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中华实验外科杂志 2019年第9期36卷 1558-1562页

作者：潘子寅王志豪仲毅潘枢史宏灿扬州大学临床医学院胸心外科扬州225001 扬州大学转化医学研究中心扬州225001

目的观察Pluronic f-127水凝胶的理化性质,并遴选最佳的浓度,探讨其作为骨髓间充质干细胞(BMSCs)载体的生物相容性.方法制备10%、20%、30%(m/v)的Pluronic f-127水凝胶,分析其成胶性能及溶胀率,在扫描电镜(SEM)下观察不同浓度水凝胶的... 详细信息

目的观察Pluronic f-127水凝胶的理化性质,并遴选最佳的浓度,探讨其作为骨髓间充质干细胞(BMSCs)载体的生物相容性.方法制备10%、20%、30%(m/v)的Pluronic f-127水凝胶,分析其成胶性能及溶胀率,在扫描电镜(SEM)下观察不同浓度水凝胶的微观形态.不同浓度水凝胶包含BMSCs及转化生长因子(TGf-β1)后共培养7d,经细胞计数试剂盒-8(CCK-8)定期检测不同载体内BMSCs增殖生长状况.筛选出较佳的Pluronic f-127浓度,加入诱导液对BMSCs进行多向诱导分化,分别进行油红-O及茜素红-S染色且根据染色结果评价细胞诱导分化的效果.结果Pluronic f-127水凝胶的成胶时间与其浓度呈负相关,且浓度越高的初始成胶温度较低,更易成胶.Pluronic f-127水凝胶浓度较高,其微观结构较致密,相应的溶胀率较低.CCK-8结果证实20%的水凝胶与10%比较,对BMSCs增殖的抑制作用更大,第5天最为明显,20%组吸光度(A)值(0.302±0.045)显著低于10%组(0.571±0.081,t=5.120,P凝胶载体中加入TGf-β1则对细胞的增殖有促进作用,第5天20%*组(加入TGf-β1)A值(0.454±0.034)明显高于20%组(0.302±0.045,t=6.088,Pf-127可作为支持BMSCs增殖及分化的合适载体,且复合生长因子或诱导液会更有利于细胞进一步生长分化.

关键词： Pluronic f-127水凝胶骨髓间充质干细胞组织工程气管生物相容性

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SDf-1α复合Pluronic f-127的构建及其对BMSCs的体外生物效应研究

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安徽医科大学学报 2014年第8期49卷 1096-1099页

作者：田甜程继光周健安徽医科大学口腔医学院安徽医科大学附属口腔医院安徽省口腔疾病研究中心实验室合肥230032 安徽医科大学口腔医学院安徽医科大学附属口腔医院口腔颌面外科合肥230032

目的构建装载基质细胞衍生因子-1α(SDf-1α)的Pluronic f-127新型复合材料,并研究其对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外生物效应。方法构建装载不同浓度SDf-1α(200、50 ng/ml)的Pluronic f-127复合水凝胶,采用Transwell小室进行复合水... 详细信息

目的构建装载基质细胞衍生因子-1α(SDf-1α)的Pluronic f-127新型复合材料,并研究其对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外生物效应。方法构建装载不同浓度SDf-1α(200、50 ng/ml)的Pluronic f-127复合水凝胶,采用Transwell小室进行复合水凝胶对BMSCs的体外趋化实验。将BMSCs与复合材料均匀混合,加成骨细胞诱导液进行培养,并对其行碱性磷酸酶(AKP)活性测定及茜素红染色,由结果可观察到BMSCs的成骨诱导分化情况,并用MTT法检测复合培养后细胞的活性状况。结果趋化实验结果显示,含SDf-1α浓度为200 ng/ml的复合水凝胶对BMSCs的募集效果显著(Pf-127对细胞增殖不产生影响(P>0.05)。BMSCs-复合材料、单纯BMSCs在成骨诱导培养条件下,两组细胞的AKP表达量均明显增高,并且都高于非成骨诱导组(Pf-1α的Pluronic f-127新型复合材料,其在体外对BMSCs有明显的趋化作用,在细胞材料复合培养的三维支架中,BMSCs能够存活并被成功诱导分化为成骨细胞。

关键词：基质细胞衍生因子-1α Pluronic f-127水凝胶骨髓间充质干细胞成骨诱导分化

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SDf-1α复合Pluronic f-127对BMSCs体外诱导成骨的实验观察

SDF-1α复合Pluronic F-127对BMSCs体外诱导成骨的实验观察

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作者：田甜安徽医科大学

学位级别：硕士

目的以Pluronic f-127为支架材料，构建装载基质细胞衍生因子-1α（stromal cellderived factor-1α，SDf-1α）的Pluronic f-127新型复合材料，探讨其对大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs）的体外趋化作用，并将... 详细信息

