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GPCR信号通路调控微环境的免疫特征和介导EB病毒相关淋巴瘤的发生

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Science Bulletin 2023年第21期68卷 2607-2619,M0006页

作者：熊杰代雨婷王文芳张浩王朝夫印彤程澍钟慧娟余山河姜璐王升跃方海张瑞红诸粤易红梅江旭峰陈佳艺王黎许彭鹏陈赛娟赵维莅 Shanghai Institute of Hematology State Key Laboratory of Medical GenomicsNational Research Center for Translational Medicine at ShanghaiRuijin Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200025China School of Life Sciences and Biotechnology Shanghai Jiao Tong UniversityShanghai 200240China Department of Otolaryngology Shanghai Ruijin HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200025China Department of Pathology Shanghai Ruijin HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200025China Department of Nuclear Medicine Shanghai Ruijin HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200025China Department of Radiation Shanghai Ruijin HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200025China Pôle de Recherches Sino-Français en Science du Vivant et Génomique Laboratory of Molecular PathologyShanghai 200025China

EB病毒(ebV)是多种肿瘤的致癌驱动因素.然而,肿瘤发生过程中病毒与肿瘤免疫相互作用的潜在机制仍不清楚.自然杀伤T细胞淋巴瘤(NKTCL)是研究ebV相关淋巴瘤发生的代表性疾病模型.本文整合基因组、转录组和蛋白质组数据,全面报道了NKTCL的... 详细信息

EB病毒(ebV)是多种肿瘤的致癌驱动因素.然而,肿瘤发生过程中病毒与肿瘤免疫相互作用的潜在机制仍不清楚.自然杀伤T细胞淋巴瘤(NKTCL)是研究ebV相关淋巴瘤发生的代表性疾病模型.本文整合基因组、转录组和蛋白质组数据,全面报道了NKTCL的蛋白质基因组特征.多组学分析发现ebV基因模式与免疫介导的致癌信号相关.单细胞转录组分析进一步描绘肿瘤微环境的免疫炎症、缺陷和沙漠三种表型特征,与肿瘤-免疫循环的不同设定点相关.ebV与转录因子相互作用引起GPCRome重编程,肿瘤细胞和免疫抑制细胞上CCR1的高表达,从而调控微环境中病毒与肿瘤的相互作用.在NKTCL类器官中,靶向CCR1可清除ebV、激活T细胞和杀伤淋巴瘤细胞,具有潜在的靶向治疗作用.综上,本研究首次发现了一种GPCR介导的肿瘤发生发展机制,将病毒分子的感知效应转化为针对ebV的特异性抗肿瘤疗法.

关键词：自然杀伤T细胞肿瘤微环境类器官疾病模型淋巴瘤细胞 EB病毒免疫抑制 ebV

基于微流控技术的磁免疫荧光法在EB病毒检测中的应用

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色谱 2022年第4期40卷 372-383页

作者：李俊豪韩冠华林晓涛吴力强钱纯亘徐军发广东医科大学医学技术学院检验医学研究所临床免疫学教研室广东东莞523808 深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司广东深圳518100

EB病毒(Epstein-Barr virus,ebV)的早期诊断能够降低患者发生重大疾病的风险。临床上常用的ebV抗体的检测方法存在耗时长、试剂消耗大和效率低等缺点。相比于传统的检测方法,微流控(microfluidics)技术具有高通量、试剂消耗少,污染少和... 详细信息

EB病毒(Epstein-Barr virus,ebV)的早期诊断能够降低患者发生重大疾病的风险。临床上常用的ebV抗体的检测方法存在耗时长、试剂消耗大和效率低等缺点。相比于传统的检测方法,微流控(microfluidics)技术具有高通量、试剂消耗少,污染少和自动化程度高等优点,磁免疫荧光技术具有检测效率高、信号强等优点,将两者的优势结合,能够弥补传统方法的不足。鉴于此,采用聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)作为芯片原材料,经过激光切割及真空热压加工工艺能够快速获得芯片。将包被抗原的磁珠及包被抗人抗体的荧光微球经过冷冻干燥工艺快速冻干成小球并嵌入芯片内,经过孵育和清洗后,进行检测。通过图像分析快速得到检测结果。通过精密度、特异性、剂量-反应曲线及检出限测试,进行性能验证。通过与化学发光免疫分析法(CLIA)检测的临床样本比对,进行方法学与临床应用评价。结果显示相对标准偏差(RSD)均小于10%。与多种常见的病原体抗体均无交叉反应。EB病毒衣壳抗原(Epstein-Barr viral capsid antigen,eb VCA)IgG项目的检出限为1.92 U/mL,线性范围为1.92~200 U/mL,阳性符合率为95.77%(68/71),阴性符合率为86%(43/50);eb VCA IgA项目的检出限为2.79 U/mL,线性范围为2.79~200 U/mL,阳性符合率为92%(46/50),阴性符合率为92.96%(66/71);EB病毒核心抗原1(Epstein-Barr nuclear antigen 1,eb NA1)IgG项目的检出限为3.13 U/mL,线性范围为3.13~200 U/mL,阳性符合率为92.96%(66/71),阴性符合率为92%(46/50);eb NA1 IgA项目的检出限为1.53 U/mL,线性范围为1.53~200 U/mL,阳性符合率为90%(45/50),阴性符合率为91.55%(65/71)。4个项目能在20 min内快速完成检测,且与临床上使用CLIA方法测试的结果具有良好的相关性,可以为临床提供一种快速、灵敏、简便、自动化程度高和易于基层推广的检测方法。

