects of electrostimulation and administration of succinylcholine on the expression of fos protein in mesencephalic periaqueductal gray matter of rats after simulated weightlessness

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Neural Regeneration Research 2006年第1期1卷 22-25页

作者： Yongjin Zhu Sudi Wu Xiaoli Fan Xinai Song Linping Xu Department of Physiology Medical School Xi＇an Jiaotong University Xi＇an 710061 Shaanxi Province China Key Laboratory of Environment and Genes Related to Diseases Xi＇an Jiaotong University Min istry of Education Xi＇an 710061. Shaanxi Province China

BACKGROUND： Expression of fos in neurons of periaqueductal gray （PAG） is used to reflect the excitability. However, changes of expression of fos in neurons of PAG are caused by injured electrostimulation after simulated weightlessness, and the relationship between pretreatment and injection of succinylcholine has not been determined yet. OBJECTIVE ： To investigate the changes of expression of fos in PAG induced by injured electrostimulation pretreatment and injection of succinylcholine at 2 weeks after simulated weightlessness.DESIGN： Observational and controlled animal study.SETTING： Department of Physiology, Medical School, Xi＇an Jiaotong University; Key Laboratory of Environment and Genes Related to Diseases, Ministry of Education. MATERIALS： A total of 24 adult female SD rats, of clean grade and weighing 180-220 g, were selected in this study. METHODS： The experiment was completed in the Experimental Animal Center of Xi＇an Jiaotong University.① All rats were randomly divided into 2 groups according to body mass： simulated weightlessness group and control group with 12 in each group. And then, each group was also divided into 3 subgroups： electrostimulation group, succinylcholine-pretreatment group and succinylcholine-injection group with 4 in each subgroup. ②The model of weightlessness was simulated by tail-suspended female rats, which were described and modified by Cheng Jie. Rats in normal control group were given the same interventions as simulated weightlessness group except for tail-suspended. ③ Experimental method： The rats in electrostimulation group were given nociceptive stimulus by a pair of subcutaneous electrodes inserted into 1 and 5 claw of left hindlimb. The stimulus （current： 10 mA; duration： 1 ms; interval： 1 s） lasted for 30 minutes. The rats in succinylcholine-pretreatment group received stimulus after intravenous administration of succinylcholine, rats in succinylcholine-injection group were not given stimulus, just received succinylcholine. ④ All rats were perfused and fixed aft

关键词： fos Effects of electrostimulation and administration of succinylcholine on the expression of fos protein in mesencephalic periaqueductal gray matter of rats after simulated weightlessness

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RESEARCH ON DIVERSIFIED FINANCIAL DISPUTE RESOLUTION MECHANISMS IN CHINA

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Frontiers of Law in China-Selected Publications from Chinese Universities 2012年第4期7卷 681-701页

作者： Dong Yang Lei Liu Meihui Zhang at School of Law Renmin University of ChinaBeijingChina

在在 2008 的 US Lehman 微型契约危机以后，全球国家一直在探索金融消费者保护立法。这篇论文主要集中于瓷器当前的金融机制的现状和问题，以及怎么构造一个金融争论决定系统和金融搜集意见的人系统(fos ) ，怎么采用调停，仲裁和处理... 详细信息

在在 2008 的 US Lehman 微型契约危机以后，全球国家一直在探索金融消费者保护立法。这篇论文主要集中于瓷器当前的金融机制的现状和问题，以及怎么构造一个金融争论决定系统和金融搜集意见的人系统(fos ) ，怎么采用调停，仲裁和处理金融争论的另外的各种各样的争论决定机制。

关键词：争端解决机制金融中国多元化经济纠纷消费者保护分辨率 fos

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Effect of different therapies of Chinese medicine on the expressions of c-fos and c-Jun proteins in hippocampus of rats with post-stroke depression

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Neural Regeneration Research 2006年第3期1卷 234-238页

