检索结果-南通市图书馆

维普期刊数据库

同方期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

foxn3对急性肺损伤的调控作用机制研究

FOXN3对急性肺损伤的调控作用机制研究

作者：马春雅新乡医学院

学位级别：硕士

背景急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)是由感染或创伤引发的呼吸系统疾病。由ALI所引发的血管内皮细胞和肺泡上皮细胞损伤会诱发弥漫性肺间质及肺泡水肿,从而导致急性低氧性呼吸功能不全或呼吸衰竭,随着病症加深会逐渐发展成急性呼吸... 详细信息

背景急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)是由感染或创伤引发的呼吸系统疾病。由ALI所引发的血管内皮细胞和肺泡上皮细胞损伤会诱发弥漫性肺间质及肺泡水肿,从而导致急性低氧性呼吸功能不全或呼吸衰竭,随着病症加深会逐渐发展成急性呼吸窘迫综合征(Acute respiratory distress syndrome,ARDS)危及生命健康。叉头盒蛋白N3(Fork head Box N3,foxn3)是FOX(Forkhead box)基因家族中的一个重要的转录因子,它跟多种炎症调控因子具有重要的关联,然而其在ALI引发的炎症反应中的作用机制尚不清楚。目的1.探究foxn3对ALI的重要调控作用;2.揭示foxn3调控ALI的具体分子机制;方法1.观察脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)诱导的ALI小鼠模型中foxn3的表达变化;从北京维通利华公司购买8-9周的C57BL/6的小鼠,利用气管插管的方法,按照4 mg/kg比例将LPS和2×10(菌落单位/只)比例将***注射到每只小鼠体内,对照组注射相同剂量的PBS或生理盐水,4天或24 h后进行肺组织取材,利用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time Quantitative PCR Detecting System,q RT-PCR)或者foxn3的免疫组化染色分析foxn3在ALI小鼠模型中的表达变化。2.利用腺相关病毒(AAV)在小鼠中对foxn3进行过表达,观察过表达foxn3对急性肺损伤的影响;利用气管滴注的方式,将过表达foxn3的AAV以及Vec对照组干预小鼠的肺组织,三周后利用LPS或***炎症损伤诱导进行肺组织取材,通过H&E染色和免疫组化CD68观察foxn3过表达后小鼠肺组织炎症损伤程度的变化;利用q RT-PCR检测肺组织炎症因子表达变化;利用肺泡灌洗术分析肺泡灌洗液(Bronchoalveolar Lavage Fluid,BALF)中的总蛋白浓度,炎症因子的分泌等分析过表达foxn3对急性肺损伤的影响。3.利用质谱分析foxn3所结合的重要调控因子;将Flag-tagged foxn3的质粒转染到人胚肾细胞(Human Embryonic Kidney 293T,HEK293T)细胞中,利用Anti-Flag的免疫共沉淀实验(Co-Immunocoprecipitation,Co-IP)将foxn3纯化出来,利用SDS-PAGE胶电泳,经考马斯亮蓝染色后,将明显多出来的条带(跟Ig G对照组相比)扣下来,进行质谱测序肽段分析,观察跟foxn3特异结合的重要调控因子。4.利用Co-IP实验、染色质免疫沉淀实验(Ch IP)、q RT-PCR及泛素化实验探讨foxn3对核因子-κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路的调控作用;质谱分析发现foxn3可能通过hnRNPU参与调控NF-κB信号。为了进一步证实该推测,首先利用Co-IP实验进一步确认foxn3跟hnRNPU等的互作。接下来,分别在干扰或者过表达了foxn3后,利用Anti-p65的Ch IP或者q RT-PCR实验观察foxn3对NF-κB转录活性的影响以及通过泛素化实验观察foxn3对IκBα的泛素化降解的影响。结果1.成功构建LPS或***的小鼠ALI模型,并发现foxn3的表达在ALI模型中显著下调;2.利用AAV对小鼠的肺组织进行了foxn3的过表达实验,结果发现:与对野生型(WT)小鼠相比,过表达了foxn3后显著抑制ALI诱发的炎症表型。主要表现为抑制肺泡肿胀、肺泡壁的增厚以及炎症细胞的浸润,并抑制肺泡的通透性以及炎症因子的表达;3.利用泛素化、Ch IP以及q RT-PCR实验,证实foxn3抑制NF-κB信号的激活;4.构建了hnRNPU不同区域删除突变体,利用Co-IP实验证实foxn3是通过与IκBα竞争性结合hnRNPU的一段中间区域,从而抑制IκBα的泛素化降解,进而抑制NF-κB信号的活化;结论***3显著抑制急性肺损伤诱发的炎症;***3抑制NF-κB信号通路的激活;***3通过竞争性跟IκBα结合hnRNPU从而抑制IκBα的泛素化降解,进而抑制NF-κB信号的激活

