检索结果-南通市图书馆

生命科学 2017年第10期29卷 1016-1024页

作者：徐玄昊陈晔光清华大学生命科学学院膜生物学国家重点实验室北京100084

在哺乳动物胚胎发育过程中,中内胚层(mesendoderm)也被称为原条(primitive streak),是中胚层和内胚层分化的过渡时期。中内胚层的存在时间较短,但成功的中内胚层分化对随后进行的中胚层与内胚层发育至关重要。发育生物学的研究极大地推... 详细信息

在哺乳动物胚胎发育过程中,中内胚层(mesendoderm)也被称为原条(primitive streak),是中胚层和内胚层分化的过渡时期。中内胚层的存在时间较短,但成功的中内胚层分化对随后进行的中胚层与内胚层发育至关重要。发育生物学的研究极大地推动了人们对胚胎发育的认识,同时,越来越多体外分化系统的建立也加深了对环境信号如何影响胚层分化的理解。近些年来,通过表观遗传的研究,人们逐渐认识到染色体结构与组蛋白修饰的改变也在分化发育过程中起到重要作用。通过胚胎干细胞定向诱导中内胚层分化来探究相关分子机制,不仅有助于对早期胚胎发育的了解,也有助于临床应用与疾病治疗。现总结了TGF-β信号、Wnt信号和fgf信号调控中内胚层分化的研究现状,并概述了这些信号如何与表观修饰共同调控胚胎干细胞向中内胚层分化的进展。

关键词：胚胎干细胞中内胚层 TGF-β信号 Wnt信号 fgf信号表观遗传修饰

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

软骨细胞中成纤维细胞生长因子对长链非编码RNA Malat1的影响

软骨细胞中成纤维细胞生长因子对长链非编码RNA Malat1的影响

引用

作者：郭静远第三军医大学

学位级别：硕士

骨骼是人类最大的器官。骨骼的生长发育是一个复杂的过程,其生长方式主要有两种,即膜内成骨与软骨内成骨。其中软骨内成骨是躯干骨,四肢长骨,以及部分不规则短骨生长的主要方式,膜内成骨则是顶骨,额骨和锁骨等骨骼的主要形成方式。软骨... 详细信息

骨骼是人类最大的器官。骨骼的生长发育是一个复杂的过程,其生长方式主要有两种,即膜内成骨与软骨内成骨。其中软骨内成骨是躯干骨,四肢长骨,以及部分不规则短骨生长的主要方式,膜内成骨则是顶骨,额骨和锁骨等骨骼的主要形成方式。软骨内成骨在胚胎发育过程及长骨形成等方面发挥重要的作用[1],目前公认成纤维细胞生长因子(Fibroblast growth factor,fgf)信号通路在软骨内成骨过程中发挥着重要的调控作用。成纤维细胞生长因子家族由22个成员组成,目前认为fgf2是其中表达最广泛的细胞因子。成纤维细胞生长因子通过与细胞膜上的成纤维细胞生长因子受体(Fibroblast growth factor receptor,fgfR)激活下游多种通路,产生一系列效应。在小鼠模型及人类病例中,fgfR点突变能引起多种类型的侏儒。在软骨细胞中,fgf信号通路能抑制细胞增殖。目前关于fgf信号通路所影响的下游蛋白分子已有很多研究,但在软骨组织中fgf信号通路是否通过影响非编码蛋白RNA从而发挥其对软骨细胞的调控作用,尚没有得到很好的研究。近年来对非编码RNA(non-coding RNA,nc RNA)在胚胎发育,正常生理过程及疾病过程中的作用认识日益加深[5]。非编码RNA不编码成蛋白质,以其它方式发挥作用。长链非编码RNAs(Long non-coding RNAs)是指转录长度超过200个碱基对的nc RNA,在物种间保守性不高,通过多种途径调控基因的表达。Malat1是一个在哺乳动物中高度保守存在的Lnc RNA,最初在关于非小细胞肺癌的筛选性研究中被发现。之后发现几乎所有的肿瘤细胞中Malat1均有高表达,大量肿瘤学研究表明Malat1对多种肿瘤细胞具有促侵袭和促转移作用。Malat1在成骨细胞增殖,骨肉瘤增殖侵袭等方面具有促进作用,这些研究表明在骨骼中,Malat1可能发挥一定的作用,但其在软骨细胞中有无作用尚不清楚,在软骨发育过程中发挥重要作用的fgf信号是否与Malat1有联系目前也不清楚。本实验室在fgf信号通路对软骨的调控方面做了很多研究,积累了良好的基础。关于fgf信号通路所影响的下游蛋白分子已有很多研究,但在软骨组织中fgf信号通路是否通过影响非蛋白类分子,比如Lnc RNAs,从而发挥其对软骨细胞的调控作用,尚不十分清楚。因此我们首先以小鼠原代软骨细胞,小鼠软骨前体细胞系ATDC5,人类正常软骨细胞C28I2作为细胞模型,检测了Malat1在软骨细胞中的基础表达水平,我们的结果表明Malat1在小鼠和人的软骨细胞中均呈现高丰度表达,这样高的基础水平提示Malat1在软骨细胞中可能发挥着重要的生物学功能。因此在本课题中,我们利用小片段干扰RNA技术干扰了Malat1的表达水平,初步研究Malat1对软骨细胞的作用。为了探究fgf信号通路是否调控Malat1的表达,我们进一步利用重组fgf2结合相关通路阻断剂处理小鼠原代软骨细胞,小鼠及人类软骨细胞系模型,探讨了fgf2信号通路是否可以通过调控Malat1的表达调节软骨细胞增殖。主要实验方法:***1在软骨细胞中的基础表达水平1.1分离C57小鼠新生幼崽(日龄3日)原代软骨,接种培养48h后提取RNA,利用q PCR检测Malat1的表达水平。1.2培养小鼠成纤维细胞系NIH3T3,小鼠软骨前体细胞系ATDC5,人正常软骨细胞系C28I2,以及人骨肉瘤细胞系SW1353,24h及48h后提取RNA并检测Malat1的表达水平。***1对ATDC5软骨细胞系增殖的影响2.1设计数条针对小鼠Malat1基因的si RNA并通过荧光指示剂和q PCR筛选出最有效的si RNA。2.2将si RNA转染至ATDC5细胞并通过细胞计数研究Malat1敲减对ATDC5细胞增殖速度的影响。***2对软骨细胞中Malat1表达水平的影响3.1用fgf2处理C57小鼠原代软骨细胞,及ATDC5细胞,在处理后不同时间点提取RNA,q PCR测定Malat1的表达水平,以未处理组作为对照组。3.2用ERK通路抑制剂U0126单独或与fgf2共同处理ATDC5细胞,在处理后24h收取RNA,q PCR检测Malat1的表达水平,以未处理组作为对照组。3.3从本科室保育的β-catenin小鼠中分离原代软骨细胞并培养,48h后收取细胞并提取RNA,q PCR检测Malat1表达水平的变化,以未敲除组作为对照组。3.4从本科室保育的fgfR1 Col2阳性细胞特异性敲除小鼠及fgfR3系统性敲除小鼠中分离原代软骨细胞并培养,48h后收取细胞并提取RNA,q PCR检测Malat1表达水平的变化,以同窝未敲除幼崽作为对照组。3.5设计针对fgfr1的si RNA,并构建和制备My

关键词：软骨细胞长链非编码RNA fgf信号细胞增殖

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：