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睾丸细胞的分离及fas l的测定(摘要)

中华泌尿外科杂志 1998年第9期19卷 48-48页

作者：兰平官鹏严律南肖路加华西医科大学附属第一医院外科华西医科大学法医系病理科

早期研究认为睾丸免疫豁免是解剖原因所致，如缺乏引流或存在血液屏障可阻止淋巴细胞进入这些部位［１］。现在的研究表明，循环细胞可以进入这些豁免部位，这些部位的抗原也可以自由地进入循环中［２］。本研究旨在分离Ｆａｓ配体阳性... 详细信息

早期研究认为睾丸免疫豁免是解剖原因所致，如缺乏引流或存在血液屏障可阻止淋巴细胞进入这些部位［１］。现在的研究表明，循环细胞可以进入这些豁免部位，这些部位的抗原也可以自由地进入循环中［２］。本研究旨在分离Ｆａｓ配体阳性睾丸Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞，了解免疫豁...

关键词：睾丸细胞免疫豁免 fas l 淋巴细胞白细胞大鼠睾丸

Effects of Shenmai and Aminophylline on Apoptosis of Small Airway Smooth Muscle Cells and the Expression of Relevant Genes in Rats with Emphysema

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Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2002年第4期22卷 310-312页

作者：牛汝楫刘辉国傅娟 DepartmentofRespiratoryMedicine

The effects of Shenmai injection (SMI) and am inophylline on apoptosis of sm all airway smooth muscle cells (SASMC) and the fas/ fas l expression in rats with papain- induced em physe- ma were *** emphysema model was established by a single intratracheal instillation of *** and fas/fas l expression of SASMC were detected by im munohistochemistry SABC and TU NEl assay at day1,3,5 ,7,15 ,30 after modeling,and the effect of SMI and am inophylline on them were *** results indicated that the fas/fas l expression positive rate in SASMC was2 .31± 0 .5 5 /1.2 8± 0 .4 *** a single intratracheal instillation of papain,the expression of fas/fas l positive rate in the placebo group was increased in a tim e- dependent *** could inhibit the expression of fas/ fas l ,but aminophylline couldn't. The positive rate of apoptosis in the control group was 0 .87± 0 .32 .After a single intratracheal in- stillation of papain,the SASMC apoptosis positive rate in the placebo group was increased in a tim e- dependent *** SASMC apoptosis rate in all groups was declined after treatment with SMI,but the effect of am inophylline was *** dem onstrated thatin the patho- genesis of emphysem a fas/fas l played an important role in the regulation of SASMC apoptosis. SMI influenced the expression of fas/ fas l and declined SASMC apoptosis by inhibiting the releas- ing of inflamm atory m edia and played an im portant role in the therapy of em physema.

关键词： emphysema small airway smooth muscle cells fas fas l apoptosis

丁苯酞对MPP+诱导SH-SY5Y细胞模型JNK通路的作用机制研究

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丁苯酞对MPP+诱导SH-SY5Y细胞模型JNK通路的作用机制研究

作者：陈娟华北理工大学

学位级别：硕士

目的探讨JNK通路相关凋亡因子在MPP+诱导的SH-SY5Y细胞多巴胺能神经元凋亡过程中所起的作用;了解NBP通过调节JNK通路中相关凋亡因子P-JNK、fas和fas l对PD细胞模型的保护作用。方法选用人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株接种于细胞培养瓶中... 详细信息

