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ephrin-b3沉默对大鼠脊髓损伤后功能修复及Gap-43表达的影响

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中国医科大学学报 2012年第4期41卷 307-310页

作者：杜鹏吕刚智晓东辽宁医学院附属第一医院骨科辽宁锦州121001

目的观察ephrin-b3基因沉默后对脊髓损伤（SCI）功能恢复的影响。方法构建3组针对ephrin-b3基因的siRNA干扰质粒（用于实验组：A、b、C组）及1组乱序siRNA干扰质粒（用于对照组D组）,体外克隆并提取质粒后包装慢病毒颗粒。半横切法制作... 详细信息

目的观察ephrin-b3基因沉默后对脊髓损伤（SCI）功能恢复的影响。方法构建3组针对ephrin-b3基因的siRNA干扰质粒（用于实验组：A、b、C组）及1组乱序siRNA干扰质粒（用于对照组D组）,体外克隆并提取质粒后包装慢病毒颗粒。半横切法制作成年大鼠SCI模型,将病毒颗粒注入SCI处。分别在注入1、2、4、8周后,采用bbb评分法比较大鼠肢体功能恢复情况;采用Real-time PCR法检测伤后各组脊髓组织ephrin-b3 mRNA表达情况;采用免疫组化法观察脊髓组织Gap-43的表达变化。结果 ephrin-b3 mRNA在正常大鼠脊髓内呈相对低表达,D组表达水平呈上升趋势,实验组大鼠出现ephrin-b3沉默效果,b组尤为明显。转染后1～4周,b组大鼠bbb评分呈持续升高趋势,高于其他3组,D组明显低于实验组,4周时各组恢复效果都进入平台期。免疫组化结果显示,b组脊髓组织内Gap-43表达最明显,从转染后1周开始升高,4-8周时有所下降,而D组呈持续性弱表达。结论沉默ephrin-b3能够促进大鼠SCI早期功能修复并上调脊髓组织内Gap-43的表达。

关键词：脊髓损伤大鼠功能修复 ephrin-b3 Gap-43

慢性缺血致血管性认知障碍大鼠脑白质病变与ephrin-b3的相关性

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中国老年学杂志 2016年第21期36卷 5245-5246页

作者：赵腾丁颖王超周春奎吉林大学第一医院二部吉林长春130031

目的探讨ephrin-b3是否参与了慢性脑缺血大鼠的脑白质损害及认知功能障碍。方法选用Wistar大鼠48只,随机分为假手术1组、假手术2组、模型30 d组、模型60 d组。模型组组应用大鼠双侧颈总动脉永久结扎法(2VO)制备慢性前脑缺血致血管性痴... 详细信息

目的探讨ephrin-b3是否参与了慢性脑缺血大鼠的脑白质损害及认知功能障碍。方法选用Wistar大鼠48只,随机分为假手术1组、假手术2组、模型30 d组、模型60 d组。模型组组应用大鼠双侧颈总动脉永久结扎法(2VO)制备慢性前脑缺血致血管性痴呆动物模型,假手术组仅有手术过程而未行双侧颈总动脉结扎。术后30 d,采用Morris水迷宫对假手术1组及模型30 d组大鼠于手术前及手术后的逃避潜伏期时间进行检测,比较手术前后及各组间的差异。而后将2组大鼠断头取脑。部分行HE染色,部分脑组织制成匀浆,行ELISA检测,统量各组ephrin-b3的表达。术后60 d,按照上述同样的方法对假手术2组及模型2组大鼠进行处理。结果造模后30 d,模型1组大鼠水迷宫的逃避潜伏期时间与假手术1组相比差异显著(P30 d及60 d组大鼠胼胝质部位出现明显白质疏松、细胞数量减少,并出现空泡样改变。经ELISA检测,假手术1组、模型30 d组、假手术2组、模型60 d组大鼠脑内ephrin-b3浓度分别为(11.76±1.26)ng/ml、(12.08±1.32)ng/ml、(37.25±5.32)ng/ml、(48.65±6.88)ng/ml。模型30 d组与假手术1组ephrin-b3表达量相比差异显著(Pephrin-b3可能参与了慢性缺血致血管性痴呆大鼠的脑白质损害及认知功能障碍。