关键词： foxn3 hnRNPU NF-κB 急性肺损伤

foxn3通过调控滋养细胞功能参与早发型子痫前期发病机制研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

FOXN3通过调控滋养细胞功能参与早发型子痫前期发病机制研究

作者：支盼华中科技大学

学位级别：硕士

目的:早发型子痫前期(Early-onset preeclampsia,EO-PE)发病主要源于子宫螺旋动脉重塑缺陷所导致的胎盘灌注不良。但其具体发病机制尚不明确。本研究对基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中子痫前期(Preeclampsia,PE)胎... 详细信息

目的:早发型子痫前期(Early-onset preeclampsia,EO-PE)发病主要源于子宫螺旋动脉重塑缺陷所导致的胎盘灌注不良。但其具体发病机制尚不明确。本研究对基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中子痫前期(Preeclampsia,PE)胎盘基因集进行生物信息学分析,探寻差异基因(Differentially expressed genes,DEGs),并探究DEGs在PE发病机制中的作用。根据筛选的基因,检测其在正常妊娠和EO-PE孕妇胎盘组织中的表达水平,探讨其是否与EO-PE发病相关;研究其对滋养细胞生物学功能的影响及对下游分子的调控,进一步探究其参与EO-PE发病的机制。方法:1.检索GEO数据库中PE胎盘的三个基因集,比较DEGs并对DEGs进行生物信息学分析。2.收集EO-PE组和正常妊娠(Normal pregnancy,NP)组胎盘组织,通过免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法(Western blotting,WB)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测筛选的基因在EO-PE组和NP组胎盘组织中的蛋白和m RNA表达水平。3.构建其过表达和敲低其表达的滋养细胞模型,然后分别通过CCK-8法(Cell Counting Kit-8)及平板克隆实验、Transwell migration实验、Transwell invasion实验检测细胞增殖、迁移、侵袭能力,并通过WB检测其对下游分子表达的影响及下游分子在EO-PE组和NP组胎盘组织中的表达水平。结果:***主要在翻译后蛋白质修饰、蛋白结合、细胞增殖及生长调节等过程及黏附连接等通路富集;foxn3在PE胎盘组织中表达上调。2.共收集EO-PE组和NP组胎盘组织30例。foxn3主要表达定位于胎盘滋养细胞;EO-PE组胎盘组织中foxn3的m RNA和蛋白表达水平明显高于NP组。3.应用质粒成功转染HTR-8/SVneo细胞后,与pc DNA组相比,foxn3组细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显减弱;应用si RNA成功转染HTR-8/SVneo细胞后,与si-NC组相比,si-foxn3组细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显增强。4.应用质粒成功转染HTR-8/SVneo细胞后,foxn3组细胞中AKT蛋白磷酸化水平明显低于pc DNA组;应用si RNA成功转染HTR-8/SVneo细胞后,si-foxn3组细胞中AKT蛋白磷酸化水平明显高于si-NC组。与NP组相比,EO-PE组胎盘组织中AKT蛋白磷酸化水平明显降低。结论:本研究发现在EO-PE胎盘组织中foxn3表达上调,可能通过抑制AKT蛋白的磷酸化,继而抑制滋养细胞的生物学功能并影响子宫螺旋动脉重塑,进而影响胎盘灌流,从而参与EO-PE的发生发展。

