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fap-α在眼睑皮脂腺癌成纤维细胞中的表达及生物学功能的研究

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FAP-α在眼睑皮脂腺癌成纤维细胞中的表达及生物学功能的研究

作者：刘蓓蓓川北医学院

学位级别：硕士

目的:检测成纤维细胞活化蛋白-α(fap-α)在眼睑皮脂腺癌相关成纤维细胞(CAFs)中的表达情况,初步探讨fap-α对眼睑皮脂腺癌相关成纤维细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响,为研究眼睑皮脂腺癌的发病机制及治疗提供新的思路。方法:1.收集... 详细信息

目的:检测成纤维细胞活化蛋白-α(fap-α)在眼睑皮脂腺癌相关成纤维细胞(CAFs)中的表达情况,初步探讨fap-α对眼睑皮脂腺癌相关成纤维细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响,为研究眼睑皮脂腺癌的发病机制及治疗提供新的思路。方法:1.收集眼睑皮脂腺癌标本,通过原代细胞培养获得眼睑皮脂腺癌CAFs及癌旁成纤维细胞(NFs),倒置相差显微镜观察细胞形态,并应用免疫细胞化学染色法鉴定成纤维细胞。2.采用CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测两种细胞的增殖、迁移和侵袭能力。3.采用RT-qPCR、WB检测fap-α在两种细胞中的表达。4.瞬时转染敲低CAFs中fap-α的表达,用RT-qPCR、WB检测fap-α的表达情况。5.采用CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验对比fap-α敲低组的CAFs与对照组CAFs细胞的增殖、迁移、侵袭能力,采用流式细胞术对比两者的凋亡情况。结果:1.成功收集眼睑皮脂腺癌标本并培养、纯化、鉴定NFs、CAFs,NFs与CAFs中波形蛋白(Vimentin)呈阳性,细胞角蛋白(CK)呈阴性,结合其细胞形态,可鉴定为成纤维细胞。***-8法、细胞划痕实验和Transwell实验结果显示:CAFs的增殖、迁移及侵袭能力均强于NFs,差异具有统计学意义(Pfap-α在CAFs中高表达,差异具有统计学意义(Pfap-α的si RNA后,RT-qPCR、WB实验结果显示:fap-α在CAFs细胞中的表达降低。***-8、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验结果显示:与对照组CAFs相比,fap-α低表达的CAFs细胞增殖、迁移及侵袭能力减弱;流式细胞术结果显示:与对照组CAFs相比,fap-α低表达的CAFs细胞凋亡比例增加。结论:***与CAFs在形态结构、生长增殖、迁移侵袭方面存在明显差异,证实眼睑皮脂腺癌中成纤维细胞发生生物学特性改变。2.检测到fap-α在眼睑皮脂腺癌中高表达,且敲低fap-α后CFAs发生生物学行为改变,证实fap-α参与了眼睑皮脂腺癌的发生发展。***-α在眼睑皮脂腺癌中的高表达可能与眼睑皮脂腺癌的转移、侵袭相关,为眼睑皮脂腺癌的治疗提供新的思路,但具体分子机制还需要进一步研究。

关键词： fap-α 眼睑皮脂腺癌癌相关成纤维细胞

fap-α和MMP-1在乳腺癌新辅助疗中的表达及其临床意义

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FAP-α和MMP-1在乳腺癌新辅助疗中的表达及其临床意义

作者：石敏涛广西医科大学

学位级别：硕士

目的：探讨成纤维细胞激活蛋白α(fap-α)和基质金属蛋白酶-1(MMP-1)在乳腺癌病人新辅化疗前后的表达情况及其临床意义。方法：纳入56例乳腺癌新辅化疗患者,用免疫组织化学染色法检测乳腺癌组织中fap-α、MMP-1蛋白的表达水平,将病人分... 详细信息