关键词：血管性痴呆脑白质病变 ephrin-b3

脑出血后ephrin-b3的表达与白质损伤的相关性

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脑出血后ephrin-b3的表达与白质损伤的相关性

作者：罗岗山西医科大学

学位级别：硕士

目的;运用elisa技术对成年大鼠脑出血后ephrin-b3的表达进行定量测定,进而探讨成年大鼠脑出血（ICH,Intracerebral hemorrhage）后ephrin-b3的表达与脑白质损伤的关系及其作用机制,为脑出血后神经纤维的再生提供新的思路与技术方法。 ... 详细信息

目的;运用elisa技术对成年大鼠脑出血后ephrin-b3的表达进行定量测定,进而探讨成年大鼠脑出血（ICH,Intracerebral hemorrhage）后ephrin-b3的表达与脑白质损伤的关系及其作用机制,为脑出血后神经纤维的再生提供新的思路与技术方法。方法;采用250+15g的wistar雄性清洁级大鼠56只,随机分为正常对照组（n=8只）,假手术组（n=8只）,出血组（n=40只）。大鼠麻醉后,在立体定位仪辅助仪器下,取大鼠尾动脉非肝素不凝血100 ul,分3次注入内囊区以建立脑出血模型,分别于造模成功后6,24,48,72h,7d处死,断头取脑。应用苏木精-伊红染色观察各组血肿周围脑组织的病理变化;应用elisa法检测对照组及出血组血肿周围ephrin-b3的表达情况。结果:光镜（HE染色）病理观察:出血6h组于血肿周围可见变性坏死区域, 24h、48h、72h组血肿周围的变性坏死区逐渐扩大,72h损伤达高峰, 7d与72h组无明显变化。elisa法检测血肿周围白质ephrin-b3的表达:出血后6h血肿周围ephrin-b3的表达开始升高,24h,48h表达逐步增高,72h表达达到高峰,它们之间两两比较（p＜0.05）,具有统计学意义;与相应的时间点的假手术组和正常组两两比较（p＜0.05）,有统计学意义;出血7d组ephrin-b3表达恢复明显,与6h,24h,48h,72h组两两比较（P＜0.05）,有统计学意义;与假手术组和正常对照组两两比较虽有差异,但（p＞0.05）无统计学意义;假手术各组和正常对照组比较（p＞0.05）,无统计学意义。结论:成年大鼠脑出血后ephrin-b3的表达和脑白质损伤程度相一致,提示ephrin-b3可能参与了脑出血损伤的发生,在脑出血发生、发展和转归过程中起一定的作用。

关键词：脑出血 ephrin-b3 再生脑白质损伤

ephrin-b3沉默对大鼠脊髓损伤后功能修复及Gap-43表达的影响

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Ephrin-B3沉默对大鼠脊髓损伤后功能修复及Gap-43表达的影响

作者：杜鹏辽宁医学院

学位级别：硕士

目的观察ephrin-b3基因沉默后对脊髓损伤(SCI)功能恢复的影响，为临床相关治疗提供可行的实验依据。方法构建3组针对ephrin-b3基因的siRNA干扰质粒（用于实验组：A组、b组、C组）及1组乱序siRNA干扰质粒（用于对照组D组），体外克隆... 详细信息

目的观察ephrin-b3基因沉默后对脊髓损伤(SCI)功能恢复的影响，为临床相关治疗提供可行的实验依据。方法构建3组针对ephrin-b3基因的siRNA干扰质粒（用于实验组：A组、b组、C组）及1组乱序siRNA干扰质粒（用于对照组D组），体外克隆并提取质粒后包装慢病毒颗粒。半横切法制作成年大鼠SCI模型，将病毒颗粒注入SCI处。分别在注入1、2、4、8周后，采用bbb评分法比较大鼠肢体功能恢复情况;采用RealTime-PCR法检测伤后各组脊髓组织ephrin-b3mRNA基因表达情况;采用免疫组化法观察脊髓组织Gap-43的表达变化。结果 ephrin-b3mRNA在正常大鼠脊髓内呈相对低表达，D组可见表达水平呈明显上升趋势，A、b、C3组都出现ephrin-b3沉默效果，b组尤为明显。转染后1～4周，b组大鼠bbb评分呈持续升高趋势，高于其他3组，D组明显低于实验组，4周时各组恢复效果都进入平台期。免疫组化结果显示，b组脊髓组织内Gap-43表达最明显，从转染后1周趋高，4～8周有所下降，而D组呈持续性弱表达。结论沉默ephrin-b3能够促进大鼠SCI早期功能修复并上调脊髓组织内Gap-43的表达。

