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特应性皮炎患者外周血中嗜碱性粒细胞CD63、CD203c和fcεri的表达

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中国皮肤性病学杂志 2023年第2期37卷 155-161页

作者：李璟依张慧云何韶衡孙健锦州医科大学附属第一医院变态反应科辽宁锦州121001 锦州医科大学附属第一医院变态反应与临床免疫研究中心辽宁锦州121001

目的探讨特应性皮炎(AD)患者外周血中嗜碱性粒细胞CD63、CD203c和fcεri的表达及其临床意义。方法收集36例AD患者(内源性AD组、外源性AD组各18例)和20例健康人(HC)的外周血,流式细胞仪检测并比较AD患者(tAD组)、内源性AD患者(iAD组)和... 详细信息

目的探讨特应性皮炎(AD)患者外周血中嗜碱性粒细胞CD63、CD203c和fcεri的表达及其临床意义。方法收集36例AD患者(内源性AD组、外源性AD组各18例)和20例健康人(HC)的外周血,流式细胞仪检测并比较AD患者(tAD组)、内源性AD患者(iAD组)和外源性AD患者(eAD组)嗜碱性粒细胞富集群中CD63、CD203c和fcεri的表达情况。结果相比于健康对照组,AD患者粒细胞群中嗜碱性粒细胞平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)显著增加(Pfcεri^(+)嗜碱性粒细胞比例显著升高(Pfcεri的表达上差异均无统计学意义(P>0.05)。结论AD患者嗜碱性粒细胞表达CD63、CD203c和fcεri增强,检测嗜碱性粒细胞及其相关分子对诊断AD具有意义。

关键词：特应性皮炎嗜碱性粒细胞 CD63 CD203c fcεri

探讨嗜碱性粒细胞CD63、CD203c、fcεri在哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠的表达

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重庆医科大学学报 2022年第9期47卷 1012-1017页

作者：张玉娇何韶衡张慧云吴久纯刘敬禹锦州医科大学附属第三医院呼吸科锦州121002 锦州医科大学附属第一医院变态反应与临床免疫研究中心锦州121004

目的:通过对哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠(asthma-chronic obstructive pulmonary disease overlap,ACO)患者急性期与缓解期嗜碱性粒细胞表面分子表达水平的测量比较,探讨其与病情的关系。方法:招募健康人32例,收集锦州医科大学附属第三... 详细信息

目的:通过对哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠(asthma-chronic obstructive pulmonary disease overlap,ACO)患者急性期与缓解期嗜碱性粒细胞表面分子表达水平的测量比较,探讨其与病情的关系。方法:招募健康人32例,收集锦州医科大学附属第三医院治疗的ACO患者急性期及缓解期各14例,采集肘部静脉血,使用流式细胞术应用3种设门策略获得嗜碱性粒细胞,比较不同时期患者嗜碱性粒细胞表面分子(CD63、CD203c、fcεri)表达水平与健康组的差异,并对结果和疾病状态进行回顾性研究。结果:急性期嗜碱性粒细胞CD63平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)较健康组有统计学差异(Pfcεri MFI较健康组无统计学差异;缓解期CD63、fcεri MFI较健康组有统计学差异(P0.05),急性期与缓解期比较,嗜碱性粒细胞CD63、CD203c、fcεri MFI没有统计学差异。急性期、缓解期CCR3^(+)、CCR3^(+)/CD123^(+)HLA-DR~-、CD123^(+)HLA-DR~-MFI较健康组有统计学差异(Pfcεri表达增强,表明嗜碱性粒细胞参与了ACO发病,检测其表面分子表达量对ACO病情的判断有提示意义。

关键词：哮喘慢性阻塞性肺疾病嗜碱性粒细胞 CD63 CD203c fcεri

Chemical composition-based characterization of the anti-allergic effect of Guominkang Formula on IgE-mediated mast cells activation and passive cutaneous anaphylaxis

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Chinese Journal of Natural Medicines 2022年第12期20卷 925-936页