关键词：早发型子痫前期滋养细胞 foxn3

foxn3在胰腺癌中的表达差异及其与预后相关研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

FOXN3在胰腺癌中的表达差异及其与预后相关研究

作者：俞伟蚌埠医学院

学位级别：硕士

目的:胰腺癌恶性程度高,预后差,相关的保守治疗效果有限。本文旨在通过生信分析和免疫组化染色实验分析foxn3(Fork head N3)在胰腺癌中的表达差异和预后关系。方法:收集浙江省人民医院2015年5月至2022年12月进行胰腺手术并经病理证实为... 详细信息

目的:胰腺癌恶性程度高,预后差,相关的保守治疗效果有限。本文旨在通过生信分析和免疫组化染色实验分析foxn3(Fork head N3)在胰腺癌中的表达差异和预后关系。方法:收集浙江省人民医院2015年5月至2022年12月进行胰腺手术并经病理证实为胰腺腺癌的患者标本,采集患者的癌和癌旁组织进行免疫组化实验,检测foxn3在胰腺癌组织中的表达。对患者进行随访,分析总生存期和无进展生存期。采用开放数据库TCGA,选取胰腺癌病例,进行生存分析来对比结果。使用R软件,基于TCGA中的胰腺癌病例筛选出foxn3的相关性表达差异基因集并进行GO、KEGG、GSEA分析。在TISIDB网站上,分析foxn3在胰腺癌中与免疫细胞的关系,并分析foxn3与免疫药物治疗靶点的相关性。结果:foxn3在胰腺癌癌组织中表达明显增高,差异有统计学意义(Pfoxn3表达增高的患者总生存期(Pfoxn3表达减少的患者。在线数据库foxn3与胰腺癌的生存分析显示,foxn3表达增高与总生存期无统计学关系(P=0.33>0.05),foxn3表达增高与无进展生存期有统计学意义(P=0.021foxn3与T细胞激活、免疫应答激活细胞表面受体信号通路、淋巴细胞分化、单个核细胞分化、免疫反应调节细胞表面受体信号通路、免疫应答激活信号转导、免疫应答激活、T细胞激活调控、抗原受体介导的信号通路和T细胞分化等有关,KEGG分析提示foxn3与趋化因子信号通路、原发性免疫缺陷、T细胞受体信号通路、细胞粘附分子等有关。GSEA分析显示foxn3与胰腺癌的免疫系统发育、适应性免疫反应、免疫进程的调节相关。TISIDB网站的输出结果表明foxn3与各种免疫细胞显著相关。foxn3与免疫药物靶点PD-1、PD-L1和CTLA4在胰腺癌中的相关性有统计学意义。结论:foxn3在胰腺癌组织中表达增高,并与胰腺癌的预后相关。这些表明foxn3与胰腺癌的进展有关,后续的生信分析提示foxn3作用于胰腺癌的免疫进程,是胰腺癌潜在的治疗靶点。

关键词： foxn3 胰腺癌 TCGA 预后免疫治疗

外周血foxn3-SIN3A复合物表达量与非综合征型唇腭裂相关性研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

外周血FOXN3-SIN3A复合物表达量与非综合征型唇腭裂相关性研究

作者：地丽拜尔·依明江新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:研究foxn3-SIN3A复合物表达量与新疆地区人群非综合征型唇腭裂(non-syndromic cleft lip with or without cleft palate,NSCL/P)的相关性。方法:收集于新疆维吾尔自治区人民医院就诊的NSCL/P患者30例为病例组,其中唇裂伴或不伴腭... 详细信息