目的探讨JNK通路相关凋亡因子在MPP+诱导的SH-SY5Y细胞多巴胺能神经元凋亡过程中所起的作用;了解NBP通过调节JNK通路中相关凋亡因子P-JNK、fas和fas l对PD细胞模型的保护作用。方法选用人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株接种于细胞培养瓶中进行体外培养,采用DMEM/F12=1:1的培养基进行培养,培养基中含有10%胎牛血清,青霉素100U/m l,链霉素100U/m l,实验分为四组:空白对照组、MPP+模型组、丁苯酞+MPP+组、JNK抑制剂SP600125+MPP+组。空白对照组:SH-SY5Y细胞用全培养基正常培养,培养的整个过程不加任何药物进行干预;MPP+模型组:在培养的细胞中加入1mmol/lMPP+培养24h;丁苯酞+MPP+组:在培养的细胞中加入10μmol/l丁苯酞预处理3h后加入1mmol/lMPP+继续培养24h;SP600125+MPP+组:在培养的细胞中加入10μmol/l的JNK抑制剂SP600125预处理3h后加入1mmol/lMPP+继续培养24h。1各组细胞形态利用倒置荧光显微镜观察;2各组细胞的存活率通过MTT比色法进行检测;3各组细胞的凋亡率通过Annexin-V/PI流式细胞术进行检测;4各组细胞P-JNK、fas和fas l蛋白表达量采用免疫印迹法(western-blot)检测;5各组细胞fas和fas l的基因m RNA采用RT-PCR检测。结果1倒置荧光显微镜下观察各组细胞形态可见:空白对照组贴壁细胞数量多,形态大致为梭形,细胞之间的突起结构明显;MPP+模型组贴壁细胞数量明显减少,细胞形态由长梭形变圆,细胞之间的突起结构变短;给予丁苯酞预处理和JNK抑制剂SP600125预处理的细胞的贴壁数量较MPP+模型组明显增加,变圆的细胞数量较少,大部分的细胞形态是梭形或三角形,与空白对照组的细胞形态接近。2 MTT比色法检测各组细胞相对存活率的结果为:设定空白对照组存活率为100%±0.00%,MPP+模型组细胞的相对存活率为49.3%±2.07%,与空白对照组细胞存活率相比,MPP+组细胞存活率显著降低(Plot检测P-JNK、fas和fas l蛋白的表达结果为:与空白对照组相比,MPP+模型组三种因子蛋白明显增加(Pfas蛋白相对表达量为:0.48±0.09、0.93±0.08、0.61±0.10、0.61±0.12;fas l蛋白相对表达量为:0.22±0.03、0.52±0.06、0.36±0.07、0.34±0.04。5 RT-PCR检测fas和fas l基因m RNA表达结果为:与空白对照组相比,MPP+模型组两种因子m RNA表达明显增加(Pfas基因m RNA相对表达量为:0.09±0.04、0.73±0.09、0.42±0.08、0.25±0.08;fas l基因m RNA相对表达量为:0.16±0.06、0.94±0.18、0.53±0.08、0.32±0.08。结论1 JNK通路上的相关凋亡因子P-JNK、fas和fas l在介导SH-SY5Y细胞PD细胞模型多巴胺能神经元凋亡过程中起调控作用,给予JNK抑制剂SP600125后三种因子表达降低,抑制细胞凋亡;2 NBP可以降低JNK通路相关因子PJNK、fas和fas l的表达,是NBP降低凋亡的作用靶点。

关键词：帕金森病 SH-SY5Y细胞 JNK通路丁苯酞 fas fas l

氯化钆诱导重症急性胰腺炎大鼠肺泡巨噬细胞凋亡机制的研究

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氯化钆诱导重症急性胰腺炎大鼠肺泡巨噬细胞凋亡机制的研究

作者：闫文貌首都医科大学

学位级别：硕士

目的通过观察fasl在肺泡巨噬细胞中的表达,探讨氯化钆诱导重症急性胰腺炎大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的可能机制。材料与方法将48只成年SD大鼠随机分为正常对照组、重症急性胰腺炎组、氯化钆治疗组,每组16只。逆行性胰胆管注射5%牛磺酸钠建立... 详细信息

目的通过观察fasl在肺泡巨噬细胞中的表达,探讨氯化钆诱导重症急性胰腺炎大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的可能机制。材料与方法将48只成年SD大鼠随机分为正常对照组、重症急性胰腺炎组、氯化钆治疗组,每组16只。逆行性胰胆管注射5%牛磺酸钠建立重症急性胰腺炎大鼠模型。模型制成6小时后,经支气管肺泡灌洗液获取肺泡巨噬细胞,检测支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子|á和白介素1β含量,肺组织髓过氧化物酶水平,肺脏/胰腺组织HE染色检查,透射电镜观察和流式细胞仪Annexin V/FITC和碘化丙啶双染色法检测肺泡巨噬细胞凋亡情况,同时行肺泡巨噬细胞爬片的fasl免疫细胞化学检查。结果氯化钆治疗组透射电镜观察可见典型凋亡形态学特征,髓过氧化物酶活性、支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子|á和白介素1β含量均较重症急性胰腺炎组减低,差异有显著意义(Pfasl阳性表达细胞明显增多,与正常对照组、重症急性胰腺炎组相比差异也均有显著意义(Pfasl通路诱导重症急性胰腺炎大鼠肺泡巨噬细胞发生凋亡,进而减轻重症急性胰腺炎所致的肺损伤。

