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含黄素单氧化酶3(fmo3)结构、功能及其基因多态性的研究进展

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中国药理学通报 2008年第10期24卷 1261-1264页

作者：陈豪谭志荣周宏灏中南大学临床药理研究所湖南长沙410078

含黄素单氧化酶3(flavin-containing monooxygenase 3,fmo3)是一种重要的肝微粒体酶,参与体内大量药物、外源性物质和其他一些化学物质的氧化代谢。fmo3基因存在多态性,其中的一些基因突变可以引起酶活性改变,从而改变底物的代谢。体内... 详细信息

含黄素单氧化酶3(flavin-containing monooxygenase 3,fmo3)是一种重要的肝微粒体酶,参与体内大量药物、外源性物质和其他一些化学物质的氧化代谢。fmo3基因存在多态性,其中的一些基因突变可以引起酶活性改变,从而改变底物的代谢。体内外许多研究证明fmo3有明显的个体差异和种族差异,因此,fmo3的遗传变异在药物研制和个体化治疗中将起着重要的作用。该文就fmo3结构、功能及其基因多态性与药物代谢和疾病的关系进行综述。

关键词： fmo3 基因多态性药物代谢个体化治疗

NELL1和fmo3基因mRNA在绵羊肝脏与脂肪组织中的表达

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西北农业学报 2017年第6期26卷 805-811页

作者：田崇奇周世卫王小芳田春丽代丽霞曾洁王小龙杨雨鑫张恩平陈玉林寇启芳西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100

旨在探究不同营养水平及不同生长阶段脂尾型绵羊NELL1和fmo3基因mRNA的组织特异性表达模式。选择健康、体质量相近的9月龄滩羊、同羊、哈萨克羊和西藏羊(羯羊)各3只,活体采集尾部脂肪样品。选择健康4月龄滩羊112只随机分为4组,公母各半... 详细信息

旨在探究不同营养水平及不同生长阶段脂尾型绵羊NELL1和fmo3基因mRNA的组织特异性表达模式。选择健康、体质量相近的9月龄滩羊、同羊、哈萨克羊和西藏羊(羯羊)各3只,活体采集尾部脂肪样品。选择健康4月龄滩羊112只随机分为4组,公母各半,每组4个重复,每个重复7只羊。根据体质量增加目标分为3个阶段:22~28kg,28~35kg,35~40kg,每个阶段各组分别饲喂不同营养水平的日粮。每个生长阶段结束时采集肝脏、肾周脂肪、尾脂、皮下脂肪的组织样品,提取样品总RNA,采用实时荧光定量PCR的方法分析NELL1和fmo3 mRNA的表达差异。结果表明,fmo3 mRNA在哈萨克羊尾脂中的表达量最高,在同羊、滩羊、西藏羊尾脂中依次下降,且差异显著;NELL1 mRNA在西藏羊尾脂中的表达量最高,在滩羊、同羊、哈萨克羊中的表达量依次下降;营养水平和月龄对尾脂和肝脏中NELL1和fmo3 mRNA的表达水平有显著影响,而对皮下脂肪和肾周脂肪中NELL1和fmo3 mRNA的表达影响不显著。表明fmo3mRNA的表达水平与脂肪沉积呈正相关,而NELL1 mRNA的表达水平与脂肪沉积呈负相关;NELL1与fmo3对绵羊尾脂和肝脏中的脂肪沉积起调控作用,为进一步揭示脂尾型绵羊体内脂肪沉积的调控机制提供理论基础。

关键词：绵羊 NELL1 fmo3 基因表达营养水平生长阶段

中国11个地方鸡种中鱼腥味敏感基因fmo3基因型频率分布研究

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畜牧兽医学报 2010年第11期41卷 1497-1501页

作者：王晓亮徐桂云郑江霞姚俊峰曲鲁江杨宁中国农业大学动物科技学院畜禽育种国家工程实验室北京100193

本试验旨在研究影响鸡蛋鱼腥味的fmo3基因T329S突变在11个中国地方鸡种中的分布。所选的11个地方鸡种包括:北京油鸡、河北柴鸡、固始鸡、溧阳鸡、如皋鸡、太湖鸡、淮南麻黄鸡、丝羽乌骨鸡、东乡绿壳蛋鸡、文昌鸡、藏鸡,采用PRC-RFLP方法... 详细信息