目的:研究foxn3-SIN3A复合物表达量与新疆地区人群非综合征型唇腭裂(non-syndromic cleft lip with or without cleft palate,NSCL/P)的相关性。方法:收集于新疆维吾尔自治区人民医院就诊的NSCL/P患者30例为病例组,其中唇裂伴或不伴腭裂15例(CL/P组),单纯腭裂15例(CPO组),对照组为15例健康儿童。采用高通量二代测序技术及定量逆转录PCR(RT-QPCR)检测各组外周血中foxn3、SIN3A和NEAT1的表达量。采用受试者工作特征(ROC)曲线和曲线下面积(AUC)分析其对NSCL/P的诊断效能。结果:除了CPO组SIN3A基因表达较对照组没有统计学意义外(P>0.05),其余NSCL/P患者foxn3,SIN3A,NEAT1基因表达较对照组均上升,差异均有统计学意义(Pfoxn3,SIN3A,NEAT1的AUC分别为0.902,95%CI=(0.774,1.000)、0.822,95%CI=(0.661,984)、1.000,95%CI=(1.000,1.000);CPO组foxn3,SIN3A,NEAT1的AUC分别为0.880,95%CI=(0.743,1.000)、0.636,95%CI=(0.424,0.847)、1.000,95%CI=(1.000,1.000)。结论:外周血foxn3、SIN3A、NEAT1表达上升可能与新疆地区NSCL/P的发生存在相关性,其可能可以成为诊断妊娠期妇女NSCL/P胎儿的潜在生物标记物,且诊断效能良好。

关键词：非综合征型唇腭裂 foxn3 SIN3A NEAT1 生物标记物

foxn3在急性髓系白血病中的表达及其临床意义的探讨

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

FOXN3在急性髓系白血病中的表达及其临床意义的探讨

作者：何航中国医科大学

学位级别：硕士

目的:急性白血病是起源于造血干祖细胞的恶性血液系统肿瘤,拥有较高的病死率。依据急性白血病的分型诊断标准(简称FAB分型)来讲,以当今社会的医疗水平,仅有急性早幼粒细胞型白血病(Acute Promyelocytic Leukemia,APL)能够通过三氧化二... 详细信息

