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再生障碍性贫血患儿CD_4^+ CD_(25)^+T细胞及TGF-β1 flt-3L水平变化的意义

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中国实用儿科杂志 2007年第2期22卷 130-133页

作者：黄永兰黄绍良梁蔚文魏菁中山大学第二附属医院儿科广东广州510180

目的评价免疫调节T细胞和细胞因子在再生障碍性贫血(再障)细胞免疫功能紊乱中的作用。方法2004-02—2005-06中山大学第二附属医院采用流式细胞术检测27例特发性再障患儿骨髓及外周血淋巴细胞亚群和CD+4CD2+5T细胞水平,ELISA检测骨髓转... 详细信息

目的评价免疫调节T细胞和细胞因子在再生障碍性贫血(再障)细胞免疫功能紊乱中的作用。方法2004-02—2005-06中山大学第二附属医院采用流式细胞术检测27例特发性再障患儿骨髓及外周血淋巴细胞亚群和CD+4CD2+5T细胞水平,ELISA检测骨髓转化生长因子(TGFβ-1)和F lt-3L水平,并与正常儿童对照。结果与对照组比较,初诊再障患儿外周血和骨髓CD+8T细胞均显著增高(P3-CD+56NK细胞及骨髓B细胞显著下降(P3.4)%]显著高于对照组[(4.3±0.9)%,P3L水平分别为(1031.1±321.8)ng/L和(694.7±424.7)ng/L,均较对照组[(63.0±37.5)ng/L]显著增高(P均3CD+4T细胞呈显著正相关(r分别为0.495、0.540,P3L与骨髓CD+3、CD+4、CD+8T细胞及CD+4CD+25T细胞均呈显著正相关(r分别为0.732、0.542、0.688、0.405,P分别3L水平呈显著负相关(r分别为-0.431、-0.482,P分别3L水平显著增高可能在再障儿童T淋巴细胞数量增多和功能紊乱中起重要作用。

关键词：再生障碍性贫血调节T细胞转化生长因子-β1 flt-3配体儿童

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小鼠NK细胞体内扩增、分离纯化的方法研究

军事医学 2017年第10期41卷 850-855页

作者：安洁王蕾吴涛张玉龙周欠欠付秋霞詹林盛广西医科大学南宁530000 军事科学院军事医学研究院北京100850

目的为获得一定数量高纯度的自然杀伤细胞(natural killer cells,NK),拟采用水动力高压转染技术实现flt-3配体(flt-3 ligand,FL)基因在小鼠肝的高效表达,以刺激脾NK细胞体内扩增,随后通过优化免疫微磁珠分选(MACS)技术获取大量、高纯度N... 详细信息

目的为获得一定数量高纯度的自然杀伤细胞(natural killer cells,NK),拟采用水动力高压转染技术实现flt-3配体(flt-3 ligand,FL)基因在小鼠肝的高效表达,以刺激脾NK细胞体内扩增,随后通过优化免疫微磁珠分选(MACS)技术获取大量、高纯度NK细胞,为细胞治疗提供支撑。方法 C57BL/6小鼠经多次水动力高压转染FL表达质粒后,流式细胞术检测脾NK细胞的扩增程度及表型变化,并通过MACS技术分离纯化NK细胞。结果与一次水动力高压转染FL目的质粒的结果相比,两次水动力转染后小鼠脾明显增大,淋巴细胞绝对数量增加(6.02±1.15)倍,NK细胞亚群比例增加(2.07±0.39)倍,NK细胞亚群绝对数量增加(12.49±2.39)倍。同时,FL刺激对NK细胞活性及表型无明显影响。最后,经偶联CD5(Ly-1)磁珠阳选和去除T、B等多种杂细胞磁珠阴选相结合的双重分选方法,可获得纯度为(83.81±0.92)%的NK细胞,较单独阴选纯度提高(1.60±0.02)倍。结论经两次FL表达质粒水动力高压转染,可在不影响NK细胞活性及表型的前提下,实现其在小鼠脾的大量扩增。阳选和阴选相结合的双重MACS分选技术能有效去除T、B等杂细胞影响,获取高纯度NK细胞,为肿瘤细胞免疫治疗奠定基础。

关键词：杀伤细胞天然水动力高压转染 flt-3配体细胞治疗

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FL在体内外造血调控中的作用

国外医学（输血及血液学分册） 1998年第6期21卷 329-333页

作者：张孝兵华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

flt-3配体(FL)是一种作用于早期造血细胞的细胞因子,它是酪氨酸激酶flt-3/flk-2受体的配体。本文综述了FL在外周血干细胞动员、体内外树突状细胞扩增、癌症免疫治疗以及造血细胞体外培养中应用的最新进展。

关键词： flt-3配体干细胞动员造血细胞调控

脐带血中长期培养启动细胞在转染FL和/或TPO基因骨髓基质细胞层上的生长

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中国实验血液学杂志 2001年第2期9卷 97-100页

作者：张毅毛宁李秀森金滢张双喜吴英唐佩弦军事医学科学院基础医学研究所北京100850

检测长期培养启动细胞 (LTC IC)含量可反映造血干细胞的存在和变化。用正常人骨髓基质细胞、人骨髓基质细胞系和转基因骨髓基质细胞系做培养底层 ,接种CD34+ 细胞 ,进行连续 8周的长期体外培养。研究结果表明 ,在共转染FL和TPO基因的基... 详细信息

检测长期培养启动细胞 (LTC IC)含量可反映造血干细胞的存在和变化。用正常人骨髓基质细胞、人骨髓基质细胞系和转基因骨髓基质细胞系做培养底层 ,接种CD34+ 细胞 ,进行连续 8周的长期体外培养。研究结果表明 ,在共转染FL和TPO基因的基质细胞系HFT为培养底层所产生的LTC IC为 3.6 5± 0 .5 8 10 0 0CD34+ 细胞 ,在原代骨髓基质细胞层上所产生的LTC IC为2 .6 5± 0 .76 10 0 0CD34+ 细胞 ,二者在统计学上无显著性意义。结论 :转染FL TPO基因的HFT细胞系可作为LTC

关键词：脐带血长期培养启动细胞骨髓基质细胞 flt-3配体血小板生成素基因转染