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熊果酸通过调控雌激素受体抑制甲状腺癌BCPAP细胞增殖、迁徙、侵袭的机制研究

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新中医 2024年第9期56卷 196-201页

作者：段祥凯陈红跃河南中医药大学第二临床医学院河南郑州450000 河南中医药大学第二附属医院甲乳外科河南郑州1450000

目的:观察熊果酸对雌激素受体erα、erβ表达的影响,研究熊果酸抑制甲状腺癌BCPAP细胞增殖、迁徙、侵袭的机制。方法:Westernblot实验检测人正常甲状腺细胞(Nthy-ori3-1细胞)与甲状腺癌BCPAP细胞中erα、erβ的蛋白表达,CCK-8实验检测... 详细信息

目的:观察熊果酸对雌激素受体erα、erβ表达的影响,研究熊果酸抑制甲状腺癌BCPAP细胞增殖、迁徙、侵袭的机制。方法:Westernblot实验检测人正常甲状腺细胞(Nthy-ori3-1细胞)与甲状腺癌BCPAP细胞中erα、erβ的蛋白表达,CCK-8实验检测熊果酸对甲状腺癌BCPAP细胞增殖的影响,细胞划痕实验、Transwell实验检测熊果酸对甲状腺癌BCPAP细胞迁徙、侵袭能力的影响。Western blot实验检测熊果酸对甲状腺癌BCPAP细胞雌激素受体erα、erβ表达的影响。结果:Nthy-ori3-1细胞与BCPAP细胞比较,erα的表达水平较低(Perβ的表达水平较高(Perα表达水平低于B0组(Perβ表达水平高于B0组(Perα、erβ降低甲状腺癌BCPAP细胞增殖、迁徙、侵袭的能力。

关键词：甲状腺癌BCPAP细胞熊果酸 erα erβ 细胞增殖细胞迁徙细胞侵袭

Bidirectional regulation of angiogenesis by phytoestrogens through estrogen receptor-mediated signaling networks

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Chinese Journal of Natural Medicines 2016年第4期14卷 241-254页

作者： LIU Hai-Xin WANG Yu LU Qing YANG Ming-Zhu FAN Guan-Wei KARAS Richard H GAO Xiu-Mei ZHU Yan Tianjin State Key Laboratory of Modern Chinese Medicine Tianjin University of Traditional Chinese Medicine Research and Development Center of Traditional Chinese Medicine Tianjin International Joint Academy of Biotechnology & Medicine Molecular Cardiology Research Institute Tufts Medical Center

Sex hormone estrogen is one of the most active intrinsic angiogenesis regulators; its therapeutic use has been limited due to its carcinogenic potential. Plant-derived phytoestrogens are attractive alternatives, but reports on their angiogenic activities often lack in-depth analysis and sometimes are controversial. Herein, we report a data-mining study with the existing literature, using IPA system to classify and characterize phytoestrogens based on their angiogenic properties and pharmacological consequences. We found that pro-angiogenic phytoestrogens functioned predominantly as cardiovascular protectors whereas anti-angiogenic phytoestrogens played a role in cancer prevention and therapy. This bidirectional regulation were shown to be target-selective and, for the most part, estrogen-receptor-dependent. The transactivation properties of erα and erβ by phytoestrogens were examined in the context of angiogenesis-related gene transcription. erα and erβ were shown to signal in opposite ways when complexed with the phytoestrogen for bidirectional regulation of angiogenesis. With erα, phytoestrogen activated or inhibited transcription of some angiogenesis-related genes, resulting in the promotion of angiogenesis, whereas, with erβ, phytoestrogen regulated transcription of angiogenesis-related genes, resulting in inhibition of angiogenesis. Therefore, the selectivity of phytoestrogen to erα and erβ may be critical in the balance of pro- or anti-angiogenesis process.