作者： TANG Ding WANG Chen GAN Qianying WANG Zhixin JIANG Renwang Guangdong Province Key Laboratory of Pharmacodynamic Constituents of TCM and New Drugs Research and International Cooperative Laboratory of Traditional Chinese Medicine Modernization and Innovative Drug Development of Chinese Ministry of Education College of PharmacyJinan UniversityGuangzhou 510000China

Guominkang(GMK),a Chinese medicine formula,has been used to treat allergic diseases in clinical settings for many years.To evaluate the antiallergic effect and molecular mechanism of action of GMK extract,RBL-2H3 cell models and passive cutaneous anaphylaxis(PCA)mouse models were established.High performance liquid chromatography(HPLC)and ultra-high performance liquid chromatography-mass spectrometry(UHPLC-MS)analyses were performed to characterize the chemical composition of GMK.A total of 94 compounds were identified or tentatively identified from GMK.Three of them,emodin,ursolic acid,and hamaudol,were identified for the first time as potential active compounds in GMK,since they inhibited the degranulation of mast cells.The anti-allergic effect of hamaudol was the first to be discovered.GMK could markedly mitigate the shade of Evans Blue extravasation and ear incrassation in PCA mouse models.Additionally,GMK significantly inhibited the degranulation of mast cells,suppressed mast cell degranulation by reducing Ca2+influx and the levels of TNF-α,IL-4,and histamine,and markedly inhibited the phosphorylation of Lyn,Syk,PLCγ1,IκBα,and NF-κB p65.Molecular docking results indicated that hamaudol and emodin had strong interaction with fcεri and NF-κB related proteins,while ursolic acid only interacted with NF-κB associated proteins.These results suggest GMK suppresses the activation of MCs both in vivo and in vitro.The underlying mechanism of its anti-allergic activity is associated with the inhibition of fcεri and NF-κB activation.

关键词： Guominkang(GMK) Allergic diseases Mast cells fcεri NF-κB

肥大细胞fcεri-α受体特异性噬菌体多肽的筛选及其抑制过敏反应的研究

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肥大细胞FcεRI-α受体特异性噬菌体多肽的筛选及其抑制过敏反应...

作者：郑文雅南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景变应性疾病主要是以IgE介导的机体对某些外界物质过度敏感的一大类疾病,现已成为世界范围内影响人群最多、最常见的一种慢性疾病,严重影响人们的生活质量,给全世界造成了巨大的社会和经济负担,成为亟待解决的健康难题。肥大细... 详细信息

研究背景变应性疾病主要是以IgE介导的机体对某些外界物质过度敏感的一大类疾病,现已成为世界范围内影响人群最多、最常见的一种慢性疾病,严重影响人们的生活质量,给全世界造成了巨大的社会和经济负担,成为亟待解决的健康难题。肥大细胞表面fcεri受体与特异性IgE-变应原复合体结合是变应性疾病急性及慢性炎症中的关键事件,因此fcεri受体被认为是变应性疾病治疗的潜在靶点。噬菌体展示多肽技术被广泛应用于靶向药物开发研究,通过噬菌体筛选获取的特异性多肽具备分子量较小、副作用小、结构稳定、生物利用度高、生产成本低等优势,可以用于获取fcεri受体的特异性多肽,靶向治疗变应性疾病。研究目的本研究拟通过噬菌体展示技术构建随机环八肽噬菌体文库,经生物淘选后获得肥大细胞膜表面与IgE结合的fcεri受体特异性的高亲和力噬菌体多肽,验证其生物学功能,为进一步研发治疗变应性疾病的新型生物靶向药物奠定基础,提供治疗此类疾病的有效治疗手段。研究方法(1)构建及鉴定随机环八肽噬菌体文库,检测其多样性及容量,为后续生物筛选特异性噬菌体多肽提供文库基础。(2)应用噬菌体展示肽技术进行靶向fcεri-α蛋白的三轮亲和力筛选,获得fcεri-α蛋白特异性噬菌体多肽,验证其与靶蛋白的亲和力,并进行基因序列检测。(3)基于DNA测序结果,采用计算机模拟分子对接方法,从构象层面预测多肽与fcεri-α受体之间的结合能力和亲和性。(4)用fcεri-α蛋白特异性多肽对小鼠特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)进行防治,检测其对肥大细胞介导的Ⅰ型变态反应的生物学作用。研究结果(1)构建的噬菌体展示非天然随机环八肽文库库容量高达7.4×109,克隆效率高于90%,足够覆盖样本的多样性。(2)生物淘选后获得6组不同序列的fcεri-α蛋白的高亲和力多肽。(3)基于计算机模拟的分子对接构象模型显示筛选后的多肽与fcεri-α蛋白具有良好的亲和性,其中多肽A、B结合力最强。(4)体内动物实验证明,多肽A、B、D、F能一定程度上减轻并改善AD小鼠的皮肤炎症程度和症状,其中多肽A、B效果更显著。结论本研究构建的噬菌体展示非天然随机环八肽文库具有良好的库容量和多样性,可基于此文库进行生物淘选。筛选获得的多肽与肥大细胞fcεri的α位点具有良好的亲和性,能有效减轻Ⅰ型变态反应炎症,为变应性疾病的生物小分子药物的研发提供了新的思路。