目的:急性白血病是起源于造血干祖细胞的恶性血液系统肿瘤,拥有较高的病死率。依据急性白血病的分型诊断标准(简称FAB分型)来讲,以当今社会的医疗水平,仅有急性早幼粒细胞型白血病(Acute Promyelocytic Leukemia,APL)能够通过三氧化二砷与维甲酸双诱导治疗的方法能够达到临床治愈,其余类型白血病除外骨髓移植结合规范化疗,尚没有治愈的方法。虽然近年来,急性白血病的五年生存率逐年提高,但急性白血病仍旧是儿童和青少年死亡的第一和第二位病因。鉴于该病的恶性程度较高,而且治疗效果较差,医疗界对于急性白血病的病因及其发病机制的深入探索显得尤为迫切。Forkhead(FOX)蛋白家族自被发现起,其能调控多种细胞生物学行为的功能就已被明确,包括细胞的增殖与分化、DNA的损伤和修复以及细胞代谢等。foxn3(Forkhead N3)蛋白是FOX蛋白家族中的一种亚型,该蛋白在肝、肺、肾、骨髓等重要脏器中均有广泛表达。近年来,foxn3蛋白的多种病理生理功能被广泛关注。据报道,foxn3对非洲蟾蜍的颅面和眼睛的生长发育起关键的调控作用,且foxn3的基因失活能够影响小鼠生长发育迟缓和颜面部多个器官的发育缺陷,同时增加小鼠胚胎死亡率以及出生后的致死率。细胞水平上,在酵母中foxn3被首次发现充当检查点抑制因子的角色,能够调控E2F5、PIM2、ZHX1等多种转录因子和癌基因生物学行为,而且foxn3在果蝇睾丸中发现有存在转录激活作用。近年来,在多种恶性肿瘤组织中发现foxn3存在表达失调,但它的具体作用机制仍有待研究。在前期研究中,我科学者采用高分辨率a CGH技术对24例急性髓系白血病M5患者的基因组进行扫描,发现其中有2例患者伴有累及foxn3基因的14号染色体缺失。foxn3在急性白血病患者中的异常表达,我们是否可以假设,foxn3作为抑癌基因在急性白血病中充当着重要的角色?这为我们探讨foxn3在白血病的发生及发展中存在的病理生理功能提供了契机。我们将分别在AML患者和AML细胞系中共同探讨foxn3的表达,以及foxn3促进白血病发病可能存在的机制性研究。方法:1.选取急性髓系白血病患者与正常健康人检查后剩余骨髓标本,通过RT-PCR方法检测foxn3的mRNA表达水平;并探讨foxn3与患者临床病理资料的关系;2.培养急性髓系白血病细胞系,分别提取细胞系RNA与蛋白,通过RT-PCR和Western blot方法验证foxn3表达水平是否与患者中表达水平一致;3.在foxn3表达相对较低的白血病细胞系中转染foxn3过表达病毒,利用CCK-8、流式细胞术,探讨过表达foxn3基因后白血病细胞系的细胞增值、凋亡和细胞周期的变化。结果:***3在AML患者的骨髓和细胞系中的mRNA表达水平均明显减低。体外实验中,foxn3在AML细胞系中的蛋白水平与患者相一致。***3的表达水平与AML患者的预后相关。***-8法检测细胞增殖活性结果示,过表达foxn3基因后,白血病细胞增殖活性减低;PI染色后行流式细胞术检测细胞周期结果示,过表达foxn3基因后,白血病细胞存在周期(S期)阻滞;Annexin-V PE/7-AAD染色后行流式细胞术检测细胞凋亡结果示,过表达foxn3基因后,细胞凋亡率明显增加。结论:foxn3蛋白在急性髓系白血病患者及白血病细胞系中均表达减低,根据该结论我们可以认为,foxn3蛋白可能作为急性髓系白血病的一种新型抑癌基因。foxn3的表达水平与患者的白细胞计数呈负相关性,而高白细胞计数是急性白血病已知危险因素之一,所以foxn3的表达水平可能与白血病患者的预后相关。我们在AML细胞系中通过过表达foxn3基因后发现,foxn3的m RNA及蛋白水平均较前表达增高,同时调控白血病细胞的增殖活性减低,细胞凋亡增多,细胞周期阻滞。结合以上结果,我们可以假设,foxn3转录因子在急性髓系白血病中可能作为一种新型抑癌基因,调控白血病的发生发展。

关键词：急性髓系白血病 foxn3 细胞周期预后

E3泛素连接酶β-Trcp介导的foxn3泛素化降解促进肺癌放疗抵抗的作用机制研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

E3泛素连接酶β-Trcp介导的FOXN3泛素化降解促进肺癌放疗抵抗的作...

作者：李旭东华中科技大学

学位级别：硕士

目的:对于局部晚期不能手术切除的肺癌患者,放射治疗是其根治性治疗手段,而放疗抵抗是导致肺癌放射治疗失败的主要因素。因此,鉴定肺癌放疗抵抗新的分子靶标并阐明其分子机制具有重要的理论意义和科学价值。foxn3(Fork head Box N3)是F... 详细信息