目的：探讨成纤维细胞激活蛋白α(fap-α)和基质金属蛋白酶-1(MMP-1)在乳腺癌病人新辅化疗前后的表达情况及其临床意义。方法：纳入56例乳腺癌新辅化疗患者,用免疫组织化学染色法检测乳腺癌组织中fap-α、MMP-1蛋白的表达水平,将病人分为fap-α、MMP-1新辅化疗后表达阴性组和阳性组,比较两组间新辅化疗疗效的差异,并分析两个指标与临床病理之间的相关性。结果：新辅助化疗前后乳腺癌组织中fap-α、MMP-1的阳性表达率及表达变化强度均有显著性差异(Pfap-α、MMP-1新辅化疗后表达阴性组化疗疗效及预后优于阳性组,差异有统计学意义(Pfap-α、MMP-1蛋白表达强度在化疗前后呈正相关(化疗前：r=0.452,P=0.000;化疗后：r=0.403,P=0.002)。并且fap-α、MMP-1高表达与淋巴结转移、Her-2过表达、Ki-67高增殖有相关性。结论：新辅助化疗能够降低乳腺癌组织中fap-α和MMP-1蛋白的表达水平,fap-α和MMP-1蛋白可能作为乳腺癌新辅化疗疗效的预测指标。fap-α和MMP-1具有正相关性,提示二者之间可能在促进肿瘤生长、浸润、转移等方面具有协同作用。同时,fap-α和MMP-1蛋白高表达腋窝淋巴结转移、Her-2过表达及Ki-67高增殖相关,对临床判断病情有一定意义。

关键词：新辅助化疗乳腺癌 fap-α MMP-1 免疫组化

COX-2、fap-α、PTEN、Survivin在乳腺导管内癌中的表达及意义

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COX-2、FAP-α、PTEN、Survivin在乳腺导管内癌中的表达及意义

作者：原丽科广州医科大学

学位级别：硕士

研究目的本研究检测乳腺不典型增生（ADH）、导管内癌（DCIS）、导管内癌伴微浸润（DCIS-MI）、浸润性导管癌（IDC）四组病变组织中COX-2、fap-α、PTEN、Survivin蛋白的表达，旨在探讨以下问题：1.分析COX-2、fap-α、PTEN、Survivin... 详细信息

研究目的本研究检测乳腺不典型增生（ADH）、导管内癌（DCIS）、导管内癌伴微浸润（DCIS-MI）、浸润性导管癌（IDC）四组病变组织中COX-2、fap-α、PTEN、Survivin蛋白的表达，旨在探讨以下问题：1.分析COX-2、fap-α、PTEN、Survivin蛋白在ADH、DCIS、DCIS-MI、IDC四组病变组织中的表达，探讨COX-2、fap-α、PTEN、Survivin在乳腺癌发生发展过程中的意义。2.分析COX-2、fap-α、PTEN、Survivin蛋白表达与乳腺导管内癌患者临床病理学特征之间的关系，建立导管内癌预后风险模型，确立风险值，为预测导管内癌预后提供理论依据。材料与方法1.收集2003年3月—2009年12月在广东省妇幼保健院乳腺中心行手术治疗，经病理确诊并有完整随访资料的导管内癌74例、导管内癌伴微浸润61例，并选取同期连续6个月不典型增生51例、浸润性导管癌77例。采用免疫化学二步法检测四组病变组织中COX-2、fap-α、PTEN及Survivin蛋白的表达。2.采用SPSS19.0统计软件包进行数据分析。采用χ2检验分析ADH、DCIS、DCIS-MI、IDC四组病变组织中COX-2、fap-α、PTEN、Survivin蛋白的表达差异，以及导管内癌组织中COX-2、fap-α、PTEN、Survivin蛋白表达与其临床病理学特征之间的关系;采用多因素Logistic回归分析建立DCIS发生微浸润，以及DCIS或DCIS-MI发生浸润癌的预测风险模型，根据ROC曲线确立风险值。结果***-2、fap-α、PTEN、Survivin蛋白在ADH、DCIS、DCIS-MI、IDC组中的表达COX-2、fap-α、Survivin蛋白在ADH、DCIS、DCIS-MI、IDC四组病变组织中的表达率呈逐渐上升趋势，PTEN蛋白在ADH、DCIS、DCIS-MI、IDC四组病变组织中的表达率呈逐渐下降趋势。ADH组与DCIS组之间COX-2、fap-α、PTEN蛋白表达差异有统计学意义;DCIS组与DCIS-MI组之间fap-α蛋白表达差异有统计学意义;DCIS-MI组与IDC组之间COX-2、fap-α、PTEN、Survivin蛋白表达差异均有统计学意义。***-2、fap-α、PTEN、Survivin蛋白表达与乳腺导管内癌患者临床病理学特征之间的关系COX-2、fap-α、PTEN、Survivin蛋白表达与乳腺导管内癌患者病变范围、核级别、ER、HER-2、Ki-67表达均相关，与发病年龄均无关。此外，COX-2蛋白表达还与导管内癌患者首发症状、淋巴结转移相关，与PR表达无关;fap-α蛋白表达与导管内癌患者首发症状、淋巴结转移、PR表达均相关;PTEN蛋白表达与导管内癌患者首发症状、PR表达相关，与淋巴结转移无关;Survivin蛋白表达与导管内癌患者淋巴结转移相关，与首发症状及PR表达无关。3.乳腺导管内癌预后风险模型的建立及风险值的确立单因素分析DCIS组与DCIS-MI组之间COX-2、fap-α、PTEN、Survivin蛋白及临床病理学指标，将单因素分析有意义的指标带入多因素Logistic回归方程，建立导管内癌发生微浸润的预测模型：Logit（P1）=-3.605+3.769*核级别-1.082*病变范围2.381*fap-α，根据ROC曲线确立最佳诊断截断点为0.5085，即P1≥0.5085时，预测DCIS发生微浸润的风险相对高;P1＜0.5085时，预测DCIS发生微浸润的风险相对低。单因素分析DCIS及DCIS-MI组与IDC组之间COX-2、fap-α、PTEN、Survivin蛋白及临床病理学指标，将单因素分析有意义的指标带入多因素Logistic回归方程，建立导管内癌发生浸润癌的预测模型：Logit（P2）=-5.285+2.127*COX-2+2.362*fap-α+3.405*PTEN+1.398*Survivin+1.127*HER-2，根据ROC曲线确立最佳诊断截断点为0.3743，即P2≥0.3743时，预测DCIS或DCIS-MI发生浸润癌的风险相对高;P2＜0.3743时，预测DCIS或DCIS-MI发生浸润癌的风险相对低。结论1、本实验研究发现，COX-2、fap-α、Survivin蛋白在ADH、DCIS、DCIS-MI、IDC四组病变组织中表达率呈逐渐上升趋势，PTEN蛋白表达率呈逐渐下降趋势，且四种蛋白在DCIS组与DCIS-MI组，或DCIS-MI组与IDC组之间差异有统计学意义，提示COX-