作者： Hongyan Wang Mei Chen Binhui Zhang Department of Traditional Chinese Medicine Taishan Medical College Taian 271000 Shandong Province China Department of Neurology Zhejiang Hospital of Traditional Chinese Medicine Hangzhou 310006 Zhejiang Province China

BACKGROUND ： c-fos and c-jun, the important immediate early genes （IEG）, are regarded as the markers for the location and function of neuronal activity, as well as the third signal messengers, they couple the stress stimulation and the gene expression in neuron, and hippocampus is involved in the process of signal transmission after stress stimulation induced depression. OBJECTIVE： To observe the therapeutic effects of Bushen Yiqi （tonifying kidney to benefit qi）, Huoxue Huayu （promoting blood circulation to dissipate blood stasis） and Ditan Kaiqiao （eliminating phlegm for resuscitation） on the expressions of c-fos and c-Jun proteins in hippocampus and spontaneous behaviors of rats with post-stroke depression （PSD）, and compare the results with those of fluoxetine, which is known to have definite effect on depression. DESIGN： A randomized controlled tna SETTING ： Zhejiang College of Traditional Chinese Medicine MATERIALS ： The trial was completed in Zhejiang College of Traditional Chinese Medicine from January to July in 2003. Fifty-six healthy adult Wistar male rats of clean grade, weighing （250±50） g, were randomly divided into 7 groups with 8 rats in each group： control group, model group, forced swimming group, Bushen Yiqi group; Huoxue Huayu, Ditan Kaiqiao group and fluoxetine group. The Bushen Yiqi Tang contained Renshen, Huangqi, Heshouwu, Gouqi, Shudi, etc., crude drugs 1 800 g/L. The Huoxue Huayu Tang contained Danshen, Chuanxiong, Chishao, Yujin, etc., crude drugs 3 600 g/L. The Ditan Kaiqiao Tang contained Banxia, Danxing, Changpu, Yuanzhi, etc., crude drug 1 000 g/b METHODS： ① Except the control group and forced swimming group, rats in the other groups were made into PSD models by deligating the bilateral common carotid artedes permanently. ② Rats in the control group, model group and forced swimming group were intragastncally perfused by saline （3 mL for each time）; those in the Bushen Yiqi group, Huoxue Huayu, Ditan Kaiqiao group and fluoxetine group were intragastncally perfused with Bushen Yiqi Ta

关键词： Jun fos Effect of different therapies of Chinese medicine on the expressions of c-fos and c-Jun proteins in hippocampus of rats with post-stroke depression

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miR-150-5p靶向fos调控EV-D68复制的研究

miR-150-5p靶向Fos调控EV-D68复制的研究

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作者：司俊卓重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:利用EV-D68感染宿主细胞（实验组）并设置相应对照组,对两组进行全转录组高通量测序,随后进行生物信息学相关预测,挖掘miRNA和fos的靶向关系;采用miRNA模拟体（mimic）与miRNA抑制体（inhibitor）转染宿主细胞验证miRNA对EV-D68是... 详细信息