目的:对于局部晚期不能手术切除的肺癌患者,放射治疗是其根治性治疗手段,而放疗抵抗是导致肺癌放射治疗失败的主要因素。因此,鉴定肺癌放疗抵抗新的分子靶标并阐明其分子机制具有重要的理论意义和科学价值。foxn3(Fork head Box N3)是foxn家族的一个重要成员,与多种恶性肿瘤的发生发展相关,但其在肺癌放疗抵抗中的作用尚不明确。本研究拟探讨转录因子foxn3在肺癌放疗抵抗中的作用及调控机制。方法:(1)通过GEO,TCGA以及Oncomine数据库预测foxn3在肺癌与癌旁组织中的m RNA表达情况。(2)肺癌组织芯片验证foxn3在肺癌与癌旁组织中的蛋白表达水平。(3)利用si RNA技术靶向沉默foxn3,通过中性彗星实验,γ-H2AX和Rad51焦点形成及克隆形成实验检测foxn3对肺癌细胞放射敏感性的影响。(4)利用sh RNA技术敲低foxn3,通过体内裸鼠移植瘤实验明确foxn3对肺癌放射敏感性的影响。(5)通过串联亲和纯化(TAP)和蛋白质谱技术筛选β-Trcp相互作用的蛋白。(6)应用免疫共沉淀、GST-pulldown实验检测foxn3与β-Trcp在体内外的相互作用。(7)体内泛素化以及半衰期实验检测β-Trcp是否介导foxn3的泛素化降解。(8)应用免疫共沉淀方法筛选出foxn3上游蛋白激酶RSK2,并验证二者相互作用。(9)体内泛素化以及半衰期实验检测RSK2是否调控foxn3的蛋白稳定性。(10)应用定点突变技术突变foxn3氨基酸序列上保守的β-Trcp结合基序,检测β-Trcp是否通过该结合基序与foxn3相互作用并促进foxn3的泛素化降解。(11)构建foxn3的si RNA抵抗的野生型与突变体质粒,通过挽救实验明确β-Trcp介导的foxn3泛素化降解对肺癌放疗敏感性的影响。结果:(1)GEO,TCGA以及Oncomine数据库预测结果提示在肺癌中foxn3的m RNA水平呈低表达。(2)肺癌组织芯片结果证实与癌旁组织相比,肺癌组织中的foxn3蛋白水平也是低表达且与预后不良相关。(3)体外沉默foxn3后,肺癌细胞彗星尾矩变短,γ-H2AX焦点数目减少,Rad51焦点数目增多,克隆形成能力增强,说明敲低foxn3可减少肺癌细胞放疗后DNA损伤,促进DNA修复,对放疗更加抵抗。(4)体内敲低foxn3后对裸鼠移植瘤进行局部X线照射,敲低foxn3组移植瘤生长速度变快,提示敲低foxn3后肺癌放疗敏感性降低。(5)质谱结果显示foxn3是β-Trcp的候选结合蛋白。(6)免疫共沉淀发现foxn3可以与β-Trcp结合,GST-pulldown实验表明原核表达的GSTfoxn3与外源β-Trcp在体外能直接结合。(7)β-Trcp能够促进foxn3泛素化降解,沉默β-Trcp后foxn3半衰期明显延长。(8)蛋白激酶RSK2可以结合转录因子foxn3。(9)敲低RSK2后foxn3泛素化水平降低,半衰期延长,蛋白稳定性增强。(10)foxn3氨基酸序列上的DSGXXS基序介导其与β-Trcp的相互作用及泛素化修饰。(11)挽救实验证实在肺癌细胞中β-Trcp和RSK2介导的foxn3泛素化降解促进了DNA的损伤修复,导致其对放疗抵抗。结论:foxn3在肺癌中低表达且与预后负相关,敲低foxn3后可抑制DNA损伤,促进DNA修复,在体内外降低肺癌的放疗敏感性。E3泛素连接酶β-Trcp和RSK2可协同诱导foxn3的泛素化降解,导致其在肺癌中蛋白表达下调,最终促进肺癌放疗抵抗。因此,本研究首次揭示了foxn3在肺癌放疗抵抗中的作用及上游的调控机制,并为肺癌放射增敏提供新的理论依据。

关键词：肺癌放疗抵抗泛素-蛋白酶体系统 foxn3 β-Trcp

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

过表达foxn3对食管癌细胞生物学的影响

现代消化及介入诊疗 2020年第12期25卷 1614-1618页

作者：李军胡涛周东生王青涛魏冬湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院胸心外科 441000

