检索结果-南通市图书馆

生物化学与生物物理进展 2009年第1期36卷 88-94页

作者：胡劲松丁乃峥滕俊林陈建国北京大学生命科学学院细胞增殖与分化教育部重点实验室生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100871

黏着斑相关蛋白(focal adhesion associated protein,faap)由小鼠D10Wsu52e基因编码,在进化上十分保守,但该蛋白质的生物学功能并不清楚.为此,首先通过细胞组分分离的方法研究了faap蛋白分布的细胞组分,结果表明faap主要存在于细胞质和... 详细信息

黏着斑相关蛋白(focal adhesion associated protein,faap)由小鼠D10Wsu52e基因编码,在进化上十分保守,但该蛋白质的生物学功能并不清楚.为此,首先通过细胞组分分离的方法研究了faap蛋白分布的细胞组分,结果表明faap主要存在于细胞质和细胞膜中.细胞蛋白表达量分析表明,细胞中faap与黏连蛋白受体(LR)表达量呈现正相关性.同时,细胞黏附实验表明,faap与LR对细胞黏附影响类似,也能够抑制细胞的黏附.这些实验结果为深入研究faap蛋白功能提供了依据.

关键词：小鼠 D10Wsu52e基因 faap 67ku层粘连蛋白受体细胞黏附

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

faap基因敲除小鼠模型的构建和表型初步分析

FAAP基因敲除小鼠模型的构建和表型初步分析

引用

作者：程文君山东师范大学

学位级别：硕士

粘着斑相关蛋白（faap，focal adhesion associated protein）是由小鼠D10Wsu52e基因编码的分子量为55kD的蛋白，进化上非常保守，在细菌、古生菌和后生动物中广泛分布。在小鼠不同组织中的表达分析发现，faap在生殖器官中高表达，推测... 详细信息

粘着斑相关蛋白（faap，focal adhesion associated protein）是由小鼠D10Wsu52e基因编码的分子量为55kD的蛋白，进化上非常保守，在细菌、古生菌和后生动物中广泛分布。在小鼠不同组织中的表达分析发现，faap在生殖器官中高表达，推测其是一个与生殖系统紧密相关的基因。为探索faap在雄性生殖系统中的功能，本实验运用反转录PCR及Western Blot研究了faap在雄性生殖系统中的表达模式。结果显示，faapmRNA在睾丸、附睾、输精管、前列腺中都检测有表达，在精囊中未检测到其表达，而睾丸和附睾中faap的表达量高。Western Blot检测C57BL/6J雄性小鼠出生后第1、7、14、21、28、35、42天附睾及睾丸中faap蛋白表达量发现，faap蛋白的表达量随出生后天数而逐渐增加。这表明faap可能在小鼠附睾形态发育、功能维持和精子成熟中起作用。实验可以作为faap基因敲除小鼠的野生型对照组来观察敲除组和野生型不同发育时期附睾和睾丸中faap的表达变化，进而为观察不同发育时期小鼠的附睾形态、精子形态和受精能力做铺垫。利用基因打靶技术构建faap基因敲除小鼠模型：KO（knockout)-First基因敲除小鼠模型。KO-First是一种多用途的模型，与条件敲除策略类似，在靶片段的两侧分别放置方向相同的loxP位点，同时还在靶片段5’端内含子中放置一个两侧带有FRT位点的SA-IRES-reporter片段。这样的模型可以用靶基因的启动子表达报告基因（reporter），通过检测报告基因的表达即可了解靶基因的表达情况;与表达Flp的工具鼠交配可去除SA-IRES-reporter片段，得到常规的flox小鼠。KO First模型的flox小鼠与conditional KO模型的flox小鼠不同，conditional KO中的flox小鼠表型正常，但KO First却是KO表型。所以通过检测KO-First小鼠表型分析可以初步检测faap KO表型。本实验所用的KO-First小鼠是插入了FRT-lacZneo-FRT-loxP元件及loxP位点的基因敲除小鼠，带有LacZ报告基因，可用LacZ染色定位检测报告基因了解faap的表达情况，结果显示，在KO-First小鼠的大脑和睾丸附睾中faap的表达量高。通过KO-First小鼠与C57BL/6J小鼠检测繁殖力发现，与C57BL/6J雄鼠相比，KO-First小鼠受孕率明显降低。KO-First小鼠后代从出生后14天左右开始出现死亡,在出生后第28天至42天存活率低，很少有活过2个月的。表明faap在小鼠生长发育过程中起了重要作用。faap KO First小鼠可与Flper小鼠交配后去除FRT-lacZneo-FRT元件，得到常规的faap flox小鼠。faap flox小鼠与Defb41iCre/wtCre小鼠交配即可获得在附睾特异性敲除faap的条件敲除小鼠。本实验利用KO-First基因敲除小鼠模型，可以进行faap基因敲除小鼠初步的表型分析，为定向敲除附睾起始段中faap的表达做铺垫;可以检测faap对精子成熟的影响，检测faap在小鼠雄性生殖系统中的作用，为研究开发新的避孕药物及治疗男性不育奠定理论基础。

