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中国矫形外科杂志 2012年第16期20卷 1493-1496页

作者：张玉强吕刚王岩峰范仲恺智晓东曹阳中国医科大学附属一院骨科沈阳市110001 辽宁医学院附属第一医院骨科锦州市121000

[目的]探讨红细胞生成素诱导肝癌细胞株配体-b1(ephrin-b1)在大鼠脊髓损伤的表达变化。[方法]将60只成年Wistar大鼠分正常组、假手术组、伤后3、7、14 d及28 d组。假手术组大鼠不损伤脊髓,损伤组大鼠采用Allen's氏打击法损伤T10脊髓。... 详细信息

[目的]探讨红细胞生成素诱导肝癌细胞株配体-b1(ephrin-b1)在大鼠脊髓损伤的表达变化。[方法]将60只成年Wistar大鼠分正常组、假手术组、伤后3、7、14 d及28 d组。假手术组大鼠不损伤脊髓,损伤组大鼠采用Allen's氏打击法损伤T10脊髓。分别在各个时间点取材,免疫荧光和Western blot检测ephrin-b1蛋白表达情况。[结果]免疫荧光结果显示ephrin-b1在正常、假手术和损伤脊髓的灰质和白质中均有表达,但在损伤脊髓组织中表达较高,脊髓组织中的星形胶质细胞表达ephrin-b1。Western blot显示损伤组比对照组ephrin-b1蛋白含量显著增加(P0.05)。[结论]ephrin-b1在大鼠脊髓损伤后表达升高,伤后14 d表达升高显著,表达于脊髓的星形胶质细胞。

关键词：脊髓损伤免疫荧光 ephrin-b1 Western blot

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ephrin-A1、ephrin-b1融合蛋白的构建、表达和活性测定

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华中科技大学学报（医学版） 2005年第3期34卷 284-286页

作者：张合喜程晋鹏王友洁郝巧玲华中科技大学同济医学院公共卫生学院环境医学研究所

目的克隆并合成Eph受体的两个主要配体ephrinA1和ephrinb1的融合蛋白。方法利用RTPCR技术,分别扩增了ephrinA1、ephrinb1胞外序列和小鼠IgG2b的Fc序列,将其连接后,插入pAlterMax表达载体,得到两个重组子pAlterMaxephrinA1Fc和pAlterMaxephrinb1Fc,经序列测定,确认无突变产生后转染至293T细胞,使之表达分泌型ephrinA1Fc和ephrinb1Fc可溶性融合蛋白,并利用蛋白A琼脂糖凝胶纯化。利用免疫沉淀和Westernblot检测了ephrinA1Fc和ephrinb1Fc的相应受体的活性。结果ephrinA1和ephrinb1融合蛋白可以成功刺激其相应的Eph受体,使之发生磷酸化。结论制备得到的两个融合蛋白具有相应的生物活性,为进一步研究Eph受体酪氨酸激酶家族的功能打下了基础。

关键词： Eph受体酪氨酸激酶 ephrin-A1 ephrin-b1 融合蛋白

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基于Ephb2/ephrin-b1/JNK通路探讨复方苦参汤调控溃疡性结肠炎的内在机制研究

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中药材 2021年第3期44卷 674-678页

作者：吴云翔陈光华陈教华安明伟唐勇张磊昌江西中医药大学附属医院江西南昌330019

目的:研究复方苦参汤对溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用及其机制。方法:选取健康雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、美沙拉嗪阳性对照组及复方苦参汤低、中、高剂量组,每组10只,除正常对照组外其余各组均采用三硝基苯磺酸+乙醇制... 详细信息

目的:研究复方苦参汤对溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用及其机制。方法:选取健康雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、美沙拉嗪阳性对照组及复方苦参汤低、中、高剂量组,每组10只,除正常对照组外其余各组均采用三硝基苯磺酸+乙醇制备溃疡性结肠炎大鼠模型,于造模成功后给予相应药物进行治疗,观察大鼠的一般情况及疾病活动指数(DAI),检测血清TNF-α、IL-6、IL-4、IL-1β含量,取结肠组织观察其组织病理学变化,检测结肠组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)、一氧化氮合酶(iNOS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,RT-PCR检测大鼠结肠组织Ephb2、ephrin-b1、JNK mRNA表达,Western blot检测大鼠结肠组织Ephb2、ephrin-b1、JNK蛋白表达。结果:与模型组比较,美沙拉嗪组及复方苦参汤中、高剂量组大鼠饮食、毛发光泽及活动情况明显改善,DAI评分显著降低(Pb2/ephrin-b1/JNK通路有关。

关键词：复方苦参汤溃疡性结肠炎 Ephb2 ephrin-b1 JNK 机制研究

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Therapeutic target for nephrotic syndrome: Identification of novel slit diaphragm associated molecules

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World Journal of Nephrology 2014年第3期3卷 77-84页

作者： Yoshiyasu Fukusumi Naoko Miyauchi Taeko Hashimoto Akira Saito Hiroshi Kawachi Department of Cell biology Institute of Nephrology Niigata University Graduate School of Medical and Dental Sciences Niigata 951-8510 Japan

The slit diaphragm bridging the neighboring foot pro-cesses functions as a fnal barrier of glomerular capil-lary wall for preventing the leak of plasma proteins into primary urine. It is now accepted that the dysfunction of the sit diaphragm contributes to the development of proteinuria in several glomerular diseases. Neph-rin, a gene product of NPHS1, a gene for a congenital nephrotic syndrome of Finnish type, constitutes an ex-tracellular domain of the slit diaphragm. Podocin was identified as a gene product of NPHS2 , a gene for a familial steroid-resistant nephrotic syndrome of French. Podocin binds the cytoplasmic domain of nephrin. After then, CD2 associated protein, NEPH1 and transient re-ceptor potential-6 were also found as crucial molecules of the slit diaphragm. In order to explore other novel molecules contributing to the development of protein-uria, we performed a subtraction hybridization assay with a normal rat glomerular RNA and a glomerular RNA of rats with a puromycin aminonucleoside ne-phropathy, a mimic of a human minimal change type nephrotic syndrome. Then we have found that synaptic vesicle protein 2b, ephrin-b1 and neurexin were already downregulated at the early stage of puromycin aminonucleoside nephropathy, and that these molecules were localized close to nephrin. It is conceivable that these molecules are the slit diaphragm associated molecules, which participate in the regulation of the barrier func-tion. These molecules could be targets to establish a novel therapy for nephrotic syndrome.

关键词： Podocyte Slit diaphragm Synaptic vesicle protein 2b ephrin-b1 Neurexin

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