目的:利用EV-D68感染宿主细胞（实验组）并设置相应对照组,对两组进行全转录组高通量测序,随后进行生物信息学相关预测,挖掘miRNA和fos的靶向关系;采用miRNA模拟体（mimic）与miRNA抑制体（inhibitor）转染宿主细胞验证miRNA对EV-D68是否具有调控作用,并与fos相结合探讨miR-150-5p/fos这一轴对EVD68调控作用的机制。方法:（1）EV-D68感染人横纹肌瘤（Rhabdomyosarcoma,RD）细胞（实验组）并设置相应对照组,分别收集两组细胞,提取总RNA。随后对两组进行全转录组高通量测序分析,得到所对应的全转录组差异表达谱。筛选出差异表达基因,利用RT-q PCR技术验证测序结果。通过构建蛋白互作网络（protein-protein interaction,PPI）筛选关键m RNA（Hub m RNA）分子。通过在线靶基因数据库得到3种非编码RNA（miRNA、lnc RNA和circ RNA）与m RNA之间的相互靶向关系,构建出一个miRNA居于中心位置,其余非编码RNA以及m RNA处于周边的竞争性内源RNA（ce RNA）调控网络。并通过对此网络进一步的分析,挖掘出了与fos相互靶向的miRNA。利用RT-q PCR验证此miRNA在EV-D68感染后其表达水平的变化。（2）通过miR-150-5p mimic（inhibitor）转染RD细胞,改变miRNA表达水平,RT-q PCR技术观察fos表达水平是否出现相应变化,随后利用病毒滴度TCID50测定,RT-q PCR、Western blot等技术,观察EV-D68复制水平的变化。利用双荧光素酶报告实验确定miR-150-5p与fos之间的靶向关系。用miR-150-5p mimic（inhibitor）与CD513B-fos（si-fos）共转染细胞,RT-q PCR和Western blot技术检测EV-D68 VP1 RNA和蛋白表达水平,进一步确定miR-150-5p表达变化对fos调控EV-D68复制的影响。结果:（1）EV-D68感染RD细胞经全转录组高通量测序分析得到239个差异表达m RNA（DEm RNAs）,96个差异表达miRNA（DEmiRNAs）,375个差异表达lnc RNA（DElnc RNAs）以及33个差异表达circ RNA（DEcirc RNAs）,并通过RT-q PCR验证了4个DEm RNAs以及6个DEmiRNAs,其表达趋势与测序结果基本一致。利用GO与KEGG富集分析发现:GO富集分析结果主要涉及RNA聚合酶II转录调控、蛋白质信号转导以及DNA结合转录因子活性等功能。KEGG信号通路富集分析主要富集在MAPK、Hippo、AGERAGE以及Apoptosis信号通路上。通过构建PPI互作网络筛选出以EGR1、fos以及Jun为主的Hub m RNA分子。通过靶向关系的预测,构建出以miRNA为核心的ce RNA调控网络,并从中筛选出了与fos靶向的miRNA分子即miR-150-5p。RT-q PCR结果显示EV-D68感染RD细胞后其表达水平下调,且与病毒感染时间及感染复数呈正相关。（2）利用miR-150-5p mimic（inhibitor）分别转染RD细胞后,miR-150-5p表达水平显著上升（下降）,与其相对应fos的表达水平显著下降（上升）,与此同时,EV-D68在RD细胞中的复制明显得到促进（抑制）。通过双荧光素酶报告实验,成功的验证了miR-150-5p靶向fos这一关系的存在。通过共转染miR-150-5p mimic（inhibitor）与CD513B-fos（si-fos）至RD细胞内,发现miR-150-5p能够通过表达量的改变影响fos的表达水平从而间接调控EV-D68的复制。结论:本研究通过高通量测序分析结果构建了ce RNA调控网络,并挖掘出miR-150-5p与fos之间靶向关系的存在。研究结果表明,miR-150-5p通过靶向fos表达,调控EV-D68在宿主细胞的复制。

关键词：肠道病毒D68型全转录组测序 miR-150-5p fos 病毒复制

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fos EXPRESSION IN LUMBARSACRAL SPINAL CORD AND MEDULLA OBLONGATA INDUCED BY CHRONIC COLONIC INFLAMMATION IN RATS

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Journal of Pharmaceutical Analysis 2005年第2期17卷 83-86,90页

作者：孙怡宁罗金燕饶志仁 Department of Gastroenterology Second Hospital of Xi'an Jiaotong University Xi'an 710004 China