关键词：氯化钆 fas l 重症胰腺炎肺损伤凋亡肺泡巨噬细胞

针刺环跳和夹脊对坐骨神经损伤大鼠脊髓中fas、fasl、Caspase-8表达的比较研究

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针刺环跳和夹脊对坐骨神经损伤大鼠脊髓中Fas、FasL、Caspase-8表...

作者：李秋莎辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:本课题是研究分别针刺环跳穴和夹脊穴对坐骨神经钳夹损伤模型大鼠的抗细胞凋亡作用。采用分子生物学检测方法,,观察大鼠神经节中fas,fas l及半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)家族中Caspase-8含量的表达,进而探讨针灸治疗大鼠坐骨... 详细信息

目的:本课题是研究分别针刺环跳穴和夹脊穴对坐骨神经钳夹损伤模型大鼠的抗细胞凋亡作用。采用分子生物学检测方法,,观察大鼠神经节中fas,fas l及半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)家族中Caspase-8含量的表达,进而探讨针灸治疗大鼠坐骨神经损伤中抗细胞凋亡的作用,比较分别针刺环跳穴和夹脊穴对坐骨神经损伤细胞抗凋亡作用的差异。材料与方法:参考钳夹法制作模型,制成大鼠坐骨神经急性损伤。选用SPF级SD大鼠48只,7-9周,雌雄各半,采用随机数字表法分成空白组、模型组、环跳组、夹脊组,每组各12只,空白组:正常喂养,每天将动物固定在自制的塑料筒内15分钟,尾部和后肢暴露在外,不进行治疗;模型组:在造模成功后,与空白组做相同处理;环跳组和夹脊组则选用毫针,分别针刺环跳穴和夹脊穴,并连接电针进行治疗,疗程与其他两组相同。治疗14天后,取出损伤坐骨神经钳夹处下方约2mm的坐骨神经节和同侧l4-l5节段脊髓,HE染色观察坐骨神经病理变化情况,用Western Blot等检测方法观察大鼠神经细胞凋亡因子fas,fas l以及Caspase-8的表达情况,根据结果进行统计学分析。结果:1.坐骨神经功能指数(SFI)造模后第8天,与空白组相比,坐骨神经钳夹模型大鼠各组的SFI明显低于空白组,差异有统计学意义(plot检测:3.1 Western blot fas检测结果四组中fas均有不同程度的表达:(1)与空白组相比,模型组的fas蛋白表达水平上调(pfas蛋白表达明显上调(pfas蛋白表达下调(pfas蛋白表达下调明显(plot fas l检测结果四组中fas l均有不同程度的表达:(1)与空白组相比,模型组的fas l蛋白表达水平上调(pfas l蛋白表达明显上调(pfas l蛋白表达下调(pfas l蛋白表达下调明显(plot Caspase-8检测结果四组中Caspase-8均有不同程度的表达:(1)与空白组相比,模型组的Caspase-8蛋白表达水平上调(pfas免疫组织化检测结果四组中fas均有不同程度的表达:(1)与空白组相比,模型组的fas蛋白表达水平上调(pfas蛋白表达明显上调(pfas蛋白表达下调(pfas蛋白表达下调明显(pfas l免疫组织化检测结果四组中fas l均有不同程度的表达:(1)与空白组相比,模型组的fas l蛋白表达水平上调(pfas l蛋白表达明显上调(pfas l蛋白表达下调(pfas l蛋白表达下调明显(pfas,fas l和Caspase-8的表达,机制可能与凋亡因