关键词： faap 基因敲除小鼠 KO-First LacZ 繁殖力

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

PEA3对faap基因的调控

PEA3对FAAP基因的调控

引用

作者：刘红艳山东师范大学

学位级别：硕士

Ets家族能编码一大类转录因子。编码的所有转录因子都有一个高度保守的含85个氨基酸的DNA结合结构域，被命名为ETS结构域。它能特异性的识别并结合嘌呤丰富的DNA中心靶序列5ˊ-GGA(A/T)-3ˊ。根据转录因子的转录激活结构域和ETS结构域... 详细信息

Ets家族能编码一大类转录因子。编码的所有转录因子都有一个高度保守的含85个氨基酸的DNA结合结构域，被命名为ETS结构域。它能特异性的识别并结合嘌呤丰富的DNA中心靶序列5ˊ-GGA(A/T)-3ˊ。根据转录因子的转录激活结构域和ETS结构域将所有的Ets家族成员分成了四大类，每类包含几个亚家族，每个亚家族又包含不同的成员。PEA3亚家族就属于Ets家族，它包含三个家族成员：ER81/ETV1、PEA3/ETV4、ERM/ETV5。PEA3亚家族的三个成员ETV1、ETV4、ETV5在Ets结构域的同源性高达95％，在转录激活域的同源性高达85％。粘着斑相关蛋白（faap，focal adhesion associated protein）是由小鼠D10Wsu52e基因编码的。此蛋白约55KD，含505个氨基酸。faap存在于许多物种中且高度保守。在细菌和人中已鉴定出它的同源物分别为RtcB和HSPC117。已有研究证明，RtcB是一种独特的依赖GTP的RNA连接酶和DNA连接酶。而HSPC117是人类tRNA连接酶复合体的必需亚单位。通过生物信息学分析发现faap启动子上含有8个PEA3结合位点。克隆了PEA3家族的三个成员ER81/ETV1、PEA3/ETV4、ERM/ETV5，以及3个荧光素酶报告基因pGL2-492，pGL2-336，pGL2-276。pGL2-492含有全部的8个结合位点，pGL2-336含有4个结合位点，pGL2-276只含有1个结合位点。同时将PEA3结合位点的核心序列AGGA突变成ATTT,克隆突变体pGL2-m492、pGL2-m336、pGL2-m276。通过双荧光素酶实验发现ETV1、ETV4、ETV5都对pGL2-1317具有活性影响，且ETV4对pGL2-492、pGL2-336和pGL2-276也具有活性影响。最后，通过凝胶阻滞实验也证实了PEA3与小鼠faap启动子具有一定的结合作用。总之，我们的研究表明PEA3能通过结合faap启动子结合元件调节faap的表达。

关键词： PEA3 faap 启动子双荧光素酶凝胶阻滞

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：