关键词：脊髓损伤大鼠功能修复 ephrin-b3 Gap-43

ephrin-b3在小鼠疼痛中的作用和机制研究

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Ephrin-B3在小鼠疼痛中的作用和机制研究

作者：潘舒贵州大学

学位级别：硕士

目的:Eph受体酪氨酸激酶及其配体ephrins,在疼痛的发展和调制中发挥重要作用。到目前为止,ephrin-b3在小鼠上的痛觉调节机制尚不清楚。本文旨在考察ephrin-b3在疼痛产生过程中的作用及其机制,为镇痛和抗肿瘤药物的研究提供新的靶点。方... 详细信息

目的:Eph受体酪氨酸激酶及其配体ephrins,在疼痛的发展和调制中发挥重要作用。到目前为止,ephrin-b3在小鼠上的痛觉调节机制尚不清楚。本文旨在考察ephrin-b3在疼痛产生过程中的作用及其机制,为镇痛和抗肿瘤药物的研究提供新的靶点。方法:在野生和ephrin-b3敲除基因的ICR小鼠上采用热板等实验方法考察痛阈的改变,给tamoxifen诱导Cre重新表达ephrin-b3后考察在多种疼痛模型上小鼠的痛阈。在甲醛模型上通过ELISA和血常规考察ephrin-b3对炎性疼痛的作用并通过淋巴增殖实验考察ephrin-b3对T淋巴细胞的作用。通过电镜观察髓鞘形态变化,通过western blot方法,考察其ephrin-b3基因与疼痛相关的信号通路。建立H22肝癌模型,考察其对肿瘤作用。结果:ephrin-b3基因敲除小鼠的痛域潜伏期长于野生小鼠,在热辐射甩尾和机械痛实验中两组在第7-10周有显著性差异,诱导ephrin-b3重新表达后,两组间的痛阈没有显著差异。在甲醛模型中两相均有抑制,通过血常规发现敲除小鼠的白细胞和淋巴细胞比野生组基础值低。给予甲醛后正常小鼠的白细胞没有变化,淋巴细胞明显下降,而敲除小鼠的白细胞明显上升而淋巴细胞没有变化。在淋巴细胞增殖实验中,敲除小鼠的T细胞增殖明显低于野生组。在透射电镜下,敲除小鼠的髓鞘出现脱落,变薄等现象,而野生小鼠并未有此现象。在western blot实验中在第4周仅PLP有显著差异,而给予tamoxifen后第8周的PLP蛋白明显上升。与野生小鼠相比,敲除小鼠瘤重有非常明显的降低。在血常规中,敲除小鼠的白细胞、淋巴细胞、单核巨噬细胞等均有显著地下降。在形态学中,敲除组肿瘤组织与野生组相比坏死更严重。在电镜下,敲除组的肿瘤细胞核中的染色质边缘化较野生组更严重。在蛋白水平上,敲除基因小鼠肿瘤中的bax/bcl-2表达明显提高。结论:敲除ephrin-b3基因可提高小鼠痛阈,通过抑制T细胞免疫应答抑制炎性疼痛并通过凋亡抑制H22肿瘤生长。

关键词： ephrin-b3 疼痛髓鞘抗肿瘤

髓鞘相关抑制因子ephrin-b3在脑出血急性期的动态表达及意义

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髓鞘相关抑制因子Ephrin-B3在脑出血急性期的动态表达及意义

作者：王超吉林大学

学位级别：硕士

背景与目的：脑血管疾病是目前严重危害人类健康的主要疾病之一，随着当今社会的老龄化，脑血管病发病率不断增高。脑出血是一种常见的脑血管疾病，其致残率和死亡率高，严重影响人类生存和生活质量。髓鞘相关抑制因子（mylin-associate... 详细信息

