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In cell measurement of fluorescence lifetime imaging microscopy revealed C-terminal conformation changes of Ferroportin upon addition of Mn^2＋

引用

Chinese Chemical Letters 2018年第10期29卷 1509-1512页

作者： Mengge Zhang Ming Wen Ying Xiong Longhua Zhang Changlin Tian National Laboratory of Physical Sciences at Microscale and School of Life Sciences University of Science and Technology of China Hefei 230027 China High Magnetic Field Laboratory Chinese Academy of Sciences Hefei 230031 China

Fluorescence microscopy, as a sensitive method to detect microenvironment of molecules, is widely used in protein conformation and dynamic studies in live cells. Fluorescence lifetime imaging microscopy（FLIM）, which is independent of fluorophore concentrations, scattering and bleaching, is a suitable tool to analyze membrane proteins in a single cell. Ferroportin（FPN）, a multi-ion exporter in vertebrates, was modulated by metal ions with unknown mechanism. Herein, we fused green fluorescence protein on Cterminal of FPN（FPN-eGFP） and applied fluorescence lifetime to monitor conformation changes of FPN in a live cell. The fluorescence lifetime distribution showed a shift to shorter lifetime upon Mn^（2＋） treatment,suggesting a preference conformation of FPN in Mn^（2＋） exposure. It is also observed that the lifetime（rather than intensity） measurement was not strongly influenced by laser power. The observed fluorescence lifetime changes of FPN-eGFP upon Mn^（2＋） treatments indicated that extracellular metal ions can modulate FPN through conformation exchanges between several different states.

关键词： Fluorescence lifetime imaging microscopy In cell analysis of conformation change ferroprotin

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