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食管癌组织Fas、Fasl蛋白表达与Fas基因甲基化相关性分析的研究

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食管癌组织Fas、FasL蛋白表达与Fas基因甲基化相关性分析的研究

作者：程义金苏州大学

学位级别：硕士

目的：观察食管鳞状细胞癌癌灶组织、癌旁正常组织、转移淋巴结及非转移淋巴结中Fas、Fasl蛋白的表达情况以及Fas基因甲基化状态，研究三者之间的相关性，探讨它们在食管鳞状细胞癌发生发展中的作用及其临床意义。方法：收集经手术治... 详细信息

目的：观察食管鳞状细胞癌癌灶组织、癌旁正常组织、转移淋巴结及非转移淋巴结中Fas、Fasl蛋白的表达情况以及Fas基因甲基化状态，研究三者之间的相关性，探讨它们在食管鳞状细胞癌发生发展中的作用及其临床意义。方法：收集经手术治疗的食管鳞状细胞癌患者的癌组织标本54例，癌旁正常组织标本54例，转移淋巴结35例，非转移淋巴结19例，应用免疫组化S-P染色技术测定以上组织Fas、Fasl蛋白的表达情况，应用甲基化特异性PCR (Methylation-specificPCR，MSP)法检测以上组织中Fas基因甲基化状态。结合临床及病理资料对实验结果进行统计学分析。结果：1.Fas蛋白在食管癌组织中阳性表达率为55.6%(30/54)低于癌旁组织的85.2%(46/54)(P蛋白的阳性表达率为84.2%（16/19），中分化为44.4%(12/27)，低分化为25.0%（2/8），高分化鳞癌Fas蛋白阳性表达率明显高于中低分化者(P蛋白表达的阳性率为髓质型59.3%（16/27）、蕈伞型53.8%(7/13)、溃疡型50.0%(3/6)和缩窄型50.0%(4/8)，各型间无显著性差异(P>0.05)。各浸润深度(T分期)：T2期Fas的阳性表达率为59.3%(16/27)、T3期52.0%(13/25)、T4期50.0%(1/2)(P>0.05);伴有淋巴结转移癌组织Fas蛋白表达率为38.1%（8/21），无淋巴结转移者为66.7%(22/33)(P蛋白的阳性表达率：IIa期61.9%(13/21)、IIb期50.0%(5/10)、III期52.2%(12/23)(P>0.05)。经统计学分析Fas蛋白的阳性表达与年龄、性别无关。2.Fasl蛋白在食管鳞癌组织中阳性表达率为81.5%(44/54)，高于癌旁组织的48.1%(26/54)(PFasl蛋白阳性表达率为：高分化57.9%（11/19）、中分化92.6%(25/27)、低分化100%（8/8），Fasl蛋白阳表达性率在高分化癌中明显低于中低分化者(PFasl蛋白阳性表达在髓质型为81.5%（22/27）、蕈伞型84.6%(11/13)、溃疡型83.3%(5/6)、缩窄型75.0%(6/8)，组间无显著性差异(P>0.05);不同T分期食管鳞癌Fasl蛋白的阳性表达率：T2期66.7%(18/27)、T3期96.0%(24/25)、T4期100%(2/2)，T2期低于T3、T4期(PFasl蛋白阳性表达率为100%（21/21），不伴淋巴结转移者为69.7%(23/33)(PFasl蛋白的阳性表达率为：IIa期71.4%(15/21)、IIb期90.0%(9/10)、III期87.0%(20/23)(P>0.05)。Fasl蛋白阳性表达与年龄、性别无关。3.食管癌组织Fas基因甲基化率为61.1%(33/54)，高于癌旁组织22.2%(12/54)(P0.05);不同大体病理类型食管鳞癌髓质、蕈伞、溃疡和缩窄各型间Fas蛋基因甲基化率分别为59.3%（16/27）、61.5%(8/13)、66.7%(4/6)和62.5%(5/8)，组间比较差异无统计学意义(P>0.05);不同浸润深度(T分期)食管鳞癌Fas基因甲基化率为：T2期59.3%(16/27)、T3期60.0%(15/25)、T4期100%(2/2)(P>0.05);有淋巴结转移患者食管鳞癌Fas基因甲基化率为：61.9%（13/21），无淋巴结转移者为：60.6%(20/33)(P>0.05);各临床分期食管鳞癌组织Fas基因甲基化率分别为：IIa期61.9%(13/21)、IIb期60.0%(6/10)、III期60.9%(14/23)，无统计学差异(P>0.05)。Fas基因甲基化与年龄、性别无关。4.转移组淋巴结Fas蛋白阳性表达率为33.3%(7/21)，低于非转移组淋巴结Fas蛋白阳性表达率66.7%(22/33)(PFasl蛋白阳性表达率为71.4%(15/21)，高于非转移组淋巴结Fasl蛋白阳性表达率42.4%(14/33)(PFasl蛋白表达的相关性系数r=－0.33，P蛋白表达与Fas基因