目的探讨过表达叉头框蛋白N3(foxn3)对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法通过RT-qPCR实验检测正常食管上皮细胞HEEC、食管癌细胞Eca-109、KYSE-30、TE-1中foxn3的表达水平,选取表达量最低的Eca-109细胞用于后续实验,通过Lip... 详细信息

目的探讨过表达叉头框蛋白N3(foxn3)对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法通过RT-qPCR实验检测正常食管上皮细胞HEEC、食管癌细胞Eca-109、KYSE-30、TE-1中foxn3的表达水平,选取表达量最低的Eca-109细胞用于后续实验,通过Lipofectamine2000将pcDNA3.1-foxn3、pcDNA3.1转染食管癌细胞Eca-109,作为foxn3过表达组和空载体对照组,对照组细胞不做处理。通过CCK8检测各组细胞增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡及细胞周期,Transwell检测各组细胞侵袭水平,细胞划痕实验检测各组细胞迁移水平,Western blot检测各组细胞cleaved-Caspase-3、Ki-67、MMP-2、Wnt1和β-catenin蛋白表达水平。结果foxn3在食管癌细胞中低表达(Pfoxn3使食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力减弱,相关蛋白Ki-67、MMP-2表达显著下降(P3显著升高(Pfoxn3能够抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭,并促细胞凋亡,其机制可能与过表达foxn3抑制Wnt信号通路有关。

关键词： foxn3 食管癌增殖迁移侵袭凋亡

miR-32-5p靶向foxn3调控EMT通路影响子宫内膜癌细胞迁移和侵袭

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分子诊断与治疗杂志 2021年第6期13卷 947-951页

作者：董艳杜安飞辛本勤曹佳伟日照市妇幼保健院检验科山东日照276800 日照市莒县中医医院检验科山东日照276800 日照市中心血站山东日照276800 青岛市胸科医院检验科山东青岛266000

目的研究miR-32-5p对子宫内膜癌细胞迁移和侵袭的影响和潜在机制。方法以人正常子宫内膜上皮细胞h EEC为对照,qRT-PCR和Western blot检测子宫内膜癌细胞系Ishikawa、HEC-1A和JEC中miR-32-5p和foxn3的表达;在Ishikawa细胞中高表达foxn3... 详细信息

目的研究miR-32-5p对子宫内膜癌细胞迁移和侵袭的影响和潜在机制。方法以人正常子宫内膜上皮细胞h EEC为对照,qRT-PCR和Western blot检测子宫内膜癌细胞系Ishikawa、HEC-1A和JEC中miR-32-5p和foxn3的表达;在Ishikawa细胞中高表达foxn3和敲减miR-32-5p,Western blot检测foxn3、E-Cadherin、N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告系统验证miR-32-5p和foxn3的关系。结果与hEEC相比,子宫内膜癌细胞系Ishikawa、HEC-1A和JEC组细胞中miR-32-5p表达量均显著升高(Pfoxn3的mRNA和蛋白表达量均显著下降(P32-5p表达后Ishikawa细胞迁移数量、和侵袭数量以及N-Cadherin、Vimentin蛋白表达显著降低(Pfoxn3后Ishikawa细胞迁移数量和侵袭数量以及N-Cadherin、Vimentin蛋白表达显著降低(P32-5p靶向负向调控foxn3的表达。敲减foxn3部分逆转了抑制miR-32-5p表达对Ishikawa细胞迁移、侵袭以及E-Cadherin、N-Cadherin和Vimentin蛋白表达的影响。结论 miR-32-5p靶向foxn3可能通过EMT通路调控子宫内膜癌细胞迁移和侵袭。miR-32-5p是子宫内膜癌的潜在分子靶点。

关键词：子宫内膜癌 miR-32-5p foxn3 EMT信号通路