背景与目的：脑血管疾病是目前严重危害人类健康的主要疾病之一，随着当今社会的老龄化，脑血管病发病率不断增高。脑出血是一种常见的脑血管疾病，其致残率和死亡率高，严重影响人类生存和生活质量。髓鞘相关抑制因子（mylin-associated inhibitor factors, MAIFs）是一种存在于中枢神经系统髓鞘中的神经纤维生长抑制剂，包括髓鞘相关糖蛋白（myelin-associated glycoprotein, MAG）,少突胶质细胞-髓鞘糖蛋白（oligodendrocytemyelin glycoprotein, OMgp）,轴突生长抑制因子A（Neurite out-growthinhabitor-A, Nogo-A）及近年发现的促红细胞生成素肝细胞受体相互作用蛋白-b3（erythropoietin-producing hepato cellular receptor interactingproteins-b3, ephrin-b3）等，其主要功能是参与髓鞘的形成、维持髓鞘的完整性、抑制轴突的再生。ephrin-b3表达于少突胶质细胞，而少突胶质细胞是组成白质的主要细胞，参与白质轴突髓鞘的形成。本研究旨在探讨观察急性脑出血患者发病后不同时间点血清中ephrin-b3含量的动态变化，探讨其与神经功能缺损程度、出血量及预后之间的关系，从而指导临床诊治。实验方法：根据全国第四届脑血管学术会议修订的脑出血诊断标准，将2010年12月～2011年12月住院的30例基底节区脑出血患者根据头颅CT图像和多田氏公式计算出血量，依据出血量分为少、中、大量出血三组（少量出血组＜20ml、中量出血组20ml～40ml、大量出血组＞40ml），并于入院第3d复查头颅CT;分别于发病第1d、第3d、第7d和14d进行美国国立卫生研究院脑卒中量表（NIHSS）评分;同时采取患者空腹肘静脉血4ml，离心后取血清，采用酶联免疫法测定三组患者血清中不同时间点ephrin-b3的浓度。应用统计学分析不同组别、不同时间点血清中ephrin-b3浓度有无差异以及神经缺损程度情况。实验结果： 1．脑出血组患者发病第1d血清ephrin-b3的含量即开始升高,与正常对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.01）;发病第3d时升至最高，与发病第1d、第7d、第14d相比，差异存在显著统计学意义（P＜0.05）;发病第7d与第14d时含量降低，但仍高于对照组（P＜0.05）。 2.脑出血组患者发病第1d，大量出血组血清ephrin-b3含量（5.507±1.543） ng/mL明显高于少量出血组（1.488±0.857） ng/mL，差异存在显著的统计学意义（P＜0.01）。脑出血组患者发病第3d，大量出血组血清ephrin-b3含量（7.968±0.560） ng/mL明显高于少量出血组（2.870±1.121）ng/mL，相比较具有显著性差异（P＜0.01）。Spearman等级相关分析显示不同出血量患者第1d血清ephrin-b3含量与出血量分别呈正相关（r=0.911，P＜0.01, r=0.979，P＜0.01, r=0.941，P＜0.01） 3.脑出血患者在发病不同时间点血清ephrin-b3含量与各时间点NIHSS评分均呈显著性正相关（r=0.5235, P＜0.01;r=0.7436, P＜0.01;r=0.4572, P＜0.05;r=0.4145, P＜0.05）。NIHSS评分越高，血清ephrin-b3含量越高。脑出血患者第3d NIHSS评分与血清ephrin-b3含量相关性最为显著（r=0.7436, P＜0.01）。实验结论： 1.脑出血患者血清ephrin-b3含量较正常对照组明显增高，发病第3d时到达高峰，以后下降。其含量与脑出血患者血肿量呈正相关。 2.脑出血患者血清ephrin-b3含量与NIHSS评分呈显著性正相关，其含量与神经功能缺损有紧密的关系。 3. ephrin-b3可能参与了脑出血后白质损伤的发生，有可能成为早期反映脑出血后白质损伤程度的血清指标之一。

关键词：脑出血脑白质损伤髓鞘相关抑制因子 ephrin-b3

5-Fu联合醒脑静干预对绒毛癌致急性脑出血髓鞘相关抑制因子ephrin-b3的mRNA及蛋白表达的影响

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实用癌症杂志 2016年第7期31卷 1078-1080页

作者：廖学武罗丹重庆市大足区人民医院 402360

目的探讨5-Fu联合醒脑静干预对绒毛癌致急性脑出血髓鞘相关抑制因子ephrin-b3的mRNA及蛋白表达的影响。方法选择原发性绒毛癌致急性脑出血患者30例为研究对象,对照组患者(n=15)进行5-氟尿嘧啶(5-Fu)鞘内化疗,治疗组患者(n=15)进行5-Fu... 详细信息