Objective To investigate fos expression in rat lumbarsacral spinal cord and medulla oblongata induced by chronic colonic inflammation. Methods Thirty-three male Sprague-Dawley rats were randomly divided into two groups: experimental group: colonic inflammation was induced in seventeen rats by intraluminal administration of trinitrobenzenesulfonic acid (TNBS); control group: saline was administered intraluminally in sixteen rats; After 3, 7, 14 and 28 days of administration, lumbarsacral spinal cord and medulla oblongata were removed and processed for fos immunohistochemistry. Results fos-immunoreactive (fos-IR) neurons induced by TNBS administration were primarily distributed in deep laminae (laminae Ⅲ-Ⅳ,Ⅴ-Ⅵ) in the spinal dorsal horn and in medullary visceral zone (MVZ) in the medulla oblongata. The number of fos-IR cells in the spinal cord and MVZ in rats after 7 and 14 days of TNBS administration were significantly higher than that in the control rats (Pfos-IR neurons in MVZ decreased and became comparable to the control group. However, the number of fos cells in the spinal cord in some rats were still significantly increased compared with the control rats (Pfos-IR neurons after colonic inflammation recovery may play an important role in the development of visceral hypersensitivity. Medulla oblongata was a less important structure than the spinal cord in inducing visceral hypersensitivity after chronic colonic inflammation.

关键词： fos visceral hypersensitivity spinal cord medullary Visceral Zone

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骨母细胞瘤临床病理分析以及fos基因融合在肿瘤中的作用机制研究

骨母细胞瘤临床病理分析以及FOS基因融合在肿瘤中的作用机制研究

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作者：耿亚飞中国人民解放军海军军医大学

学位级别：硕士

研究背景骨母细胞瘤(Osteoblastoma)是一种交界性成骨细胞肿瘤,多见于10-25岁人群。脊柱背侧附件是骨母细胞瘤的好发部位,占所有病例的32%到45%。骨母细胞瘤具有局部侵袭性生长方式以及潜在骨质破坏作用,必须要行外科手术切除。该病具... 详细信息

研究背景骨母细胞瘤(Osteoblastoma)是一种交界性成骨细胞肿瘤,多见于10-25岁人群。脊柱背侧附件是骨母细胞瘤的好发部位,占所有病例的32%到45%。骨母细胞瘤具有局部侵袭性生长方式以及潜在骨质破坏作用,必须要行外科手术切除。该病具有一定的复发倾向,复发率为24%。个别病例在复发时可恶性进展为骨肉瘤,预后很差。近年来多项研究证实fos基因融合突变在骨母细胞瘤中广泛存在,但fos融合基因与该病的发生、进展和复发的关系以及作用机制尚不明确。第一部分:骨母细胞瘤临床与病理学资料分析研究方法收集分析临床2012—2020年骨母细胞瘤患者病历,影像学资料、实验室检验结果;HE及IHC染色明确诊断;并对患者进行随访,Kaplan-Meier法、COX风险回归模型评估影响患者预后PFS的因素。研究结果1.骨母细胞瘤好发于11-30岁(60.7%),发病平均年龄为26.1岁;男女比例为1.2:1;颈椎占所有病例的36%,胸椎占35%,腰骶椎占21%,脊柱外病例仅占8%;肿瘤平均大小为3.47cm(0.7cm到9.5cm);2.上皮样骨母细胞瘤的肿瘤体积更大(P=0.001),继发ABC改变更常见(P=0.019);发病年龄>30岁组的复发率显著高于11-30岁组(P=0.014);Curettage手术组患者的复发率显著高于En-bloc手术组(P=0.035);3.上皮样骨母细胞瘤分型(P=0.015,HR=4.298,95%CI:1.326-13.933)、发病年龄大于30岁(P=0.017,HR=4.346,95%CI:1.305-14.470)是患者PFS的独立危险因素;手术方式不是预后的独立影响因素(P=0.065)。结论骨母细胞瘤患者的发病年龄≤30岁、En-bloc手术组的复发率显著降低;发病年龄大于30岁、上皮样骨母细胞瘤的病理分型是骨母细胞瘤术后无进展生存期的独立危险因素。第二部分:骨母细胞瘤样本的RNA测序与验证研究方法收集20例骨母细胞瘤患者的石蜡包埋肿瘤样本,经病理学鉴定后提取总核酸进行RNAseq;以GRCh38为对照基因组,筛选可能的样本融合基因;在未脱钙石蜡组织切片上行免疫组化fos蛋白染色、FISH对fos基因融合的情况进行验证;并对样本JDP2蛋白表达情况行IHC检测。研究结果1.在20例样本中,共5例样本提示基因融合,融合发生率为25%;fos-JDP2是最常见的基因融合形式;上皮样骨母细胞瘤和经典型骨母细胞瘤中的fos基因融合不存在显著差异(P=0.175);在肿瘤≥4cm和fos-JDP2基因融合突变的肿瘤组织中JDP2的蛋白表达显著下降(Pfos蛋白核表达增强;无论是否存在基因融合FISH检测结果均呈阴性。结论1.fos-JDP2基因融合发生率为25%,与患者的病理分型、肿瘤大小无关;2.fos-JDP2融合突变的样本中JDP2的蛋白表达水平显著降低,fos蛋白表达显著升高;FISH对fos-JDP2基因融合与否无提示性。第三部分:细胞实验与蛋白质组学验证fos-JDP2融合基因的作用研究方法在小鼠MC3T3-E1 Subclone 14细胞慢病毒转染fos-JDP2融合序列构建稳定表达细胞株;对细胞的增殖曲线、细胞周期,对fos基因的m RNA和蛋白表达水平进行测定;蛋白质组学测定组间差异表达蛋白,并对差异蛋白进行GO富集、KEGG富集、PPI和转录因子家族等分析;WB法对预测的目标蛋白进行验证。研究结果1.在MC3T3-E1 Subclone 14细胞中转染fos-JDP2融合基因可以使细胞增殖加快,细胞周期S期的细胞比例增多,fos基因的m RNA和蛋白的表达水平显著升高;野生型fos基因可以和融合突变fos基因可以产生相似的效应,但fos蛋白水平变化没有突变组显著;2.HMGA2蛋白在fos-JDP2融合突变细胞与fos过表达细胞中表达均显著升高(Pfos-JDP2融合突变可以促进成骨细胞的增殖、细胞周期进入;促进fos基因的转录和翻译水平;2.HMGA2可能是fos-JDP2融合基因影响的下游关键蛋白。