本试验旨在研究影响鸡蛋鱼腥味的fmo3基因T329S突变在11个中国地方鸡种中的分布。所选的11个地方鸡种包括:北京油鸡、河北柴鸡、固始鸡、溧阳鸡、如皋鸡、太湖鸡、淮南麻黄鸡、丝羽乌骨鸡、东乡绿壳蛋鸡、文昌鸡、藏鸡,采用PRC-RFLP方法对fmo3基因及基因型频率进行检测。试验结果表明东乡绿壳蛋鸡全部表现为TT基因型,不表现鱼腥味综合症,具有较好的蛋品质;而其他10个地方鸡种中均有SS基因型的鱼腥味综合症易感个体,其中北京油鸡SS基因型频率最高,为8.8%,藏鸡的SS基因型频率最低,为0.7%。地方鸡种中鱼腥味综合症易感基因型频率都不高,可以通过PCR-RFLP的方法予以剔除。

关键词：鱼腥味中国地方鸡种 fmo3 PCR-RFLP

fmo3通过抑制STAT3活性促进肝癌细胞发生铁死亡的研究

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FMO3通过抑制STAT3活性促进肝癌细胞发生铁死亡的研究

作者：何艳影广州大学

学位级别：硕士

肝细胞肝癌是恶性程度最高的肿瘤之一,其高发病率和高复发率一直困扰着该领域的专家。抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞死亡是肿瘤治疗的关键措施。铁死亡作为一种新型的细胞死亡方式,逐渐成为研究肝癌发病机理及治疗不敏感的热点。作为主要... 详细信息

肝细胞肝癌是恶性程度最高的肿瘤之一,其高发病率和高复发率一直困扰着该领域的专家。抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞死亡是肿瘤治疗的关键措施。铁死亡作为一种新型的细胞死亡方式,逐渐成为研究肝癌发病机理及治疗不敏感的热点。作为主要代谢性器官,肝脏以高表达代谢酶为其重要分子特征。其中fmo3是一种很重要的肝微粒体酶,参与药物和其他一些化学物质的氧化代谢过程。值得注意的是,在肝癌细胞中,fmo3的表达量通常降低。因此,我们有望通过深入研究fmo3在肝癌细胞中的功能及机制,为提升肝癌的靶向治疗和免疫治疗效果提供新的视角和策略。本研究初步发现,敲低fmo3基因的肝癌细胞可以显著抑制铁死亡的发生。值得注意的是,补充fmo3的代谢物TMAO可以有效地逆转这一现象。利用q RT-PCR和Western Blot实验分析铁死亡相关基因的表达水平,结果显示缺失fmo3能够显著上调GPX4和SLC7A11基因的转录水平,SLC7A11/GSH/GPX4轴是典型的铁死亡防御通路。为了深入探索这一机制,我们通过免疫共沉淀-质谱检测(IP-MS)和免疫共沉淀(CO-IP)实验,发现fmo3与STAT3之间存在相互作用。鉴于靶向STAT3信号通路已成为多种癌症治疗的潜在靶点,我们进一步通过HA磁珠下拉实验(pull down assay)和免疫荧光实验探索fmo3的作用机制。实验结果表明fmo3可能通过其代谢物TMAO来抑制STAT3的活性,进而触发铁死亡。此外,染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,Ch IP)实验揭示了在肝癌细胞中,缺失fmo3会导致H3K27ac组蛋白修饰水平上升,并增强对GPX4/SLC7A11等基因的转录调控。最后,我们构建了小鼠原位肝肿瘤模型,观察到缺失fmo3的小鼠原位肝肿瘤显著增大,并且肿瘤微环境中髓系来源的抑制性细胞含量明显增加。从机制层面深入剖析,fmo3的代谢物TMAO或能够与STAT3结合,从而有效抑制其二聚化过程及核转位行为,从而触发表观遗传的重塑。这一作用机制直接导致了铁死亡防御基因SLC7A11和GPX4的表达水平显著降低,最终推动肝癌细胞逐渐走向铁死亡,进而对肝肿瘤的形成产生明显的抑制作用。这些发现不仅深化了我们对fmo3在肝癌中作用的认识,更为开发新型肝癌治疗策略提供了宝贵线索。

关键词： fmo3 TMAO 铁死亡肝细胞肝癌 STAT3二聚化

fmo3过表达模拟热量限制抗肝脏衰老的作用及作用机制

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FMO3过表达模拟热量限制抗肝脏衰老的作用及作用机制

作者：郭东豪上海交通大学

学位级别：硕士

目的:肝脏fmo3在40%热量限制抗衰老模型中表达显著增加,但fmo3对衰老进程的作用与作用机制尚不清楚。该研究通过观察过表达fmo3和抑制自噬等方法对机体造成的改变,探究肝脏fmo3在抗肝脏衰老中的作用及作用机制。内容:通过观察40%热量限... 详细信息

