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一些氨基酸对产甘油假丝酵母甘油生产的促进作用

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生物工程学报 2006年第1期22卷 138-143页

作者：谢涛方慧英诸葛健江南大学工业生物技术教育部重点实验室无锡214036

以emp途径与TCA循环中间代谢物的添加为对照,研究在尿素为氮源的产甘油假丝酵母发酵过程中添加氨基酸对甘油产量的影响。结果表明:对甘油产量有强促进作用的氨基酸有谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、赖氨酸、酪氨酸、脯... 详细信息

以emp途径与TCA循环中间代谢物的添加为对照,研究在尿素为氮源的产甘油假丝酵母发酵过程中添加氨基酸对甘油产量的影响。结果表明:对甘油产量有强促进作用的氨基酸有谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、赖氨酸、酪氨酸、脯氨酸、组氨酸和丝氨酸,其最适添加浓度在0.26～0.45g/L之间,丙酮酸、α_酮戊二酸、草酰乙酸、柠檬酸和琥珀酸的最适添加浓度在0.24～0.42g/L之间;赖氨酸最适于在0h添加,丙酮酸和草酰乙酸在第14h,谷氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、酪氨酸、甘氨酸、α_酮戊二酸和琥珀酸在第30h,天冬酰胺、丝氨酸和柠檬酸在第48h;在最适条件下添加这些促进剂,甘油产量均呈显著增加趋势,转化率和增加率分别达到60%和16%以上。氨基酸的作用机理为其脱氨形成的碳骨架经特定的分解代谢途径进入TCA循环,使其强化,导致碳代谢流在3_磷酸甘油醛节点处发生转移,使甘油合成途径的代谢流增加。

关键词：氨基酸产甘油假丝酵母甘油生产 emp途径 TCA循环中间代谢物

系统代谢工程改造谷氨酸棒杆菌高产L-丙氨酸

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食品与发酵工业 2023年第21期49卷 9-15,I0001,I0002页

作者：吴晨王泽婷赵桂红吕庚承王非傲刘月香陈宁李燕军天津科技大学生物工程学院天津300457 天津科技大学工业发酵微生物教育部重点实验室天津300457 天津科技大学代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室天津300457

L-丙氨酸是一种重要的天然氨基酸,广泛应用于医药、食品、饲料等领域。目前,L-丙氨酸主要通过大肠杆菌来生产,开发安全、工业稳定的谷氨酸棒杆菌生产菌株具有重要的意义。该研究筛选了外源丙氨酸脱氢酶,在不以其他氨基酸为氨基供体的条... 详细信息

L-丙氨酸是一种重要的天然氨基酸,广泛应用于医药、食品、饲料等领域。目前,L-丙氨酸主要通过大肠杆菌来生产,开发安全、工业稳定的谷氨酸棒杆菌生产菌株具有重要的意义。该研究筛选了外源丙氨酸脱氢酶,在不以其他氨基酸为氨基供体的条件下高效率合成L-丙氨酸。强化非磷酸转移酶系统(phosphotransferase system,PTS)葡萄糖摄取途径,极大地促进了细胞的生长和L-丙氨酸的合成。引入异源Entner-Dondoroff途径,通过4步反应即可实现糖酵解途径10步反应供应前体物丙酮酸,进一步提高了L-丙氨酸的产量。此外,为了避免抗生素的使用和保证菌株的遗传稳定性,将关键基因整合到基因组上。最终工程菌株在5 L发酵罐发酵48 h产生104 g/L L-丙氨酸。该研究为利用谷氨酸棒杆菌工业化生产L-丙氨酸奠定了基础,同时为其他丙酮酸族产品的代谢工程研究提供了参考。

关键词：谷氨酸棒杆菌 L-丙氨酸丙氨酸脱氢酶非PTS系统 emp途径 ED途径

海藻多糖通过下调肝癌细胞Hep3B糖酵解途径抑制细胞增殖和迁移

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中国生物工程杂志 2017年第9期37卷 31-40页

作者：冯源唐云徐蕾谭海刚广东省高校功能蛋白质研究重点实验室暨南大学生命与健康工程研究院广州510632 天津科技大学食品与营养安全教育部实验室天津300222 上海交通大学生命科学技术学院上海200240 青岛农业大学食品科学与工程学院青岛266109

目的:探讨海藻多糖(algal polysaccharides,AP)对肝癌细胞Hep3B的增殖和迁移的影响及其可能的作用机制,为治疗肝癌提供新的思路。方法:(1)比较正常细胞与癌细胞中糖酵解(embden-meyerhof-parnas,emp)途径的表达差异,用紫外分光光度计比... 详细信息