关键词： fcεri 抑制作用变应性疾病噬菌体展示技术多肽分子对接

以IgE/fcεri信号通路为靶标治疗变态反应性疾病研究进展

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药学学报 2011年第10期46卷 1161-1166页

作者：刘中成时海浪张艳芬赵丽君河北省药物质量分析控制重点实验室河北大学实验室管理办公室河北保定071002

变态反应性疾病已成为全球性的社会卫生问题,IgE与靶细胞表面高亲和力受体fcεri结合是I型变态反应的关键步骤。针对IgE/fcεri信号通路重要靶点进行药物设计是当前治疗变态反应性疾病药物研究的热点,主要集中在以IgE、IgE高亲和力受体F... 详细信息

变态反应性疾病已成为全球性的社会卫生问题,IgE与靶细胞表面高亲和力受体fcεri结合是I型变态反应的关键步骤。针对IgE/fcεri信号通路重要靶点进行药物设计是当前治疗变态反应性疾病药物研究的热点,主要集中在以IgE、IgE高亲和力受体fcεri以及信号通路关键信号分子为靶点的抗体、多肽、疫苗、融合蛋白及小分子化合物等相关药物研究。本文综述了近年来以IgE/fcεri信号通路为靶点的代表性药物在变态反应性疾病中的作用及其机制。

关键词： IgE fcεri 信号通路变态反应性疾病

过敏性鼻炎患者血液嗜酸性粒细胞fcεri和CD63表达研究

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重庆医科大学学报 2018年第6期43卷 851-855页

作者：汪曌陈冬臧艳艳何韶衡张慧云锦州医科大学附属第一医院变态反应与临床免疫研究中心锦州121001

目的:检测过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者外周血嗜酸性粒细胞fcεri和CD63的表达。方法:收集AR患者和健康人(healthy controls,HCs)的外周血,用蒿草花粉和尘螨过敏原粗提液刺激,流式细胞仪检测嗜酸性粒细胞富集群中fcεri和CD63... 详细信息

目的:检测过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者外周血嗜酸性粒细胞fcεri和CD63的表达。方法:收集AR患者和健康人(healthy controls,HCs)的外周血,用蒿草花粉和尘螨过敏原粗提液刺激,流式细胞仪检测嗜酸性粒细胞富集群中fcεri和CD63的表达情况。结果:静息状态下,AR患者[0.92%(0.70%~1.64%)]相比于HCs[0.71%(0.43%~0.97%)]嗜酸性粒细胞比例上调(Z=-2.050,P=0.041);AR患者[6.19%(3.05%,8.19%);1 462(1 164,1 720)]fcεri+嗜酸性粒细胞的比例和平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)比HCs[3.16%(1.55%,4.53%);808(524,1308)]增加(Z=-2.102,P=0.036);AR患者[2 031(1 725,3 338)]CD63+嗜酸性粒细胞的MFI比HCs[1 491(1 297,1 613)]升高36%(Z=-3.192,P=0.002)。0.1μg/m L蒿草过敏原粗提液[2 618(2 131,3 315)]和1.0μg/m L蒿草过敏原粗提液[3 108(2 317,3 792)]能诱导AR患者CD63+嗜酸性粒细胞的MFI上调(Z=-2.667,P=0.008;Z=-2.845,P=0.004)。结论:嗜酸性粒细胞表达的fcεri和CD63参与AR发病。过敏原特异性嗜酸性粒细胞激发试验检测CD63的表达,可能成为AR诊断的补充实验。