目的探讨5-Fu联合醒脑静干预对绒毛癌致急性脑出血髓鞘相关抑制因子ephrin-b3的mRNA及蛋白表达的影响。方法选择原发性绒毛癌致急性脑出血患者30例为研究对象,对照组患者(n=15)进行5-氟尿嘧啶(5-Fu)鞘内化疗,治疗组患者(n=15)进行5-Fu鞘内化疗+静脉滴注醒脑静注射液,对2组患者的一般资料(年龄、发生部位、血β-HCG)、ephrin-b3的mRNA水平及ephrin-b3蛋白水平进行比较。结果 2组患者的一般资料无统计学差异(P>0.05)。治疗后治疗组ephrin-b3的mRNA水平和ephrin-b3蛋白水平均低于对照组,差异具有统计学意义(Pephrin-b3的mRNA水平和蛋白水平。

关键词：醒脑静 ephrin-b3 急性脑出血绒毛癌

脑白质损害新生大鼠脑组织ephrin-b3表达及意义

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中国新生儿科杂志 2009年第2期24卷 112-114,129页

作者：肖琴陈娟陈大鹏吴艳秋姚裕家四川大学华西第二医院新生儿科成都610041

目的建立新生大鼠脑白质损害(white matter damage,WMD)模型,探讨WMD新生大鼠脑组织ephrin-b3 mRNA的表达变化及意义。方法采用2日龄SD大鼠,通过结扎右侧颈总动脉并吸入6%氧气4h建立WMD模型(WMD组),分别于模型后0、8、24、48、72h及7d处... 详细信息

目的建立新生大鼠脑白质损害(white matter damage,WMD)模型,探讨WMD新生大鼠脑组织ephrin-b3 mRNA的表达变化及意义。方法采用2日龄SD大鼠,通过结扎右侧颈总动脉并吸入6%氧气4h建立WMD模型(WMD组),分别于模型后0、8、24、48、72h及7d处死,同时设立相应假手术对照组。脑组织HE染色检测病理变化,荧光定量RT-PCR检测ephrin-b3mR-NA表达。结果WMD组缺氧缺血8h可见纹状体内细胞胞体肿胀、细胞稀疏、间隙增宽,7d可见缺氧缺血侧侧脑室旁白质呈筛网状坏死。与假手术组比较,WMD组脑白质ephrin-b3 mRNA在缺氧缺血后8、24、48、72h及7d表达均增加,差异有统计学意义(Pephrin-b3mRNA表达显著增加,提示ephrin-b3参与了WMD过程中神经细胞的损伤及再生抑制机制。

关键词：白质软化病,脑室周围大鼠 ephrin-b3 mRNA

ephrin-b3在癫痫大鼠海马中的动态表达变化

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中风与神经疾病杂志 2021年第8期38卷 714-717页

作者：刘田田滕军放刘恒方张敏肖波郑州大学第一附属医院神经内科河南郑州450052 郑州大学第五附属医院神经内科河南郑州450054 中南大学湘雅医院神经内科湖南长沙410008

目的检测癫痫大鼠模型ephrin-b3的动态表达,探讨其在颞叶癫痫中致痫作用。方法SD雄性大鼠随机分成对照组和实验组,构建氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠模型,在癫痫持续状态(SE)诱导成功后7 d(急性期)、14 d(静止期)、60 d(慢性期)分别采用Real-... 详细信息

目的检测癫痫大鼠模型ephrin-b3的动态表达,探讨其在颞叶癫痫中致痫作用。方法SD雄性大鼠随机分成对照组和实验组,构建氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠模型,在癫痫持续状态(SE)诱导成功后7 d(急性期)、14 d(静止期)、60 d(慢性期)分别采用Real-time qPCR、Western blot及免疫组化方法检测大鼠海马齿状回ephrin-b3 mRNA及蛋白的表达及分布。结果在SE后的急性期和静止期,实验组大鼠均未见自发痫性发作;慢性期实验组大鼠有节律性点头、咀嚼、单侧或双侧前肢阵挛发作。荧光定量PCR结果显示:与对照组比较,急性期癫痫大鼠海马的ephrin-b3 mRNA表达水平下降,静止期下降最为明显,慢性期有所回升,但仍低于对照组(Pblot检测ephrin-b3蛋白的表达水平与mRNA表达趋势相一致:与对照组比较,致痫后7 d、14 d、60 d的ephrin-b3蛋白表达均下调,差异有统计学意义(Pephrin-b3蛋白主要分布于海马齿状回的颗粒细胞胞膜上,其光密度值与mRNA的变化趋势相一致(Pephrin-b3在海马组织的动态变化可能与慢性自发痫性发作密切相关。

关键词： ephrin-b3 癫痫海马齿状回慢性自发痫性发作