关键词： Phytoestrogen Selective estrogen receptor modifies(SerMs) erα erβ Bidirectional regulation of angiogenesis IPA

Inhibitory Effect of Isoflavones on Prostate Cancer Cells and PTEN Gene

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Biomedical and Environmental Sciences 2006年第1期19卷 35-41页

作者： FENG CAO TAI-YI JIN YUAN-FEN ZHOU Department of Occupational Health and Toxicology School of Public Health Fudan University Shanghai 200032 China

Objective To explore the mechanisms by which genistein and daidzein inhibit the growth of prostate cancer cells. Methods LNCaP and PC-3 cells were exposed to genistein and daldzein and cell viability was determined by MTF assay and cytotoxicity of the drugs by LDH test. Flow cytometry （FCM） was used to assess the cell cycle in LNCaP and PC-3 cells. Reverse transcription-polymerase chain reaction （RT-PCR） was applied to examine the expression of PTEN gene （a tumor suppressor gene）, estrogen receptor alpha gene （erα）, estrogen receptor beta gene （erβ）, androgen receptor gene （AR） and vascular endothelial growth factor gene （VEGF）. Results The viability of PC-3 and LNCaP cells decreased with increasing concentrations and exposure time of genistein and daidzein. Genistein increased G2/M phase cells in PC 3 cells while decreased S phase cells in LNCaP cells in a dose-dependent manner. Daidzein exerted no influence on the cell cycle of LNCaP and PC-3 cells, but the apoptosis percentage of LNCaP cells was elevated significantly by daidzein, Genistein induced the expression of PTEN gene in PC-3 and LNCaP cells. Daidzein induced the expression of PTEN gene in LNCaP but not in PC-3 cells. The expression of VEGF, erα and erβ genes decreased and AR gene was not expressed after incubation with genistein and daldzein in PC-3 cells. In LNCaP cells, the expression of VEGF and AR gene decreased but there was no change in the expression of erα and erβ gene after incubation with genistein and daidzein. Conclusion Genistein and daidzein exert a timeand dose-dependent inhibitory effect on PC-3 and LNCaP cells. The down-regulation of er gene by daidzein influences the growth of PC-3 ceils directly, The inhibition of PC-3 cells by genistein and that of LNCaP cells by genistein and daidzein may be via Alct pathway that is repressed by PTEN gene, which subsequently down-regulates the expression of AR and VEGF genes. Our results suggest that the expression of PTEN gene plays a key role and several pathways may be involved in the suppressi

关键词： Isoflavones Genistein Daidzein PC-3 LNCaP PTEN erα erβ VEGF

甘加型藏羊发情周期下丘脑-垂体-卵巢轴中erβmRNA及其蛋白的表达

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浙江农业学报 2022年第1期34卷 10-16页

作者：包莹莹陈卫刚葛闻博何玉琴杨志杰周凯仁杨大鹏杨亚文刘莉莉甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

为阐明甘加型藏羊(Ovis arise)发情周期下丘脑-垂体-卵巢(hypothalamic-pituitary-ovarian axis,HPO)轴中雌激素受体β(estrogen receptorβ,erβ)mRNA和蛋白的表达及分布,本试验选取健康且在发情周期内的甘加型藏羊32只,运用qRT-PCR、Western blot技术和免疫组织化学染色法检测甘加型藏羊发情周期erβmRNA及蛋白在HPO轴中的表达和分布差异。结果显示,甘加型藏羊整个发情周期(发情前期、发情期、发情后期及间情期)erβmRNA及其蛋白在HPO轴中均有表达和分布。下丘脑中erβmRNA及其蛋白在下丘脑中发情前期表达最多,显著高于其他3个时期(PerβmRNA及蛋白均在发情前期表达最高,与其他3个时期差异显著(Perβ阳性表达主要分布在下丘脑大神经元胞体和轴突中;在垂体中多分布在远侧部及中间部嗜酸性细胞胞浆中,胞核中分布较少;在卵巢中,生长卵泡颗粒细胞胞浆和胞核、卵泡内膜细胞及黄体细胞胞浆中均有分布。erβmRNA及其蛋白在甘加型藏羊发情周期HPO轴的差异性表达表明雌激素受体β参与调节甘加型藏羊的生殖生理活动。

关键词：甘加型藏羊 erβ 下丘脑-垂体-卵巢轴发情周期

子宫内膜样腺癌中PLAGL1和erβ的表达及临床意义

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临床与实验病理学杂志 2022年第5期38卷 543-548页