目的:肝脏fmo3在40%热量限制抗衰老模型中表达显著增加,但fmo3对衰老进程的作用与作用机制尚不清楚。该研究通过观察过表达fmo3和抑制自噬等方法对机体造成的改变,探究肝脏fmo3在抗肝脏衰老中的作用及作用机制。内容:通过观察40%热量限制对小鼠的影响,探究热量限制对肝脏衰老相关指标、自噬相关指标、及肝脏fmo3表达的影响。通过注射腺病毒激活肝脏的fmo3表达,探究fmo3过表达对肝脏衰老相关指标的影响及其与热量限制的协同作用,并进一步探究fmo3过表达对自噬及自噬相关通路的影响。对fmo3过表达组的小鼠注射自噬抑制剂,观察抑制自噬是否能阻断fmo3激活对小鼠肝脏的抗衰老作用,探究自噬是否是fmo3抗肝脏衰老的作用机制。方法:通过尾静脉注射腺病毒Adeno-fmo3过表达肝脏fmo3表达;通过腹腔注射bafilomycin A1抑制自噬;运用相应的试剂盒检测血浆和肝脏的脂代谢相关指标TC、TG,以及肝脏组织氧化应激相关指标MDA、SOD等;运用ELISA的方法检测血浆中糖代谢相关指标胰岛素、炎症相关指标IL-6;运用蛋白质印迹法检测肝脏衰老相关指标β-gal、p16,自噬相关指标LC3、p62,及mTOR通路相关蛋白;通过油红染色检测肝脏脂质沉积变化;通过电镜观察反映自噬水平的自噬小体。结果:fmo3过表达能模拟热量限制的作用,缓解肝脏衰老,改善小鼠肝脏氧化应激、炎症反应和脂质代谢情况,且能够抑制mTOR通路,激活自噬,而抑制自噬能够减弱fmo3过表达对老年小鼠肝脏的抗肝脏衰老作用。结论:fmo3过表达能模拟热量限制对老年小鼠肝脏的抗衰老作用,且fmo3过表达通过激活mTOR介导的自噬,从而延缓肝脏衰老进程。

关键词：衰老 fmo3 热量限制自噬 mTOR

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安徽部分地方禽种fmo3基因频率分布研究

中国家禽 2014年第5期36卷 11-13页

作者：刘伟詹凯李俊营刘盛南安徽省农业科学院畜牧兽医研究所安徽合肥230031

本试验主要研究鱼腥味基因(fmo3)T329S突变位点在安徽省4个地方鸡种和2个地方鸭种中的等位基因频率及基因型频率分布情况。采用PCR-RFLP方法对黄山黑鸡、淮南麻黄鸡、皖南三黄鸡、五华鸡和巢湖鸭、枞阳媒鸭等地方群体进行了检测。结果表... 详细信息

本试验主要研究鱼腥味基因(fmo3)T329S突变位点在安徽省4个地方鸡种和2个地方鸭种中的等位基因频率及基因型频率分布情况。采用PCR-RFLP方法对黄山黑鸡、淮南麻黄鸡、皖南三黄鸡、五华鸡和巢湖鸭、枞阳媒鸭等地方群体进行了检测。结果表明4个安徽地方鸡种均存在鱼腥味综合征易感基因型(SS)个体,其中皖南三黄鸡SS基因型频率最高,为6.6%,淮南麻黄鸡次之,为4.4%,黄山黑鸡和五华鸡最低,为1.6%,该基因型频率不高,可以通过分子辅助选择技术予以剔除。对2个安徽地方鸭种的研究表明鸭fmo3基因序列与鸡非常相似,SS基因型频率较低,巢湖鸭和枞阳媒鸭分别为4.3%和7.1%,其余为TS型,未检测到TT型。该突变位点对鸭蛋风味的影响需要进一步深入研究。

关键词：安徽地方禽类 fmo3 基因频率分布

电针对动脉粥样硬化兔肝脏中fmo3表达的影响

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电针对动脉粥样硬化兔肝脏中FMO3表达的影响

作者：崔晨辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过观察电针对动脉粥样硬化兔肝脏中fmo3基因和蛋白表达的影响,探讨针刺治疗动脉粥样硬化的作用机理,为针刺抗动脉粥样硬化及心血管疾病提供科学的实验依据。方法:购入32只雄性新西兰大耳白兔,适应性喂养1周后,随机分3组,空白组(7... 详细信息

