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Molecular Cloning and Characterization of a Candidate Plant Growth-Related and Time-Keeping Constitutive Cell Surface Hydroquinone (NADH) Oxidase (enox1) from <i>Arabidopsis lyrata</i>

引用

Advances in Biological Chemistry 2015年第1期5卷 1-15页

作者： Xiaoyu Tang Laura M. C. Ades Dorothy M. Morré D. James Morré MorNuCo Inc. Purdue Research Park West Lafayette IN USA

enox (ECTO-NOX) proteins are proteins of the external surface of the plasma membrane that catalyze oxidation of both NADH and hydroquinones as well as carry out protein disulfidethiol interchange. They exhibit both prion-like and time-keeping (clock) properties. The oxidative and interchange activities alternate to generate a regular period of 24 min in length. Here we report the cloning, expression, and characterization of a plant candidate constitutive enox (CNOX or enox1) protein from Arabidopsis lyrata. The gene encoding the 335 (165) amino acid protein is found in accession XP-002882467. Functional motifs characteristics of enox proteins previously identified by site-directed mutagenesis and present in the candidate enox1 protein from plants include adenine nucleotide and copper binding motifs along with essential cysteines. However, the drug binding motif (EEMTE) sequence of human enox2 is absent. The activities of the recombinant protein expressed in E. coli were unaffected by capsaicin, EGCg, and other enox2-inhibiting substances. Periodic oxidative activity was exhibited both with NAD(P)H and reduced coenzyme Q as substrate. Bound copper was necessary for activity and activity was inhibited by the enox1-specific inhibitor simalikalactone D. Addition of melatonin phased the 24-min period such that the next complete period began 24 min after the melatonin addition as appeared to be characteristic of enox1 activities in general. Periodic protein disulfide-thiol interchange activity also was demonstrated along with the 2 oxidative plus 3 interchange activity pattern characteristics of the 24-min enox1 protein period. Concentrated solutions of the purified plant enox1 protein formed insoluble aggregates, devoid of enzymatic activity, resembling amyloid. Activity was restored to aggregate preparations by isoelectric focusing.

关键词： enox1 ECTO-NOX Proteins Plant Growth Hydroquinone (NADH) Oxidation Plasma Membrane Electron Transport Arabadopsis lyrata

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与鸡蛋品质相关三个基因的表达分析

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中国家禽 2012年第20期34卷 10-13页

作者：樊艳凤刘文博侯卓成杨宁中国农业大学动物科技学院北京100193

本研究结合全基因组关联分析结果筛选出3个与鸡蛋品质相关的候选基因,分别为组织蛋白酶B基因(CTSB)、H-钙黏蛋白13基因(CDH13)和胞外吡啶核苷酸氧化酶二硫键巯基交换酶基因(enox1),进而研究其RNA表达情况是否与表型性状之间存在关联。在... 详细信息

本研究结合全基因组关联分析结果筛选出3个与鸡蛋品质相关的候选基因,分别为组织蛋白酶B基因(CTSB)、H-钙黏蛋白13基因(CDH13)和胞外吡啶核苷酸氧化酶二硫键巯基交换酶基因(enox1),进而研究其RNA表达情况是否与表型性状之间存在关联。在"农大3号"矮小型褐壳蛋鸡群体中,这3个基因无论是SNP基因分型还是表型值分类,其表达水平与相应的性状都没有显著相关。但在白来航鸡群体中与蛋壳比例对应的基因CTSB在按表型分类时,表达量差异接近显著(P=0.05),且两者相关达到显著水平。

关键词：鸡蛋品质 CTSB CDH13 enox1 表达分析

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