关键词： Fas蛋白 Fasl蛋白 Fas基因甲基化食管鳞癌

参杞强精胶囊对弱精症大鼠能量代谢及Fas、Fasl蛋白表达的影响

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中医药导报 2018年第2期24卷 16-19页

作者：刘倩梁晓乐田元春宾彬陆海旺广西中医药大学第一附属医院广西南宁530023 广西医科大学广西南宁530021

目的:探讨参杞强精胶囊对弱精症大鼠能量代谢及Fas、Fas L蛋白表达的影响。方法:将40只SD健康雄性大鼠分为正常组、模型组、参杞强精胶囊组和生精胶囊组,采用奥硝唑(ORN)灌胃诱导形成大鼠生精功能障碍模型。参杞强精胶囊组予参杞强精胶... 详细信息

目的:探讨参杞强精胶囊对弱精症大鼠能量代谢及Fas、Fas L蛋白表达的影响。方法:将40只SD健康雄性大鼠分为正常组、模型组、参杞强精胶囊组和生精胶囊组,采用奥硝唑(ORN)灌胃诱导形成大鼠生精功能障碍模型。参杞强精胶囊组予参杞强精胶囊灌胃,生精胶囊组予生精胶囊灌胃,正常组予生理盐水灌胃,连续给药4周。检测大鼠附睾组织α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)、果糖(Fructose)、乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)的浓度,免疫组织化学法检测Fas、Fas L蛋白在大鼠睾丸实质组织中的表达。结果:模型组α-glucosidase、Fructose、LDH浓度明显低于正常组(P蛋白表达明显低于模型组(P蛋白表达;改善能量代谢和凋亡蛋白表达可能是参杞强精胶囊治疗弱精症的主要机制。

关键词：参杞强精胶囊弱精症能量代谢 Fas蛋白 Fasl蛋白大鼠

青藤碱对肾缺血再灌注大鼠肾组织Fas/Fasl蛋白表达水平影响的探讨

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卫生职业教育 2017年第18期35卷 157-159页

作者：吕兴华冷玉芳杨艳妮苏玉洁王朋郑贯峥兰州大学第一医院甘肃兰州730000

目的探讨青藤碱对肾缺血再灌注大鼠肾组织Fas、Fasl蛋白表达水平的影响。方法选取健康雄性Wistar大鼠72只,体重180~220 g,随机分为假手术组(S组)、空白给药组(SS组)、肾缺血再灌注损伤模型组(I/R组)、青藤碱组(SIN组),每组18只。I/R组、... 详细信息