目的:通过观察电针对动脉粥样硬化兔肝脏中fmo3基因和蛋白表达的影响,探讨针刺治疗动脉粥样硬化的作用机理,为针刺抗动脉粥样硬化及心血管疾病提供科学的实验依据。方法:购入32只雄性新西兰大耳白兔,适应性喂养1周后,随机分3组,空白组(7只),电针预处理组(6只),造模组(19只)。空白组以常规兔饲料喂养,不予任何干预;造模组高脂喂养4周后行球囊损伤术,术后继续高脂喂养,4周后随机从空白组和造模组中各取1只兔处死做颈动脉病理切片,采用HE染色法观察兔颈动脉粥样硬化斑块病理变化以确定造模是否成功。模型复制成功后,将造模组随机分为模型组、阳性药物组和电针组,每组6只。模型组继续高脂喂养,不加干预;阳性药物组在饲料中给予阿托伐他汀钙片(1mg/kg),每日1次,治疗4周;电针组取内关(双侧)、关元、足三里(双侧)进行电针干预,20min/次,1次/d,治疗4周;电针预处理组适应性喂养1周后选取与电针组相同穴位,对正常兔电针刺激3周,采用与模型组相同的方法复制动脉粥样硬化模型,造模成功后电针治疗4周。治疗结束后,在兔心脏采血,之后注射空气针处死,取颈总动脉及新鲜肝脏组织备用。检测各组兔血脂TC/TG/LDL/HDL水平;采用HE染色法观察动脉粥样硬化斑块病理形态变化;采用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测兔肝脏中fmo3基因和蛋白的表达水平。结果:***染色结果与空白组比较,模型组动脉内膜层粗糙,受损严重,可见明显粥样斑块形成及大量泡沫细胞存在,斑块面积大,脂质沉积多;与模型组比较,药物组、电针组和预处理组粥样斑块面积明显减小,说明阳性药物组、电针组及电针预处理组有明显的疗效;预处理组与电针组相比,情况较相近。2.血脂水平与空白组比较,模型组兔血清中TC、TG、LDL水平明显上升,HDL水平明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。3.肝脏中fmo3基因的表达与空白组相比,模型组兔肝脏中fmo3基因表达水平明显高于空白组(Pfmo3基因的表达均明显降低(P0.05)。4.肝脏中fmo3蛋白的表达与空白组比较,模型组兔肝脏中fmo3蛋白表达水平显著提高(Pfmo3蛋白的表达水平均显著降低(P0.05)。结论:1.电针关元、内关、足三里穴能有效减少家兔动脉粥样硬化斑块的形成。2.电针关元、内关、足三里穴能有效调节动脉粥样硬化兔血脂水平,减缓动脉粥样硬化的发生。3.电针关元、内关、足三里穴能有效降低动脉粥样硬化兔肝脏中fmo3基因和蛋白的表达水平,这可能是针刺抗动脉粥样硬化的作用机理之一。4从长远疗效来看,电针在治疗动脉粥样硬化方面效果要优于西药组。

关键词：动脉粥样硬化血脂电针肝脏 fmo3

NELL1和fmo3基因在绵羊尾脂、皮下脂、肾周脂和肝脏中转录水平表达的研究

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NELL1和FMO3基因在绵羊尾脂、皮下脂、肾周脂和肝脏中转录水平表...

作者：田崇奇西北农林科技大学

学位级别：硕士

绵羊脂肪沉积的部位和沉积方式显著影响羊肉品质和养羊效益。因此,揭示功能基因、日粮及生长阶段对绵羊脂肪沉积的影响,对改良绵羊肉品质具有重要意义。研究选取了脂肪代谢相关功能基因NELL1和fmo3,比较其在不同尾型绵羊品种(哈萨克羊... 详细信息