作者：沈玉婷罗文武赵荣荣吴正升安徽医科大学第一附属医院病理科合肥230022 安徽医科大学病理学教研室合肥230032

目的探讨多形性腺瘤基因L1(pleomorphic adenoma gene like-1,PLAGL1)和雌激素受体(estrogen receptorβ,erβ)在子宫内膜样腺癌(uterine endometrioid adenocarcinoma,UTEA)中的表达及两者与临床病理特征的关系。方法筛选肿瘤基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)中子宫内膜癌(uterine corpus endometrial carcinoma,UCEC)及正常子宫内膜组织中的差异表达基因;采用UALCAN数据库分析PLAGL1和ESR2 mRNA在UCEC及正常组织中的表达。采用免疫组化法检测84例UTEA及43例癌旁正常子宫内膜中PLAGL1和erβ表达,分析两者与UTEA临床病理特征的关系及相关性。结果TCGA及UALCAN数据库分析显示:UCEC中PLAGL1 mRNA表达显著低于正常子宫内膜组织(P0.05)。UTEA中PLAGL1高表达率为34.5%,显著低于正常组织(74.4%,Perβ高表达率为39.3%,与正常组织差异无显著性(34.9%,P>0.05);UTEA中PLAGL1与erβ表达呈正相关(r=0.236,P0.05);erβ表达与患者年龄、绝经状态、组织学分级、临床分期、肿瘤累及子宫颈、肌层浸润深度、淋巴结转移和p53错义突变均无关(P均>0.05)。结论UTEA中PLAGL1蛋白表达显著降低,PLAGL1和erβ异常表达可能联合参与UTEA的发生、发展。

关键词：子宫肿瘤子宫内膜样腺癌 PLAGL1 erβ 免疫组织化学

erβ通过NF-κB/IL-8信号通路在乳腺癌发生发展中作用探讨

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ERβ通过NF-κB/IL-8信号通路在乳腺癌发生发展中作用探讨

作者：姚瑶青岛大学

学位级别：硕士

目的:雌激素受体β(erβ)已被证实在多种癌症中发挥抑癌作用,但其在乳腺癌中的作用机制尚不清楚,尤其是在三阴性乳腺癌(TNBC)中。erβ的发现要求对所有目标组织和包括人乳腺癌在内的各种雌激素相关疾病中的雌激素作用进行全面的重新评... 详细信息

目的:雌激素受体β(erβ)已被证实在多种癌症中发挥抑癌作用,但其在乳腺癌中的作用机制尚不清楚,尤其是在三阴性乳腺癌(TNBC)中。erβ的发现要求对所有目标组织和包括人乳腺癌在内的各种雌激素相关疾病中的雌激素作用进行全面的重新评估。目前临床中对于er的表达评估主要取决于er α,erβ的地位尚显不足。本研究通过检测er β在乳腺癌中的表达,并且观察er β对乳腺癌细胞的功能影响,探寻乳腺癌靶向治疗的靶点。第一部分乳腺癌患者癌组织与癌旁组织中erβ及IL-8的表达方法:(1)收集新鲜的未经新辅助化疗的乳腺癌患者癌组织及癌旁组织病理标本,共计40对。采用Western Blot和qRT-PCR检测erβ及IL-8在两者中的蛋白和mRNA水平的表达;(2)采用SPSS 26.0软件对实验结果进行统计学分析。结果:(1)Western Blot检测结果显示:在蛋白水平上,癌旁组织中erβ的表达较癌组织明显升高(t=5.352,Perβ的表达水平升高并且IL-8的表达水平降低,两者负相关(r=-0.8584,Perβ表达水平降低,同时IL-8表达水平升高。癌旁组织中结果相反。二者的表达量呈负相关。第二部分 erβ在乳腺癌细胞中的作用研究方法:(1)使用过表达慢病毒构建乳腺癌细胞系(BCC)MCF-7和MDA-MB-231稳转株;(2)使用Cell Counting Kit-8(CCK-8)、平板克隆和细胞凋亡测定来检测erβ在体外对BCCs活力的影响。(3)划痕实验和Transwell实验观察erβ对BCCs迁移能力的影响;(4)WesternBlot检测相关蛋白表达量;(5)SPSS 26.0软件对实验结果进行统计学分析。结果:(1)CCK-8结果显示:erβ过表达组的细胞活力明显低于control组和vector组(MCF-7:F时间=1138,F组别=611.4,F时间×组别=136.2,Perβ过表达组的细胞增殖能力明显低于control组和vector组(MCF-7:F=151.9,Perβ过表达组的细胞凋亡率明显高于control组和vector组(MCF-7:F=1662,Perβ 过表达组的迁移能力明显低于 control 组和 vector 组(MCF-7:F 划痕实验=337.1,FTranwell=158.7,Pern Blot检测结果显示:erβ过表达组凋亡相关蛋白表达量明显高于control组和vector组,抗凋亡相关蛋白明显低于 control 组和 vector 组(MCF-7:FBax=87.93,FBcl-2=152.0,FCleaved Caspase-3=147.8,Perβ表达的升高引起IL-8表达的降低。erβ抑制了乳腺癌细胞的细胞活力、增殖及迁移能力,促使乳腺癌细胞发生凋亡。第三部分erβ通过NF-κB/IL-8信号通路轴来调控乳腺癌细胞方法:(1)NF-κB信号通路阻断剂吡咯烷二硫代氨基甲酸铵盐(PDTC)以及外源性IL-8分别处理control组及erβ过表达组的细胞;(2)使用Cell Counting Kit-8(CCK-8)、平板克隆和细胞凋亡测定来检测PDTC及IL-8在体外对BCCs活力的影响。(3)通过划痕实验和Transwell分析检测PDTC及IL-8对BCCs迁移能力的影响;(4)Western Blot检测相关蛋白表达量;(4)SPSS 26.0软件对实验结果进行统计学分析。结果:(1)CCK-8结果显示:PDTC处理组的细胞活力明显低于control组和vector组(MCF-7:F时间=1298,F组别=734.4,F时间×组别=173.2,Perβ+IL-8组的细胞活力介于control组和erβ过表达组之间,较erβ过表