关键词：过敏性鼻炎嗜酸性粒细胞 fcεri CD63

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IgE高亲和力受体——fcεri

中国免疫学杂志 2002年第10期18卷 733-736页

作者：杨丹榕修清玉韩焕兴第二军医大学附属长征医院呼吸科上海200003 第二军医大学附属长征医院实验诊断科全军临床免疫中心上海20003

fc受体发现至今已有三十多年，它作为免疫球蛋白fc段的受体而得名。第一类免疫球蛋白都具有相应的fc受体，分别为IgG(fcγR)、IgE(fcεR)、IgA(fcαR)、IgM(fcμR)、IgD(fcδR)，他们广泛分布于多种细胞的表面，在免疫功能和免疫调节中... 详细信息

fc受体发现至今已有三十多年，它作为免疫球蛋白fc段的受体而得名。第一类免疫球蛋白都具有相应的fc受体，分别为IgG(fcγR)、IgE(fcεR)、IgA(fcαR)、IgM(fcμR)、IgD(fcδR)，他们广泛分布于多种细胞的表面，在免疫功能和免疫调节中发挥重要作用。本文着重于IgE的高亲和力受体fcεri对其结构功能信号转导及应用作简单阐述。

关键词： IgE 高亲和力受体 fcεri 细胞内信号传导生物学

The Cbl family of ubiquitin ligases regulates fcεri expression and mast cell activation

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Advances in Bioscience and Biotechnology 2013年第12期4卷 1063-1072页

作者： Rosa Molfetta Francesca Gasparrini Angela Santoni Rossella Paolini Department of Molecular Medicine “Sapienza” University of Rome Rome Italy Department of Molecular Medicine “Sapienza” University of Rome Rome Italy Institute Pasteur-Fondazione Cenci Bolognetti “Sapienza” University of Rome Rome Italy Lymphocyte Interaction Laboratory London Research Institute Cancer Research London UK

Antigen interaction with specific IgE bound to the high-affinity fc receptor for IgE, constitutively expressed on the cell-surface of mast cells, generates signals that cause a shift in the resting state equilibrium of phosphorylation and dephosphorylation events that serves to maintain homeostasis. The outcome of this activated state is the release of a wide array of preformed and newly synthesized pro-inflammatory mediators. During the past few years, the existence of a negative feedback loop initiated upon fcεri engagement has also been envisaged. This negative signal involves the coordinated action of adaptors, phosphatases and ubiquitin ligases that limits the intensity and duration of positive signals, thus modulating mast cell functions. Relevant to this, others and we have demonstrated that Cbl family proteins control the amplitude of fcεri-generated signals by specific ubiquitin modification of activated receptor subunits and associated protein tyrosine kinases. In this article, we review advances in our understanding of the molecular mechanisms through which Cbl proteins regulate fcεri expression and signaling.