绵羊脂肪沉积的部位和沉积方式显著影响羊肉品质和养羊效益。因此,揭示功能基因、日粮及生长阶段对绵羊脂肪沉积的影响,对改良绵羊肉品质具有重要意义。研究选取了脂肪代谢相关功能基因NELL1和fmo3,比较其在不同尾型绵羊品种(哈萨克羊、滩羊、同羊、西藏羊)尾部脂肪组织中的表达差异;探讨营养水平及生长阶段对其在滩羊脂肪组织中表达的影响,旨在揭示不同营养水平及不同生长阶段脂尾型绵羊NELL1和fmo3基因表达的组织特异性及其表达模式,为脂尾型绵羊体内脂肪沉积的营养调控提供理论依据。试验一:不同品种绵羊尾脂中NELL1和fmo3 mRNA表达差异分析选择健康、体重相近的9月龄滩羊、同羊、哈萨克羊和西藏羊羯羊各3只,采集尾部脂肪组织,利用实时荧光定量PCR技术,检测NELL1和fmo3 mRNA表达,结果如下:***3mRNA在哈萨克羊尾脂中表达量最高(Pfmo3 mRNA表达的影响选择健康4月龄滩羊112只随机分为4组,公母各半,每组四个重复,每个重复7只羊。试验根据增重目标分为3个阶段:第一阶段(228kg),第二阶段(285kg),第三阶段(350kg),每个阶段各组分别饲喂不同营养水平的日粮,由低到高分为T1、T2、T3、T4组。每个生长阶段结束时采集肝脏、肾周脂肪、尾脂、皮下脂肪的组织样品,提取样品总RNA,采用实时荧光定量PCR的方法分析NELL1和fmo3 mRNA的表达差异。结果如下:***1 mRNA在尾脂中的表达,第1阶段以T4组为最高(P3阶段,也都是以T4组表达量最高(P3组表达量略有波动。***1 mRNA在皮下脂中的表达。第1阶段和第2阶段四个营养水平组间表达差异不显著(P>0.05);第3阶段,T4组表达量最高(P3、T1组。相同营养水平下,NELL1 mRNA在第1阶段表达量最高(P0.05);在相同营养水平下,不同生长阶段间表现出表达差异显著(P3、T1、T2组;第3阶段,表达以T1组为最高(P3、T4组。3个阶段表达依次升高,其中第3阶段表达量最高(P3 mRNA的表达。尾部脂肪组织中最高表达均出现在T2组;在第1阶段、第2阶段和第3阶段,T1、T2、T3、T4组中表达量均呈现先升高再降低的趋势;皮下脂肪组织T3组最高,肾周脂最高表达出现在T1组,肝脏的最高表达出现在第T4组,最高表达组与相同阶段时的最低表达组相比差异显著的(Pfmo3mRNA在滩羊不同组织中的表达差异分析在试验第三阶段结束当天,选取T2组4只滩羊进行屠宰,采集肝脏、肾周脂肪、尾脂、皮下脂肪组织,利用实时荧光定量PCR技术,检测NELL1、fmo3mRNA的相对表达量,结果如下:***1 mRNA在滩羊尾部脂肪组织、皮下脂肪组织、肾周脂肪组织、肝脏中均有表达。NELL1在肝脏组织中表达最高,显著高于尾脂、皮下脂和肾周脂(P0.05)。***3 mRNA在滩羊尾部脂肪组织、皮下脂肪组织、肾周脂肪组织、肝脏中均有表达。fmo3在肝脏组织中表达最高,显著高于尾部脂肪组织、皮下脂肪组织和肾周脂肪组织(P0.05)。综合以上试验结果,表明NELL1和fmo3基因在绵羊组织中的表达受到品种、部位、生长阶段、营养水平等原因会有不同的表达结果,其表达差异是与脂肪的沉积差异是存在一定关系。

关键词：绵羊 NELL1 fmo3 表达 mRNA

fmo3调节NEFA介导的犊牛原代肝细胞内质网应激

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饲料博览 2020年第9期30卷 1-6页

作者：邓清华宋景旭刘婷张焱谢志凤刘国文内蒙古民族大学动物科学技术学院内蒙古通辽028000 吉林省松原市前郭县医院长春130062 吉林大学动物医学学院吉林松原138000

内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)与许多代谢性疾病有关,比如胰岛素抵抗、脂肪肝等营养代谢性疾病。脂肪肝是围产期奶牛常见多发的营养代谢性疾病,严重危害着奶牛养殖业的发展。含黄素单加氧酶3(Flavin containing monooxy... 详细信息

内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)与许多代谢性疾病有关,比如胰岛素抵抗、脂肪肝等营养代谢性疾病。脂肪肝是围产期奶牛常见多发的营养代谢性疾病,严重危害着奶牛养殖业的发展。含黄素单加氧酶3(Flavin containing monooxygenase,fmo3)是近年来发现的与内质网应激有密切联系的调节分子。因此,我们推测fmo3有可能参与调节奶牛的内质网应激过程,从而影响脂质代谢。试验通过体外培养犊牛原代肝细胞感染fmo3过表达和低表达腺病毒载体,检测fmo3过表达和低表达对NEFA介导的犊牛原代肝细胞内质网应激的影响,以明确fmo3对奶牛肝细胞内质网应激的调节作用。结果发现,fmo3过表达腺病毒载体明显增加了NEFA介导的奶牛肝细胞内质网应激相关因子的mRNA表达水平,低表达腺病毒明显降低了NEFA介导的内质网应激相关因子的mRNA表达水平,这为阐明奶牛内质网应激的发病机制提供了一定的理论依据。

关键词： fmo3 脂肪肝内质网应激 NEFA