关键词： erβ 乳腺癌 IL-8 NF-κ B 凋亡

子宫体内膜样腺癌PLAGL1和erβ的表达及临床意义

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子宫体内膜样腺癌PLAGL1和ERβ的表达及临床意义

作者：沈玉婷安徽医科大学

学位级别：硕士

背景:子宫内膜癌（uterine corpus endometrial carcinoma,UCEC）是女性生殖系统常见的恶性肿瘤,近年来其发病率呈上升趋势,发病年龄趋向低龄化。UCEC起源于子宫内膜腺体,其中子宫内膜样腺癌（uterine endometrioid adenocarcinoma,UTE... 详细信息

背景:子宫内膜癌（uterine corpus endometrial carcinoma,UCEC）是女性生殖系统常见的恶性肿瘤,近年来其发病率呈上升趋势,发病年龄趋向低龄化。UCEC起源于子宫内膜腺体,其中子宫内膜样腺癌（uterine endometrioid adenocarcinoma,UTEA）是其最常见的病理类型,2009年FIGO标准根据组织结构及细胞核特征将其分为3级,即高分化（I级）、中分化（II级）、低分化（III级）。目前手术切除全子宫、双侧输卵管及卵巢是早期UCEC的首选治疗手段,晚期/复发性UCEC首选全身化学治疗。对于一部分有生育要求、手术禁忌或失去手术机会的女性患者而言,探寻理想的分子标记物对于UCEC的非手术治疗及预后评估具有重要意义。多形性腺瘤基因L1（pleomorphic adenoma gene like-1,PLAGL1）是多形性腺瘤基因（pleomorphic adenoma gene,PLAG）家族成员之一,编码同名锌指蛋白,通过多种途径阻滞细胞周期、介导细胞凋亡,与细胞的多种生理功能及病理状态密切相关。雌激素受体2（estrogen receptor 2,ESR2）是雌激素受体家族和核受体转录因子超家族的成员,编码雌激素受体β蛋白（estrogen receptorβ,erβ）,在与17-雌二醇或相关配体结合后可抑制其他雌激素受体家族成员的活性,在UCEC中通过拮抗雌激素发挥肿瘤抑制作用。本研究探讨PLAGL1和erβ在UTEA中的表达、相关性及其与患者临床病理特征的关系,旨在为UTEA的早期诊断、个性化治疗及预后评估提供参考。目的:1)探讨PLAGL1和erβ在UTEA中的表达及其与患者临床病理特征的关系;2)分析UTEA中PLAGL1和erβ表达水平的相关性。方法:1)筛选肿瘤基因组图谱（the cancer genome atlas,TCGA）中UCEC及正常子宫内膜组织中差异表达基因,使用UALCAN数据库分析PLAGL1和ESR2 m RNA在UCEC及正常子宫内膜组织中的表达;2)收集84例UTEA及43例癌旁正常子宫内膜组织石蜡样本;采用免疫组织化学法检测石蜡样本PLAGL1和erβ的表达,分析其与UTEA临床病理特征的关系及PLAGL1和erβ在UTEA中表达水平的相关性。结果:1)UCEC中PLAGL1 m RNA表达显著低于正常子宫内膜组织（P＜0.01）,而正常子宫内膜组织和UCEC中ESR2 m RNA的表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）;2)UTEA中PLAGL1高表达率为34.5%,显著低于癌旁组织（74.4%,P＜0.01）;erβ高表达率为39.3%,与癌旁组织差异无显著性（34.9%,P＞0.05）;3)PLAGL1蛋白表达水平与UTEA肿瘤分级、临床分期、肿瘤累及宫颈、肌层浸润深度、有无淋巴结转移和p53错义突变均显著相关（P均＜0.05）,与患者年龄及绝经状态无关（P均＞0.05）;erβ表达水平与UTEA患者年龄、绝经状态、肿瘤分级、临床分期、肿瘤累及宫颈、肌层浸润深度、有无淋巴结转移和p53错义突变均无关（P均＞0.05）;4)UTEA中PLAGL1与erβ表达水平呈正相关（r=0.236,P＜0.05）。结论:UTEA中PLAGL1蛋白表达水平显著降低,可作为UTEA病理诊断及预后评估的分子标志物;PLAGL1和erβ异常表达可能联合参与UTEA的发生与进展。