关键词：微流控磁免疫荧光 EB病毒快速检测

降结肠EB病毒阳性炎性滤泡树突状细胞肉瘤1例

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中华病理学杂志 2023年第9期52卷 967-969页

作者：张思进许文静齐兴峰徐培鑫余英豪曲利娟郑智勇叶显宗联勤保障部队第九〇〇医院病理科福州350025 联勤保障部队第九〇七医院病理科南平353000

EB病毒阳性炎性滤泡树突状细胞肉瘤是一种独立的疾病类型,发生于结肠罕见。患者女,30岁,产后8个月体检发现降结肠带蒂息肉样肿物。肿瘤大小2.8 cm×2.0 cm×1.9 cm,切面灰白色,质地韧。镜下观察:大量混杂炎性细胞背景中可见卵圆形、梭... 详细信息

EB病毒阳性炎性滤泡树突状细胞肉瘤是一种独立的疾病类型,发生于结肠罕见。患者女,30岁,产后8个月体检发现降结肠带蒂息肉样肿物。肿瘤大小2.8 cm×2.0 cm×1.9 cm,切面灰白色,质地韧。镜下观察:大量混杂炎性细胞背景中可见卵圆形、梭形肿瘤细胞或分散分布,或束状、旋涡状排列;肿瘤细胞界限不清,细胞质淡染,轻度嗜酸,细胞核具有异型性,部分呈空泡状,可见明显的小核仁。免疫组织化学染色结果示,肿瘤细胞表达滤泡树突状细胞标志物CD21、CD23、CD35、D2-40、SSTR2a,且EB病毒编码的RNA原位杂交阳性。病理诊断:EB病毒阳性炎性滤泡树突状细胞肉瘤。

关键词：带蒂息肉空泡状滤泡树突状细胞 EB病毒降结肠 CD35 肿瘤大小疾病类型

嵌合抗原受体T细胞靶向LMP1抗原治疗EB病毒阳性淋巴瘤的功能研究

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中华血液学杂志 2022年第3期43卷 229-234页

作者：何慧珍邢妍妍张瑜徐颖茜田征邢海燕唐克晶饶青王建祥王敏中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室国家血液系统疾病临床医学研究中心天津市血液病细胞治疗研究重点实验室天津300020

目的制备一种靶向LMP1抗原的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞),研究其对EB病毒(ebV)阳性淋巴瘤的免疫治疗作用。方法应用分子克隆技术构建二代LMP1 CAR表达质粒,通过慢病毒包装体系包装病毒后感染人T细胞,获得LMP1 CAR-T细胞,体外实验验证L... 详细信息

目的制备一种靶向LMP1抗原的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞),研究其对EB病毒(ebV)阳性淋巴瘤的免疫治疗作用。方法应用分子克隆技术构建二代LMP1 CAR表达质粒,通过慢病毒包装体系包装病毒后感染人T细胞,获得LMP1 CAR-T细胞,体外实验验证LMP1 CAR-T细胞对感染ebV后的LMP1阳性淋巴瘤细胞的特异性细胞毒性作用。结果①LMP1蛋白表达于ebV阳性的淋巴瘤细胞表面;②成功构建了二代LMP1 CAR慢病毒载体,感染人T细胞,获取LMP1 CAR-T细胞,感染效率大于80%;③LMP1 CAR-T细胞可特异性杀伤LMP1阳性淋巴瘤细胞,当效靶比按4∶1共培养48 h后,LMP1 CAR-T细胞对Raji细胞的杀伤作用增强,对Ramos细胞无明显杀伤作用;④与LMP1阳性淋巴瘤细胞按1∶1共培养5 h后,LMP1 CAR-T细胞处理组CD107a^(+)T细胞比例显著高于Vector-T细胞组[(13.25±2.94)%对(1.55±0.05)%,t=3.972,P=0.017],脱颗粒效果增强;⑤与LMP1阳性淋巴瘤细胞共培养后,LMP1 CAR-T细胞组CD69+、CD25+T细胞比例显高于Vector-T细胞组[(7.40±0.41)%对(3.48±0.47)%,t=6.268,P=0.003;(73.00±4.73)%对(57.67±2.60)%,t=2.842,P=0.047],活化效应增强。⑥与LMP1阳性淋巴瘤细胞共培养后,LMP1 CAR-T细胞组细胞因子分泌增强,高于Vector-T细胞组[IFN-γ:(703±73)ng/L对(422±87)ng/L,t=2.478,P=0.068;TNF-α:(215±35)ng/L对(125±2)ng/L,t=2.536,P=0.064]。结论该研究证实ebV阳性淋巴瘤细胞表面可特异表达LMP1蛋白,成功构建了LMP1 CAR慢病毒载体并感染人T细胞,成功获得LMP1 CAR-T细胞。体外实验证实:与LMP1阳性淋巴瘤细胞共培养后,LMP1 CAR-T细胞脱颗粒效果增强,活化效应增强,高效分泌细胞因子,可特异杀伤LMP1阳性淋巴瘤细胞,具有潜在的临床应用前景。