目的探讨青藤碱对肾缺血再灌注大鼠肾组织Fas、Fasl蛋白表达水平的影响。方法选取健康雄性Wistar大鼠72只,体重180~220 g,随机分为假手术组(S组)、空白给药组(SS组)、肾缺血再灌注损伤模型组(I/R组)、青藤碱组(SIN组),每组18只。I/R组、SIN组游离双侧肾蒂,用无创动脉夹夹闭左肾肾蒂,使左肾缺血,45分钟后松开动脉夹再灌注,并即刻切除右肾,建立肾缺血再灌注损伤模型。S组、SS组仅游离双侧肾蒂,不夹闭左肾肾蒂。SIN组、SS组于缺血后15分钟(即再灌注前30分钟)向腹腔注射青藤碱注射液60 mg/kg,I/R组、S组于同一时间向腹腔注射等量生理盐水。再灌注后6小时(T1)、12小时(T2)、24小时(T3)穿刺心脏采血,用全自动生化分析仪检测血清Cr、BUN浓度;摘除左肾,光镜下观察肾组织病理学变化,用免疫组化法检测肾组织Fas、Fasl蛋白表达水平,用TUNEL法检测并计算肾小管上皮细胞凋亡率。结果 S组与SS组大鼠在T1、T2、T3的血清Cr、BUN浓度,Fas、Fasl蛋白表达水平,肾小管上皮细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05);与S组比较,I/R组、SIN组T1、T2、T3的血清Cr、BUN浓度升高(PFasl蛋白表达水平升高(PFasl蛋白表达水平下降(P蛋白表达水平、细胞凋亡率升高(PFasl蛋白的表达水平,从而减少肾小管上皮细胞的凋亡,有助于减轻I/R时肾脏的损伤。

关键词：青藤碱肾脏缺血再灌注损伤 Fas蛋白 Fasl蛋白

丹参对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后细胞凋亡及Fasl蛋白表达的影响

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山东中医药大学学报 2014年第1期38卷 58-61页

作者：许险艳林迳苍李德水丁小明泉州医学高等专科学校福建泉州362000

目的:探讨丹参对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤(IRI)后细胞凋亡及Fasl蛋白表达的影响。方法:健康豚鼠72只,随机分成正常组、假手术组、丹参干预假手术组、模型组和干预组(术前腹腔注射丹参注射液,每天1次共7 d),模型组和干预组再各分成3个亚组... 详细信息

目的:探讨丹参对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤(IRI)后细胞凋亡及Fasl蛋白表达的影响。方法:健康豚鼠72只,随机分成正常组、假手术组、丹参干预假手术组、模型组和干预组(术前腹腔注射丹参注射液,每天1次共7 d),模型组和干预组再各分成3个亚组:缺血30 min组、再灌注6 h组及再灌注24 h组。用HE染色法观察缺血及再灌注不同时间段耳蜗各部位的形态学改变,用免疫组织化学法检测内耳fasl的表达,用原位凋亡法(TUNEL法)检测内耳细胞凋亡情况。结果:正常组、假手术组、丹参干预假手术组内耳罕见凋亡细胞,fasl为弱阳性表达;模型组Corti器、血管纹、螺旋神经节每个时间点均有细胞凋亡,fasl为阳性表达,与正常组比较有显著性差异(Pfasl为阳性表达,程度较模型组减弱,与模型组比较有显著性差异(Pfasl参与了耳蜗IRI后的细胞凋亡,丹参可能通过抑制Fasl蛋白的表达使凋亡细胞减少而对IRI后的耳蜗起保护作用。

关键词：丹参耳蜗缺血再灌注损伤 Fasl蛋白细胞凋亡豚鼠

骨髓增生异常综合征患者Fas和Fasl蛋白的表达及对造血祖细胞的影响

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复旦学报（医学版） 2002年第4期29卷 276-279页

作者：李大启林果为王小钦复旦大学附属华山医院血液科

目的　探讨骨髓增生异常综合征 (MDS)患者骨髓细胞Fas(CD95 )及其配体 (fasl)的蛋白表达和作用。方法　采用免疫组化方法检测患者和正常对照组骨髓细胞Fas和fasl的表达。体外培养观察Fas免疫球蛋白(Fas Ig)及TNFα抗体对患者造血祖细胞... 详细信息