关键词：子宫肿瘤子宫内膜样腺癌 PLAGL1 erβ

补骨脂提取物对APP/PS1小鼠学习记忆能力及海马中雌激素受体表达的影响

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中药材 2022年第7期45卷 1699-1704页

作者：武凤刘俊岑徐红丹胡晶徐艳明张宁刘斌黑龙江中医药大学基础医学院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学药学院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学佳木斯学院黑龙江佳木斯154007 无锡卫生高等职业技术学校江苏无锡214028

目的:考察补骨脂提取物对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力的改善作用及其与雌激素受体β(erβ)/细胞外调节蛋白激酶(erK)信号通路的内在联系。方法:将60只3月龄雄性APP/PS1小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐(0.65 mg/kg)组、抗脑衰胶囊(0... 详细信息

目的:考察补骨脂提取物对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力的改善作用及其与雌激素受体β(erβ)/细胞外调节蛋白激酶(erK)信号通路的内在联系。方法:将60只3月龄雄性APP/PS1小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐(0.65 mg/kg)组、抗脑衰胶囊(0.585 g/kg)组及补骨脂提取物(0.5 g/kg)组,另将15只同背景、同月龄雄性C57小鼠作为正常对照组。新物体识别实验观察各组小鼠新物体识别指数;水迷宫实验观察各组小鼠穿越平台次数及靶象限停留时间;透射电镜法、HE染色法观察小鼠海马CA3区神经元形态;免疫组化法检测小鼠海马CA3区erα、erβ表达;Western Blot检测海马中erβ蛋白表达及p-erK/erK水平。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠新物体识别指数显著降低,定位航行实验潜伏期显著延长,穿越平台次数及靶象限停留时间显著减少(Perα、erβ蛋白表达及p-erK/erK水平显著降低(Perα、erβ蛋白表达及p-erK/erK水平显著升高(Perβ/erK信号通路有关。

关键词：补骨脂提取物阿尔茨海默病学习记忆 erβ erK

二至丸对卵巢早衰大鼠治疗作用及机制的实验研究

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中华中医药学刊 2022年第7期40卷 145-149,I0025-I0027页

作者：陈峰荣周彤尚坤长春中医药大学基础医学院吉林长春130117

目的探究二至丸对卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)大鼠卵巢功能的恢复及其作用机制。方法将42只雌性SPF级大鼠随机分成6组,除空白组外,其余各组连续14 d给予雷公藤多苷50 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,建立POF模型。设置二至丸高... 详细信息

目的探究二至丸对卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)大鼠卵巢功能的恢复及其作用机制。方法将42只雌性SPF级大鼠随机分成6组,除空白组外,其余各组连续14 d给予雷公藤多苷50 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,建立POF模型。设置二至丸高、中、低剂量组进行治疗,阳性药物选择戊酸雌二醇。观察记录大鼠动情周期,测量大鼠体质量及子宫、卵巢指数;HE染色法观察大鼠子宫及卵巢细胞组织形态学的改变,ELISA法检测各组血清血孕酮(P)、雌激素(E)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)的水平,Western blot法检测卵巢及子宫中的erβ表达水平、ImageJ软件处理分析erβ蛋白的灰度值。结果与空白组相比,模型组大鼠卵巢指数、子宫指数均较为下降(Perβ相对表达量较空白组低(Perβ相对表达量呈升高趋势(Perβ的表达,从而刺激卵泡生长以及增加子宫腺体数,进而保护和改善卵巢的功能。

关键词：二至丸卵巢早衰大鼠作用机制 erβ