关键词： EB病毒 LMP1抗原嵌合抗原受体T细胞

EB病毒阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤合并浆细胞骨髓瘤1例

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中华病理学杂志 2023年第6期52卷 633-635页

作者：杨利群 James Huang 唐萍严莉罗丹华银康血液病理综合诊断西南中心成都华银医学检验所成都611700 Corewell Health William Beaumont University Hospital Royal OakMichigan 48073U S A

EB病毒阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤合并浆细胞骨髓瘤病例罕见,本文报道1例77岁男性病例,淋巴结和骨髓标本镜下病理组织学完全不同,各描述其组织学特点及免疫表型,提出诊断和鉴别诊断要点,旨在提高对本病的认识及发病机制的理解。

关键词：浆细胞骨髓瘤弥漫性大B细胞淋巴瘤男性病例骨髓标本诊断和鉴别诊断免疫表型 EB病毒镜下病理

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鼻咽EB病毒阳性的小细胞神经内分泌癌1例

中华病理学杂志 2024年第1期53卷 86-88页

作者：范冲竹李海南戴利军李智广东三九脑科医院病理科广州510510 广东省人民医院病理科广州510080

报道1例鼻咽EB病毒阳性的小细胞神经内分泌癌。患者男,24岁,因发现右侧上颈部肿块1个月余入院。头颈部影像学检查提示鼻咽癌并双侧咽旁间隙及颈部多发淋巴结转移。行鼻咽肿物活检术,术后病理诊断为EB病毒阳性的小细胞神经内分泌癌,镜下... 详细信息

报道1例鼻咽EB病毒阳性的小细胞神经内分泌癌。患者男,24岁,因发现右侧上颈部肿块1个月余入院。头颈部影像学检查提示鼻咽癌并双侧咽旁间隙及颈部多发淋巴结转移。行鼻咽肿物活检术,术后病理诊断为EB病毒阳性的小细胞神经内分泌癌,镜下肿瘤细胞体积小至中等大小,肿瘤细胞呈巢状或片状密集排列,细胞胞质稀少,核浓染,染色质呈颗粒状,核仁不明显,明显的铸型核,核分裂象易见。免疫组织化学:突触素、嗜铬粒素A及CD56阳性,广谱细胞角蛋白弱阳性。原位杂交EB病毒编码RNA强阳性。值得注意的是,本例治疗反应与已报道的鼻咽EB病毒阳性的大细胞神经内分泌癌相似,对放疗更为敏感。

关键词：咽旁间隙 EB病毒细胞胞质 CD56 治疗反应免疫组织化学活检术原位杂交

基于临床和增强CT影像组学的列线图术前预测EB病毒相关性胃癌的价值

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中华医学杂志 2022年第37期102卷 2956-2962页

作者：耿莉纵瑞龙王文涛赵厚亮郇艳美刘忠啸孟闫凯徐凯徐州医科大学附属医院影像科徐州221000 徐州市中心医院CT室徐州221000

目的探讨基于临床和增强CT影像组学的列线图术前预测EB病毒(ebV)相关性胃癌的价值。方法回顾性分析经手术病理证实的136例胃癌患者资料,男100例、女36例,年龄[M(Q_(1),Q_(3))]65(53,71)岁。根据ebV编码的小RNA原位杂交技术测定的结果分... 详细信息