目的　探讨骨髓增生异常综合征 (MDS)患者骨髓细胞Fas(CD95 )及其配体 (fasl)的蛋白表达和作用。方法　采用免疫组化方法检测患者和正常对照组骨髓细胞Fas和fasl的表达。体外培养观察Fas免疫球蛋白(Fas Ig)及TNFα抗体对患者造血祖细胞集落形成的影响 ,酶联免疫吸附试验测定培养细胞的胞质DNA片段以观察凋亡情况。结果　①MDS患者 77% (2 0 / 2 6例 )表达Fas蛋白 ,81% (2 1/ 2 6例 )表达Fasl蛋白 ,正常对照组无表达。②Fas、fasl表达与FAB分型有关 :Fas蛋白表达 ,难治性贫血 (RA)显著高于RA伴有原始细胞过多(RAEB)者、转变中的RAEB(RAEB t)和继发于MDS的急性髓细胞白血病 (postMDS AML) (RA >RAEB >RAEB -t >postMDS -AML) ,但RA患者的fasl表达最低。③体外培养发现 ,加入Fas Ig或TNFα抗体以阻断其途径 ,MDS患者粒细胞巨噬细胞集落生成单位 (CFU GM)和红细胞集落生成单位 (CFU E)的集落形成显著增加 ,培养细胞的胞质DNA片段显著下降。结论　MDS骨髓细胞Fas和fasl的表达异常 ,并具功能活性。Fas。

关键词：骨髓增生异常综合征 Fas Fasl蛋白造血祖细胞骨髓细胞免疫组织化学

豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后Fasl蛋白的表达及其与细胞凋亡的关系

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解剖科学进展 2013年第5期19卷 428-431页

作者：许险艳李德水林迳苍丁小明泉州医学高等专科学校福建泉州362000

目的探讨豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后细胞凋亡的情况、凋亡相关蛋白fasl表达的改变以及二者之间的关系。方法健康豚鼠40只随机分成正常组、假手术组和模型组,模型组再分为缺血30min、再灌注6h及24h三组。用组织化学方法观察缺血及再灌注... 详细信息

目的探讨豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后细胞凋亡的情况、凋亡相关蛋白fasl表达的改变以及二者之间的关系。方法健康豚鼠40只随机分成正常组、假手术组和模型组,模型组再分为缺血30min、再灌注6h及24h三组。用组织化学方法观察缺血及再灌注不同时间段耳蜗各部位的组织学改变,用免疫组织化学法检测内耳fasl的表达,用原位凋亡法(TUNEL法)检测内耳细胞凋亡的情况。结果正常组、假手术组内耳罕见凋亡细胞,fasl为弱阳性表达;模型组Corti器、血管纹、螺旋神经节在缺血及再灌注每个时间段均有细胞凋亡,fasl为阳性表达,与正常组比较明显增多(fasl参与了豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后细胞凋亡的发生。

关键词：豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤 Fasl蛋白细胞凋亡

IL-1β和TNF-α对体外培养的人RPE细胞Fasl蛋白及mRNA表达的影响

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国际眼科杂志 2005年第5期5卷 916-918页

作者：刘兵马吉献惠延年解放军空军总医院眼科中国北京市100036 第四军医大学西京医院眼科中国陕西省西安市710032

目的:观察IL-1β和TNF-α对培养的人RPE细胞Fasl蛋白、mRNA表达的影响。方法:流式细胞仪检测暴露于IL-1β和/或TNF-α的RPE细胞fasl的表达,并用mRNA斑点杂交分析mRNA的改变。结果:流式细胞仪显示23.4%培养的RPE细胞表达fasl。IL-1β,TNF... 详细信息

目的:观察IL-1β和TNF-α对培养的人RPE细胞Fasl蛋白、mRNA表达的影响。方法:流式细胞仪检测暴露于IL-1β和/或TNF-α的RPE细胞fasl的表达,并用mRNA斑点杂交分析mRNA的改变。结果:流式细胞仪显示23.4%培养的RPE细胞表达fasl。IL-1β,TNF-α和二者联合应用后fasl阳性率则分别为25.7%,9.7%和17.2%。mRNA斑点杂交亦证实TNF-α下调faslmRNA的表达。结论:TNF-α可下调体外培养的人RPE细胞Fasl蛋白,mRNA的表达。