目的:探讨海藻多糖(algal polysaccharides,AP)对肝癌细胞Hep3B的增殖和迁移的影响及其可能的作用机制,为治疗肝癌提供新的思路。方法:(1)比较正常细胞与癌细胞中糖酵解(embden-meyerhof-parnas,emp)途径的表达差异,用紫外分光光度计比色法检测emp限速酶酶活力:己糖激酶(hexokinase,HK)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK),用乳酸测定试剂盒测定emp产物:乳酸。(2)AP处理Hep3B后,检测emp表达水平变化。(3)AP处理细胞后,检测肝癌细胞Hep3B的增殖和迁移能力及对上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响,方法包括MTT、q PCR和Transwell小室实验。(4)MTT、Transwell和q PCR检测HK抑制剂3-溴丙酮酸(3-bromopyruvate,3-BrPA)对肝癌Hep3B细胞的活力和迁移能力及EMT的影响。(5)Western blot和相关试剂盒检测AP与3-BrPA分别处理细胞时,对emp水平及Akt通路的影响。(6)AP联合3-BrPA处理Hep B3后,检测HK和Akt信号通路表达水平及细胞活力和迁移的变化。结果:(1)癌细胞(Hep3B、He La、SW480)emp代谢水平均高于正常肝细胞(HL02),其中Hep3B差异最为显著。(2)AP能抑制Hep B细胞emp代谢水平,且抑制程度随着AP浓度升高而升高,存在浓度依赖性。(3)AP可抑制肝癌细胞Hep3B的增殖和迁移,且抑制EMT的发生。AP浓度为200mg/ml,处理时间为48h时,生长抑制率达(55±2.8)%,细胞迁移数为对照组的(32±2.9)%;(4)3-BrPA可下调Hep3B细胞HK活性,并抑制细胞活力与迁移,且抑制EMT的发生。200μmol/L 3-BrPA作用细胞48h后,与对照组相比,细胞活性下降了(52±5.8)%(Pemp代谢水平,且抑制Akt信号通路。(6)AP与3-BrPA联合处理Hep3B后,HK表达下降,显著抑制Akt信号通路,细胞活性和迁移能力均较AP单用组显著下降(Pemp代谢水平高于正常肝细胞,AP可下调Hep3B细胞emp代谢水平,低emp代谢水平可能通过下调EMT和Akt信号通路抑制Hep3B的增殖和迁移。当AP和3-BrPA联合应用时,抑制肝癌迁移和增殖效果更明显。

关键词：海藻多糖 emp途径 Hep3B细胞细胞增殖细胞迁移

乙草胺对不同品种水稻萌发生长期间呼吸代谢的影响

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华南农业大学学报 1999年第1期20卷 68-72页

作者：冉梦莲陈友荣肖敬平惠州大学生物系华南农业大学生物技术学院

用不同浓度乙草胺处理３个品种水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）（优质谷华籼占、杂优稻粤优青占和常规稻穗灵占）的发芽种子，水稻幼苗生长不同程度受抑制；华籼占为敏感品种，粤优青占为中抗品种，穗灵占为高抗品种各品种均在萌... 详细信息

用不同浓度乙草胺处理３个品种水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）（优质谷华籼占、杂优稻粤优青占和常规稻穗灵占）的发芽种子，水稻幼苗生长不同程度受抑制；华籼占为敏感品种，粤优青占为中抗品种，穗灵占为高抗品种各品种均在萌发后４～６ｄ出现１个呼吸高峰乙草胺对敏感品种的呼吸速率，特别是ＥＭＰ和ＰＰ途径所诱发的呼吸峰具有严重的抑制作用，而对抗性品种影响小我们认为，水稻萌发期间出现的呼吸峰受抑制。

关键词：水稻乙草胺呼吸峰 emp途径 PP途径

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谷氨酸发酵过程中乳酸的生成规律与策略

发酵科技通讯 2010年第3期39卷 45-47页

作者：付丙勇山东齐鲁味精集团茌平252100

1菌体代谢中与乳酸生成机制有关的三个基础知识1.1谷氨酸的发酵机制谷氨酸的生物合成途径主要涉及的是糖酵解（emp）和三羧酸循环（TCA）反应等。当谷氨酸发酵时,糖的降解分为两个阶段,第一阶段为emp途径，即一分子葡萄糖生成两分子的... 详细信息

1菌体代谢中与乳酸生成机制有关的三个基础知识1.1谷氨酸的发酵机制谷氨酸的生物合成途径主要涉及的是糖酵解（emp）和三羧酸循环（TCA）反应等。当谷氨酸发酵时,糖的降解分为两个阶段,第一阶段为emp途径，即一分子葡萄糖生成两分子的丙酮酸，

关键词：谷氨酸发酵发酵过程生成规律乳酸生物合成途径三羧酸循环 emp途径基础知识