关键词：导管内癌微浸润 COX-2 fap-α PTEN Survivin

fap-α和SDF-1预测新辅助化疗结直肠癌病人预后的研究

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牡丹江医学院学报 2020年第2期41卷 38-41,64页

作者：赵凌昆王新赵云波佳木斯大学临床医学院佳木斯大学附属第一医院黑龙江佳木斯154002

目的观察结直肠肿瘤中fap-α和SDF-1蛋白的表达与新辅助化疗后结直肠癌病人临床病理特征之间的关系,探讨它们对新辅助化疗后结直肠癌病人预后的影响。方法回顾性分析佳木斯大学附属第一医院2010年1月至2012年12月新辅助化疗后行手术切... 详细信息

目的观察结直肠肿瘤中fap-α和SDF-1蛋白的表达与新辅助化疗后结直肠癌病人临床病理特征之间的关系,探讨它们对新辅助化疗后结直肠癌病人预后的影响。方法回顾性分析佳木斯大学附属第一医院2010年1月至2012年12月新辅助化疗后行手术切除结直肠癌病理标本80例,另选取20例正常结直肠黏膜组织,应用免疫组化方法检测fap-α和SDF-1蛋白的表达情况,分析它们与临床病理特征和预后的关系。结果 (1)fap-α和SDF-1蛋白在结直肠癌组织中表达水平均高于正常结直肠黏膜组织,差异有统计学意义(Pfap-α和SDF-1蛋白的表达与患者的淋巴结转移、肿瘤分期及肿瘤大小有关(P0.05);(3)fap-α和SDF-1蛋白的表达之间无相关性(P>0.05);(4)fap-α和SDF-1蛋白表达阳性组较阴性组生存时间短,差异具有统计学意义(Pfap-α和SDF-1蛋白表达阳性可能提示新辅助化疗后结直肠癌病人的不良预后。

关键词：结直肠癌 fap-α SDF-1 新辅助化疗

癌相关纤维母细胞对卵巢癌细胞的侵袭和转移的作用

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诊断病理学杂志 2022年第6期29卷 504-509页