关键词：骨母细胞瘤 fos 基因融合 JDP2 HMGA2

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创伤后应激障碍小鼠海马恐惧记忆消退相关神经元的异常激活

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神经解剖学杂志 2023年第6期39卷 617-623页

作者：刘珺琛解进祎刘明月肖昊翔郭保霖武胜昔陕西中医药大学基础医学院咸阳712000 空军军医大学基础医学院神经生物学教研室西安710032 延安大学医学院生理学教研室延安716099

目的:分析创伤后应激障碍(PTSD)小鼠恐惧记忆消退过程中海马各亚区神经元的激活及差异。方法:使用两种即刻早期基因蛋白标记策略,对PTSD小鼠条件性恐惧记忆消退相关神经元进行标记。第一组利用免疫荧光染色技术,使用野生型小鼠对海马区... 详细信息

目的:分析创伤后应激障碍(PTSD)小鼠恐惧记忆消退过程中海马各亚区神经元的激活及差异。方法:使用两种即刻早期基因蛋白标记策略,对PTSD小鼠条件性恐惧记忆消退相关神经元进行标记。第一组利用免疫荧光染色技术,使用野生型小鼠对海马区域神经元Arc蛋白进行标记并观察;第二组使用fos-CreER~(T2);Ai9转基因小鼠,在恐惧记忆消退前23 h注射他莫昔芬诱导荧光蛋白表达,标记相关神经元并观察。通过对标记的海马神经元数量及树突分支结构进行分析,对比海马神经元激活水平和神经元树突的可塑性变化。结果:两组实验观察发现Arc和fos阳性神经元主要分布在背侧海马,其中Arc蛋白显色在CA3和DG亚区呈富集分布,CA1、CA2亚区的分布则较为散在,而fos阳性神经元在海马DG亚区表达富集,散在分布于CA1、CA2和CA3亚区。与对照组对比,PTSD组海马各亚区表达Arc蛋白神经元数目没有明显差异;而PTSD组海马中CA1、CA3、DG亚区的fos阳性神经元数量显著增加(Pfos-CreER~(T2);Ai9小鼠对两组小鼠海马区域神经元树突分支进行观察分析,未发现明显变化。结论:PTSD小鼠恐惧记忆消退过程中海马不同亚区神经元存在异常激活,但激活的神经元树突分支无明显可塑性改变。