关键词：玻璃体视网膜病变增生性视网膜色素上皮细胞细胞培养 fasl 流式细胞仪人 mRNA表达人RPE细胞 Fasl蛋白 TNF-α IL-1β 体外培养流式细胞仪检测 RNA斑点杂交 faslmRNA

胎儿角膜深低温保存对FAS/Fasl蛋白表达的影响

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国际眼科杂志 2008年第5期8卷 907-908页

作者：马路生高波杨朝忠于宁孙秋香徐则林青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院眼科中国山东省烟台市264000 青岛大学医学院附属第二医院眼科中国山东省青岛市266042

目的:研究细胞凋亡信号分子Fas和细胞凋亡因子fasl在新鲜及深低温保存后胎儿角膜的表达情况。方法:应用免疫组织化学SABC法对33例不同胎龄(5mo至足月)胎儿角膜石蜡标本切片后,分别进行了Fas和Fasl蛋白染色。结果:胎儿角膜细胞Fas蛋白及F... 详细信息

目的:研究细胞凋亡信号分子Fas和细胞凋亡因子fasl在新鲜及深低温保存后胎儿角膜的表达情况。方法:应用免疫组织化学SABC法对33例不同胎龄(5mo至足月)胎儿角膜石蜡标本切片后,分别进行了Fas和Fasl蛋白染色。结果:胎儿角膜细胞Fas蛋白及Fasl蛋白全为胞质和/或胞膜着色。33/33例角膜上皮细胞、基质细胞及内皮细胞Fas蛋白阳性表达,经统计学分析,未发现不同月龄间有差异。33/33角膜上皮细胞及内皮细胞Fasl蛋白阳性表达,经统计学分析,未发现不同月龄间有差异,角膜基质细胞Fasl蛋白的表达为0/33。新鲜角膜和冷冻保存后角膜的Fas,Fasl蛋白阳性表达量经统计学分析无差别。结论:新鲜和深低温保存后的5mo至足月龄胎儿角膜均可见Fas,Fasl蛋白的表达。其中Fas在角膜上皮、基质和内皮细胞均表达,fasl在角膜上皮、内皮细胞表达,而基质细胞不表达。深低温保存对胎儿角膜Fas/Fasl蛋白表达无影响。

关键词： Fas蛋白 Fasl蛋白凋亡角膜

舒林酸对结肠癌变中Fas和Fasl蛋白表达影响的初步研究

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天津医药 2003年第11期31卷 716-719页

作者：孙保存赵秀兰阎雪燕刘易欣王欣张诗武孙燕天津医科大学病理教研室天津医科大学肿瘤医院300070 天津医科大学总医院消化科天津医科大学肿瘤医院

目的 :探讨舒林酸诱导肿瘤细胞凋亡可能存在的分子机制。方法 :利用二甲肼诱发的小鼠实验性大肠癌动物模型 ,采用免疫组织化学染色的方法 ,分别标记Fas及fasl阳性细胞 ,观察诱癌过程中Fas和Fasl蛋白表达细胞的分布与密度变化和舒林酸对... 详细信息

目的 :探讨舒林酸诱导肿瘤细胞凋亡可能存在的分子机制。方法 :利用二甲肼诱发的小鼠实验性大肠癌动物模型 ,采用免疫组织化学染色的方法 ,分别标记Fas及fasl阳性细胞 ,观察诱癌过程中Fas和Fasl蛋白表达细胞的分布与密度变化和舒林酸对它们的影响。结果 :Fas和fasl的表达阳性产物主要位于细胞浆 ,阳性细胞均位于大肠黏膜表层上皮中 ,呈簇状分布 ,舒林酸预防组和治疗组Fas和fasl表达量与模型组比较差别有统计学意义 (Pfasl的表达 ,诱导细胞凋亡 ,抑制肿瘤形成和发展。

关键词：舒林酸结肠癌 Fas蛋白 Fasl蛋白癌细胞凋亡动物模型