目的以Pluronic f-127为支架材料，构建装载基质细胞衍生因子-1α（stromal cellderived factor-1α，SDf-1α）的Pluronic f-127新型复合材料，探讨其对大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs）的体外趋化作用，并将Pluronicf-127与BMSCs复合培养，观察两者间生物相容性，进而研究复合SDf-1α水凝胶对BMSCs诱导分化成成骨细胞的影响。研究方法构建装载不同浓度SDf-1α（200、50ng/ml）的Pluronic f-127复合水凝胶，采用Transwell小室法进行复合水凝胶对BMSCs的体外趋化实验，通过对迁移BMSCs的计数与统计分析，筛选出趋化作用较好的复合水凝胶。将BMSCs与筛选出的复合水凝胶均匀混合培养，用MTT法检测复合培养后细胞的活性状况。将BMSCs与筛选出的复合水凝胶混合均匀，待凝胶形成后加成骨诱导液进行培养，同时分别设置单纯BMSCs的成骨诱导液培养和完全培养基培养，对以上各行碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）活性测定及茜素红染色，观察并记录各检测结果，分析各BMSCs的成骨诱导分化情况。结果趋化结果显示，含SDf-1α浓度为200ng/ml的复合水凝胶对BMSCs的募集效果显著，与含SDf-1α浓度为50ng/ml的复合水凝胶相比，其趋化下室滤膜表面的细胞转移数目明显增多（Pf-127对细胞增殖不产生影响，BMSCs-水凝胶复合培养与单纯BMSCs培养相比，两者间细胞活性差异并无统计学意义（P>0.05）。AKP活性测定表明，BMSCs-复合水凝胶、单纯BMSCs在成骨诱导培养条件下，两者中细胞的AKP表达量均明显增高，并且都高于非成骨诱导组（Pf-1α的Pluronic f-127新型复合材料，其在体外对BMSCs有明显的趋化作用，在Pluronic f-127水凝胶中，BMSCs能够存活较好并能进行正常的生长及增殖，并且在细胞-复合水凝胶复合培养的三维支架中，BMSCs能够被成功诱导分化为成骨细胞。

关键词：基质细胞衍生因子-1α Pluronic f-127水凝胶骨髓间充质干细胞成骨诱导分化

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SDf-1α复合Pluronic f-127对兔上颌窦底提升术成骨影响的实验研究

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口腔颌面外科杂志 2016年第5期26卷 339-345页

作者：曾嘉芙吴涛郑文龙周健安徽医科大学口腔医学院安徽医科大学附属口腔医院安徽省口腔疾病研究中心实验室安徽合肥230032

目的 :通过制备基质细胞衍生因子(SDf1-α)的Pluronic f-127复合凝胶材料,观察这种复合材料在体外对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的矿化及成血管作用和复合凝胶材料在兔上颌窦外提升术中的成骨及成血管效果。方法:将兔骨髓间充质干细胞、5... 详细信息

目的 :通过制备基质细胞衍生因子(SDf1-α)的Pluronic f-127复合凝胶材料,观察这种复合材料在体外对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的矿化及成血管作用和复合凝胶材料在兔上颌窦外提升术中的成骨及成血管效果。方法:将兔骨髓间充质干细胞、50ng/ml SDf1-α和质量百分比浓度0.1%的Pluronic f-127复合培养,MTT法检测其细胞毒性,碱性磷酸酶活性测定及茜素红染色。将18只新西兰大白兔双侧进行上颌窦外提升术,双侧植入不同的复合材料(共3种)并进行对照。材料分别为:β-磷酸三钙(β-TCP),生理盐水及SDf-1α复合Pluronic f-127凝胶。于术后4、8、12周处死,X线片观察双侧上颌窦骨质形成情况,行HE染色、CD31+、CD34+、BMP-2及VEGf免疫组织化学染色观察成骨及成血管作用,并进行统计学分析。结果:体外实验采用MTT法证实了0.1%w/w Pluronic f-127无细胞毒性(P>0.05)。BMSCs-SDf1α复合凝胶碱性磷酸酶染色下,细胞质可见大量碱性磷酸酶染色沉淀,其余3组未见沉淀。BMSCs-SDf1α复合凝胶、BMSCs-单纯凝胶、单纯BMSCs在成骨诱导培养条件下均产生矿化结节,非成骨诱导组未见矿化结节形成。体内实验,X线片结果显示BMSCs-SDf1-α复合凝胶及β-TCP充填侧均有阻射影,生理盐水组未见明显阻射影;HE染色结果显示BMSCs-SDf1-α复合凝胶成骨效果与β-TCP成骨效果明显,生理盐水组未见骨质形成,统计学分析表明BMSCs-SDf1-α复合凝胶成血管作用较β-TCP及生理盐水组明显增加。结论:SDf-1α复合Pluronic f-127凝胶能够成功诱导BMSCs分化为成骨细胞,无细胞毒性,在体外及兔上颌窦内成骨、成血管效果明显。

关键词：基质细胞衍生因子SDf1-α Pluronic f-127水凝胶骨髓间充质干细胞成骨诱导分化上颌窦外提升术

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