关键词：恐惧记忆消退创伤后应激障碍海马 fos 小鼠

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根皮素对阿霉素心脏毒性的保护作用及机制研究

根皮素对阿霉素心脏毒性的保护作用及机制研究

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作者：李湘云中南大学

学位级别：硕士

背景:阿霉素是一种从链霉菌中提取的蒽环类抗生素,具有强效的抗肿瘤作用,但是它会引起严重的心脏毒性,降低了阿霉素治疗期间或之后患者的生活质量,极大地阻碍了它的临床应用。因此,亟需阐明阿霉素诱导心脏毒性的机制并积极寻求防治手段... 详细信息

背景:阿霉素是一种从链霉菌中提取的蒽环类抗生素,具有强效的抗肿瘤作用,但是它会引起严重的心脏毒性,降低了阿霉素治疗期间或之后患者的生活质量,极大地阻碍了它的临床应用。因此,亟需阐明阿霉素诱导心脏毒性的机制并积极寻求防治手段。源自苹果及其它植物的根皮素,已被证明具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤以及心血管保护等药理作用,但是其在阿霉素所致心脏毒性中的作用仍有待研究。目的:探究根皮素对阿霉素所致心脏毒性中的作用,揭示根皮素缓解阿霉素心脏毒性的分子机制及作用靶点,为防治阿霉素所致心脏毒性提供新的理论依据和防治措施。方法:使用C57BL/6小鼠和H9c2细胞构建了阿霉素诱导心脏毒性体内和体外模型。通过系统的网络药理学、分子对接、转录组测序技术、转录因子预测和分子生物学实验,全面考察了根皮素对阿霉素诱导心脏毒性的保护作用和分子机制。结果:1)通过CCK8、流式细胞术以及Western blot实验从细胞水平证实了根皮素能够减少阿霉素对H9c2细胞的损伤以及减轻阿霉素诱导的细胞凋亡。2)超声心动图、血生化检测、H&E染色、TUNEL染色以及Western blot实验从动物水平进一步证实了根皮素能够缓解阿霉素诱导的心肌纤维排列紊乱、心功能障碍以及细胞凋亡。3)通过网络药理学从蛋白水平探讨根皮素缓解阿霉素诱导心脏毒性的分子机制。结果显示根皮素和阿霉素具有554个共同靶基因。GO和KEGG富集分析结果显示PI3K-Akt信号通路、细胞凋亡、IL-17信号通路等为关键通路。蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析确定了24个核心共同靶基因。4)通过转录组学分析从转录水平探讨根皮素缓解阿霉素诱导心脏毒性的分子机制。对筛选得到的前20个差异表达基因(DEGs),使用JASPAR和PROMO数据库进行预测,共得到202个转录因子,其中fos、Jun和Hif1a也是Phl-DIC的核心共同靶基因,进一步的分子对接结果显示fos、Jun和Hif1a与Phl结合良好并且fos和Phl的对接具有最低的结合能。5)Western blot和RT-q PCR实验证实了根皮素能够抑制阿霉素诱导的Hif3a和fos表达水平的升高。细胞热迁移实验结果表明根皮素与fos蛋白结合良好。双荧光素酶报告基因实验进一步证实了fos蛋白能够与Hif3a启动子区域结合,促进Hif3a转录。结论:根皮素通过作用于c-fos/Hif3a轴,即下调fos蛋白的表达,抑制fos和Hif3a启动子区域结合,降低Hif3a表达,减少阿霉素诱导的心肌细胞凋亡,从而缓解阿霉素诱导的心脏毒性。图13幅,表7个,参考文献72篇

关键词：阿霉素心脏毒性根皮素 fos Hif3a 转录组测序

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