关键词： Mast Cells Basophils fcεri Negative Regulation Cbl Proteins Ubiquitination

过敏性鼻炎患者血液嗜酸性粒细胞表面CD63和fcεri的表达研究

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过敏性鼻炎患者血液嗜酸性粒细胞表面CD63和FcεRI的表达研究

作者：汪曌锦州医科大学

学位级别：硕士

目的检测静息状态和过敏原激发后,过敏性鼻炎（Allergic rhinitis,AR）患者、慢性单纯性鼻炎患者和健康人外周血嗜酸性粒细胞表面CD63和fcεri的表达变化情况。评估嗜酸性粒细胞激发试验在AR诊断中的临床价值。方法根据血清特异性IgE（S... 详细信息

目的检测静息状态和过敏原激发后,过敏性鼻炎（Allergic rhinitis,AR）患者、慢性单纯性鼻炎患者和健康人外周血嗜酸性粒细胞表面CD63和fcεri的表达变化情况。评估嗜酸性粒细胞激发试验在AR诊断中的临床价值。方法根据血清特异性IgE（Serum specific IgE,sIgE）的结果和症状体征,把研究对象分为三大组:AR组（81人）、慢性单纯性鼻炎组（21人）和健康人组（20人）,AR组又细分为特异性刺激组（艾蒿过敏35人、尘螨过敏24人）和对照组（其他过敏22人）。抽取2ml外周血,首先利用流式细胞术,根据嗜酸性粒细胞固有特征和高表达CCR3特性标记嗜酸性粒细胞。其次检测AR组、慢性单纯性鼻炎组和健康人组静息状态下外周血嗜酸性粒细胞数量以及其表面CD63和fcεri的表达。检测AR特异性刺激组、AR对照组和慢性单纯性鼻炎组,在0.1μg/mL和1.0μg/mL的艾蒿和尘螨过敏原激发后,外周血嗜酸性粒细胞CD63和fcεri的表达变化。以sIgE结果为诊断标准,通过ROC曲线和Spearman相关性分析评估嗜酸性粒细胞激发试验检测的CD63和fcεri在AR诊断中的意义。结果1、AR组比慢性单纯性鼻炎组和健康人组外周血嗜酸性粒细胞绝对数高（P＜0.05）,慢性单纯性鼻炎组和健康人组之间无差异（P＞0.05）。2、静息状态下,AR组比慢性单纯性鼻炎组和健康人组嗜酸性粒细胞CD63的表达都高（P＜0.05）,慢性单纯性鼻炎组和健康人组之间无差异（P＞0.05）。静息状态下,AR组和慢性单纯性鼻炎组都比健康人组嗜酸性粒细胞上的fcεri表达高（P＜0.05）,而AR组和慢性单纯性鼻炎组之间无差异（P＞0.05）。3、AR特异性刺激组给予不同浓度艾蒿、尘螨过敏原激发后,嗜酸性粒细胞上CD63表达均明显升高（P＜0.05）;而AR对照组和慢性单纯性鼻炎组在给予艾蒿、尘螨过敏原刺激后,CD63表达均无明显变化（P＞0.05）。AR特异性刺激组、AR对照组和慢性单纯性鼻炎组,经过艾蒿、尘螨过敏原刺激后,嗜酸性粒细胞fcεri的表达均无明显变化（P＞0.05）。4、ROC曲线结果:不同浓度的艾蒿和尘螨过敏原激发,嗜酸性粒细胞激发试验检测CD63的ROC曲线下面积范围为0.8-0.9,fcεri的ROC曲线下面积范围为0.5-0.6。Spearman相关性分析结果:不同浓度不同过敏原激发后,嗜酸性粒细胞表达CD63的增高与sIgE均呈正相关。结论1、AR组比慢性单纯性鼻炎组和健康人组外周血嗜酸性粒细胞增高。2、静息状态下,AR组比慢性单纯性鼻炎组和健康人组嗜酸性粒细胞CD63的表达高。AR组和慢性单纯性鼻炎组均比健康人组嗜酸性粒细胞上的fcεri表达高,但AR组和慢性单纯性鼻炎组之间并无差异。3、过敏原特异性激发能够增高AR患者嗜酸性粒细胞CD63的表达,而fcεri无变化。4、嗜酸性粒细胞激发试验检测CD63在AR患者过敏原诊断上的价值高,且与临床“金标准”sIgE呈正相关。

关键词：过敏性鼻炎嗜酸性粒细胞 CD63 fcεri