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10-23DRzs mediated by fluorescent silica nanoparticles inhibit expression of HBV

中国现代医学杂志 2011年第3期21卷 354-359页

作者： Shi-neng Yan Hong-yuan Zhu Hui-ying Li Qi-lu Wang Jia-gen Wen Li-qun Kang Jin-feng Zhao Yang-de Zhang National Key Laboratory of Nanobiotechnology Ministry of Health Changsha Hunan 410008 P.R.China Merck Sharp & Dohme Changsha Hunan 410008 P.R.China

Objective To prepare fluorescent silica nanoparticles(fsnps) carrying 10-23 deoxyribozymes(10-23DRzs) and to evaluate their inhibitory effect on human hepatitis B virus(HBV).Methods The fsnps were prepared by microemulsion method and further modified by NaCl.Their diameter and the Zeta potential were tested.The HBV-specific 10-23DRzs were designed according to the sequences of S and C genes of HBV.The 10-23DRzs were connected to fsnps,which constituted the fsnps-DNA.The connecting efficiency and the protective effect of nanoparticles on 10-23DRzs were tested by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE).The HepG2.2.15 cells were transfected by fsnps-DNA,of which the inhibitory effects on HBsAg and HBeAg were analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).Results The nanoparticles were spherical and uniform in size,with a diameter of 220 nm and the surface Zeta potential of +15.2 mV.The combination of DNA and fsnps effectively protected DNA from nuclease degradation.Transfection of fsnps-DNA significantly inhibited the expression of HBV S and C genes compared to the liposome control group.Conclusion The fsnps have been successfully prepared and efficiently connected to HBV-specific 10-23DRzs,which significantly inhibit the expression of HBV S and C genes in cell culture.

关键词： 10-23DRzs fsnps HBV gene therapy

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