目的探讨基于临床和增强CT影像组学的列线图术前预测EB病毒(ebV)相关性胃癌的价值。方法回顾性分析经手术病理证实的136例胃癌患者资料,男100例、女36例,年龄[M(Q_(1),Q_(3))]65(53,71)岁。根据ebV编码的小RNA原位杂交技术测定的结果分为ebV阳性组(n=32)和ebV阴性组(n=104)。所有患者术前均行多期CT增强扫描。按7∶3比例将患者分为训练组(n=95)和验证组(n=41)。利用MaZda软件提取增强CT图像的影像组学特征。采用组内相关系数(ICC)、方差分析和最小绝对收缩与选择算法(LASSO)回归进行影像组学特征降维,计算影像组学评分(Radscore)。联合临床资料、形态学特征及影像组学评分建立列线图模型。根据受试者工作特征曲线下面积(AUC)评价列线图的预测效能,决策曲线评价列线图的临床净获益,根据训练组和验证组的数据绘制校准曲线对列线图进行验证。结果经筛选后,最终得到6个最优的影像组学特征,包括灰度均值、偏度、S(1,0)熵和、S(1,1)对比度、99%灰度百分位、S(2,2)角二阶矩。在训练组和验证组中,ebV阳性组的Radscore高于ebV阴性组(训练组:3.78±0.83比2.80±0.98;验证组:3.81±0.47比2.94±0.95)(均PEB病毒相关性胃癌具有较好的预测效能。

关键词：放射学胃癌 EB病毒影像组学预测模型横断面研究

EB病毒阳性皮肤黏膜溃疡3例临床病理学分析

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中华病理学杂志 2023年第5期52卷 501-503页

作者：尹颖吴仕收杨平刘小倩高源宋立玲隋小龙于国华青岛大学附属烟台毓璜顶医院病理科烟台264000 青岛大学附属烟台毓璜顶医院血液内科烟台264000 滨州医学院第二临床医学院烟台264003

目的探讨EB病毒阳性皮肤黏膜溃疡(ebVMCU)的临床及病理学特征。方法回顾性分析2017至2021年烟台毓璜顶医院确诊的3例ebVMCU,采用免疫组织化学、原位杂交染色和分子重排技术检测,并复习相关文献。结果3例患者中男性1例,女性2例,年龄分别... 详细信息

目的探讨EB病毒阳性皮肤黏膜溃疡(ebVMCU)的临床及病理学特征。方法回顾性分析2017至2021年烟台毓璜顶医院确诊的3例ebVMCU,采用免疫组织化学、原位杂交染色和分子重排技术检测,并复习相关文献。结果3例患者中男性1例,女性2例,年龄分别为65、75和69岁。3例均为年龄相关性ebVMCU。病变局限于口腔黏膜2例、胃1例。1例有局部淋巴结肿大,3例均无肝、脾、骨髓受累,经保守治疗或化学药物治疗,预后均良好。3例ebVMCU患者在形态学上表现混杂的炎性细胞背景中见中至大的异型细胞浸润,部分形态似R-S细胞;异型细胞表达CD20、CD30、MUM1,Ki-67阳性指数高。3例病例原位杂交EB病毒编码的RNA(ebER)均阳性,免疫球蛋白分子重排结果均阴性。结论ebVMCU少见,发生在高龄、医源性免疫抑制和自身免疫缺陷人群,口腔黏膜是好发部位。3例病例未出现免疫球蛋白克隆性分子重排。

关键词：免疫球蛋白分子化学药物治疗局部淋巴结肿异型细胞年龄相关性阳性指数分子重排 EB病毒

异基因造血干细胞移植治疗Wiskott-Aldrich综合征继发EB病毒相关平滑肌肉瘤1例

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中华儿科杂志 2023年第5期61卷 464-466页

作者：玄立田冯顺乔杨吉刚李君惠张朝霞刘嵘首都儿科研究所附属儿童医院血液内科北京100020 首都医科大学附属北京友谊医院核医学科北京100050

患儿男,1月龄出现湿疹,4月龄时发现血小板减少,1岁5月龄全外显子测序发现WAS基因半合子突变,WAS蛋白阴性,诊断Wiskott-Aldrich综合征(WAS),间断予糖皮质激素及丙种球蛋白等治疗5年余。6岁余出现肝脏肿大,影像学提示为肝脏多发结节,肺、... 详细信息

患儿男,1月龄出现湿疹,4月龄时发现血小板减少,1岁5月龄全外显子测序发现WAS基因半合子突变,WAS蛋白阴性,诊断Wiskott-Aldrich综合征(WAS),间断予糖皮质激素及丙种球蛋白等治疗5年余。6岁余出现肝脏肿大,影像学提示为肝脏多发结节,肺、脾、淋巴结同时受累,完善肝脏结节穿刺活检,诊断为EB病毒相关平滑肌肉瘤;7岁余予后置环磷酰胺方案单倍体异基因造血干细胞移植治疗,随访1年,患儿免疫功能恢复,肿瘤得到控制。

关键词：平滑肌肉瘤异基因造血干细胞移植 EB病毒半合子糖皮质激素穿刺活检全外显子测序丙种球蛋白