关键词：坐骨神经损伤针刺环跳穴夹脊穴 fas fas l Caspase-8

迷迭香酸抗过氧化氢诱导血管平滑肌细胞凋亡作用的研究

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迷迭香酸抗过氧化氢诱导血管平滑肌细胞凋亡作用的研究

作者：郭峰南华大学

学位级别：硕士

研究背景：血管平滑肌细胞的凋亡参与了动脉粥样硬化的发生、发展以及斑块破裂损伤的整个过程，在斑块形成、血管重构、斑块破裂以及血栓形成中起重要的作用。因此，控制血管平滑肌细胞凋亡目前已经成为稳定动脉粥样硬化斑块和防止严重... 详细信息

研究背景：血管平滑肌细胞的凋亡参与了动脉粥样硬化的发生、发展以及斑块破裂损伤的整个过程，在斑块形成、血管重构、斑块破裂以及血栓形成中起重要的作用。因此，控制血管平滑肌细胞凋亡目前已经成为稳定动脉粥样硬化斑块和防止严重后果的一个新思路。迷迭香酸是一种天然的水溶性酚类化合物，具有抗氧化、抗炎症、拮抗细胞内高钙等作用。我们曾观察到迷迭香酸在培养的ECV 304细胞上能通过上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白来拮抗HO诱导的凋亡，但是其对体外培养的血管平滑肌细胞的氧化应激损伤及凋亡的影响尚不清楚，本实验旨在探讨迷迭香酸对HO诱导的血管平滑肌细胞凋亡的影响，为开发药物新的药理作用提供理论依据。方法：首先用不同浓度的HO处理体外培养的大鼠血管平滑肌细胞24小时，流式细胞术检测凋亡率，AO染色观察形态学变化，确定HO最佳浓度，然后将培养的血管平滑肌细胞按如下分组处理：①正常对照组;②HO处理组;③迷迭香酸(10、20、40μmol/l)+HO组;④阳性药Vit E+HO组;在不同浓度迷迭香酸或阳性药预处理30分钟后，加入最佳浓度的HO继续培养24小时，采用MTT法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western-Blotting检测细胞中Bcl-2、Bax、fas和fas l蛋白的表达。所有细胞在实验之前均经过无血清同步化处理24小时。

关键词：迷迭香酸血管平滑肌细胞凋亡 H2O2 Bcl-2 Bax fas fas l

肿瘤微环境来源的TGF-β1通过诱导树突状细胞fasl的表达促进肺癌的进展

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肿瘤微环境来源的TGF-β1通过诱导树突状细胞FasL的表达促进肺癌...

桔梗皂苷D通过FOXO3a/fasl/MlKl通路诱导前列腺癌PC3细胞程序性坏死

第十四届全国肿瘤生物治疗大会

作者：余磊浙江大学医学院免疫学研究所

fas是经典的凋亡信号,几乎所有的肿瘤均表达fas,但多数肿瘤fas信号的活化不引起细胞凋亡,却促进其进展,研究显示肺癌细胞fas信号的活化不诱导细胞凋亡,却通过促进其招募髓系来源的抑制性细胞介导肿瘤进展。树突状细胞(Dendritic cells,D... 详细信息

fas是经典的凋亡信号,几乎所有的肿瘤均表达fas,但多数肿瘤fas信号的活化不引起细胞凋亡,却促进其进展,研究显示肺癌细胞fas信号的活化不诱导细胞凋亡,却通过促进其招募髓系来源的抑制性细胞介导肿瘤进展。树突状细胞(Dendritic cells,DCs)能激发机体强大的抗肿瘤免疫,是治疗肿瘤的有效疫苗。最近有报道指出,TGF-β1能诱导DCs高表达fasl。另外,肺癌肿瘤微环境中能检测到高水平TGF-β1。我们实验结果显示,3ll小鼠肺癌细胞培养或肿瘤组织研磨上清能诱导DCs表达fas l,并促进其体外侵袭。此外,肿瘤微环境中的TGF-β1能诱导DCs表达fasl而促进肿瘤进展。本项目通过体内、外实验明确DCs促肿瘤进展的作用及与fas l和TGF-β1的关系。此外,通过分选肺癌小鼠体内来源的fas l高、低表达的DCs,评价其对肺癌细胞生物学行为的影响,为肺癌的治疗提供新思路。

关键词：树突状细胞肿瘤 TGF-β1 fas l

来源： cnki会议评论

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桔梗皂苷D通过FOXO3a/FasL/MLKL通路诱导前列腺癌PC3细胞程序性坏...