作者：单丽辉胡兵袁碧英杨志蓉四川省妇幼保健院病理科成都610031 重庆市黔江中心医院病理科重庆409000

目的探讨癌相关纤维母细胞(CAF)对卵巢癌细胞侵袭和转移作用,为卵巢癌的合理有效治疗提供新的思路和作用靶点。方法采用免疫组化方法检测60例卵巢癌组织和20例正常卵巢组织中平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维母细胞活化蛋白(fap-α)、CD3... 详细信息

目的探讨癌相关纤维母细胞(CAF)对卵巢癌细胞侵袭和转移作用,为卵巢癌的合理有效治疗提供新的思路和作用靶点。方法采用免疫组化方法检测60例卵巢癌组织和20例正常卵巢组织中平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维母细胞活化蛋白(fap-α)、CD34和D2-40的表达情况,其中α-SMA和fap-α用来标记CAF,CD34标记微血管密度(MVD),D2-40标记淋巴管密度(LVD),分析α-SMA、fap-α、CD34和D2-40表达改变与卵巢癌患者临床病理特征的关系。结果正常卵巢组织中,α-SMA和fap-α均为阴性表达,α-SMA、fap-α表达于卵巢癌相关纤维母细胞质中,并且与分化程度、FIGO分期、侵袭深度、淋巴结转移、淋巴管密度增加和微血管密度增加相关(P0.05)。MVD与分化程度、FIGO分期、侵袭深度和淋巴结转移相关(P0.05)。LVD与分化程度、FIGO分期、侵袭深度和淋巴结转移相关(P0.05)。α-SMA和fap-α表达与MVD和LVD正相关(P<0.05)。结论 CAF通过促进血管再生和淋巴管再生而促进卵巢癌细胞的侵袭和转移,未来可能成为卵巢癌治疗的新靶点。

关键词： α-SMA fap-α 癌相关纤维母细胞卵巢癌

抗肿瘤寡肽的结构修饰及其稳定性和细胞毒性的初步评价

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抗肿瘤寡肽的结构修饰及其稳定性和细胞毒性的初步评价

作者：陈鹏暨南大学

学位级别：硕士

目的: 以成纤维激活蛋白α（fap-α）为靶标，化学合成系列靶向fap-α系列酶激活式抗肿瘤前体寡肽。一方面希望改造后的抗肿瘤寡肽有更强的抗肿瘤活性和一定的靶向性，另一方面希望改造后的抗肿瘤寡肽能克服多肽类药物在体内易酶解... 详细信息

目的: 以成纤维激活蛋白α（fap-α）为靶标，化学合成系列靶向fap-α系列酶激活式抗肿瘤前体寡肽。一方面希望改造后的抗肿瘤寡肽有更强的抗肿瘤活性和一定的靶向性，另一方面希望改造后的抗肿瘤寡肽能克服多肽类药物在体内易酶解的确定缺点，延长其在血清中的半衰期，使得改造后的抗肿瘤多肽更加具有成药性。方法： 1.采用Fmoc/t-Bu固相多肽合成法合成YSL、YSV、LDV、YIGSR母体寡肽，通过羧端酰胺化、N端封闭特殊靶向二肽片段Z-GP两种方法对母体寡肽进行结构改造。用高效液相进行分离纯化。 2.利用RP-HPLC监控样品在37℃、不同时间点的浓度变化，以此考察母体肽和结构修饰寡肽在PBS、DMEM和血清中的稳定性。 3.通过MTT法检测母体肽及改造的抗肿瘤寡肽的肿瘤细胞增殖抑制活性,并考察Z-GP片段是否封闭了母体肽的活性位点。结果：成功合成YSL、YSV、LDV、YIGSR四条抗肿瘤母体肽、四条C端酰胺化改造的抗肿瘤寡肽和四条N端经Z-GP封闭改造的抗肿瘤寡肽。应用现代波谱学方法（1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS等）对所合成的寡肽化合物进行结构确认。大鼠血清稳定性实验表明经过改造后的抗肿瘤短肽在血清中的稳定性明显高于母体肽。MTT实验表明经过结构改造的YSL具有比母体肽强的细胞毒性。

关键词：抗肿瘤寡肽 fap-α 靶向抗肿瘤结构修饰