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丹红化瘀口服液含药血清对氯化钴诱导***926细胞缺氧损伤的保护作用

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中成药 2021年第3期43卷 760-765页

作者：唐萍陈文培陆紫琪杨威林宝琴桂蜀华广州中医药大学中药学院广东广州510006 广东莱恩医药研究院有限公司广东省药物非临床评价研究企业重点实验室广东广州510990

目的研究丹红化瘀口服液含药血清对氯化钴(CoCl_(2))诱导人脐静脉内皮细胞(***926细胞)缺氧损伤的保护作用。方法建立CoCl_(2)诱导***926细胞缺氧模型,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,透射电镜观察细胞超微结构。试剂盒检测... 详细信息

目的研究丹红化瘀口服液含药血清对氯化钴(CoCl_(2))诱导人脐静脉内皮细胞(***926细胞)缺氧损伤的保护作用。方法建立CoCl_(2)诱导***926细胞缺氧模型,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,透射电镜观察细胞超微结构。试剂盒检测细胞上清液的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH⁃Px)活力和丙二醛(MDA)水平,RT⁃PCR检测缺氧诱导因子⁃1α(HIF⁃1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达。结果5%~10%丹红化瘀口服液含药血清能增强缺氧损伤细胞的活力(P细胞凋亡(P细胞结构损伤,降低细胞MDA水平和升高GSH⁃Px水平(P细胞HIF⁃1α、VEGF、VEGFR1、VEGFR2及iNOS mRNA表达(P926细胞缺氧损伤。

关键词：丹红化瘀口服液糖尿病视网膜病变 ea.hy926细胞缺氧抗氧化凋亡

苦荞麦总黄酮对软脂酸诱导的***926细胞Bcl-2表达的影响

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中国老年学杂志 2014年第19期34卷 5519-5520页

作者：柳春杨雪峰张瑞鹏赵丹玉王艳杰辽宁中医药大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110032

目的研究苦荞麦总黄酮对软脂酸诱导的人脐静脉血管内皮细胞株(***926)Bcl-2表达的影响。方法苦荞麦总黄酮作用于高浓度软脂酸刺激下的***926细胞,RT-PCR技术检测Bcl-2 mRNA表达水平,免疫组织化学方法检测Bcl-2蛋白的表达情况。结果与对... 详细信息

目的研究苦荞麦总黄酮对软脂酸诱导的人脐静脉血管内皮细胞株(***926)Bcl-2表达的影响。方法苦荞麦总黄酮作用于高浓度软脂酸刺激下的***926细胞,RT-PCR技术检测Bcl-2 mRNA表达水平,免疫组织化学方法检测Bcl-2蛋白的表达情况。结果与对照组相比,模型组细胞Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著降低(P细胞Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P0.05)。结论苦荞麦总黄酮可以促进***926细胞Bcl-2基因及蛋白的表达发挥抑制凋亡的作用。

关键词： ea.hy926细胞苦荞麦总黄酮软脂酸凋亡 Bcl-2

木犀草素对***926细胞Nrf2信号通路的激活作用及H_2O_2致氧化损伤的保护作用

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山东大学学报（医学版） 2014年第11期52卷 6-10,15页

作者：陈洪忠李海珍任冬梅山东省食品药品监督管理局审评认证中心山东济南250013 山东大学药学院天然产物化学生物学教育部重点实验室山东济南250012

目的研究木犀草素对人脐静脉内皮***926细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,及对H2O2诱导的细胞氧化损伤的保护作用。方法将细胞分成对照组、H2O2处理组、阳性药物(莱菔硫烷)组、不同浓度(5、10、20、40μmol/L)木犀草素组和不... 详细信息

目的研究木犀草素对人脐静脉内皮***926细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,及对H2O2诱导的细胞氧化损伤的保护作用。方法将细胞分成对照组、H2O2处理组、阳性药物(莱菔硫烷)组、不同浓度(5、10、20、40μmol/L)木犀草素组和不同浓度木犀草素(5、10、20、40μmol/L)+H2O2组,采用ARE荧光素酶报告基因、Western blotting和qRT-PCR确证木犀草素对Nrf2信号通路的影响;荧光标记流式细胞仪检测内源性活性氧(ROS)水平;MTT法评价木犀草素对H2O2诱导的***926细胞的保护作用。结果木犀草素能够剂量依赖性地增强ARE荧光强度,上调Nrf2及其下游基因血红素加氧酶-1(HO-1)、抗氧化酶NAD(P)H醌氧化还原酶-1(NQO1)和谷氨酸半胱氨酸连接酶调节亚基(GCLM)的蛋白和mRNA表达,降低内源性ROS水平;采用木犀草素和H2O2协同处理细胞,可表现出保护作用。结论木犀草素可以激活***926细胞Nrf2信号通路,抑制H2O2诱导的细胞毒性,对***926细胞具有氧化损伤保护作用。

关键词：木犀草素核因子E2相关因子2信号通路 H2O2 ea.hy926细胞

高糖高胆固醇诱导***926细胞凋亡中对HSPD1基因表达的影响

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华南师范大学学报（自然科学版） 2012年第2期44卷 107-110页

作者：温峰李志樑南方医科大学珠江医院心血管内科广东广州510080

分析高糖(25 mmol/L葡萄糖)和胆固醇(3.2 mmol/L)诱导***926细胞凋亡对HSPD1基因表达的影响,结果表明,随胆固醇浓度增加,***926细胞活性下降,呈浓度依赖性.0.8 mmol/L胆固醇高糖培养液培养12 h的细胞活性与正常对照组(高糖培养液+0 mmo... 详细信息

分析高糖(25 mmol/L葡萄糖)和胆固醇(3.2 mmol/L)诱导***926细胞凋亡对HSPD1基因表达的影响,结果表明,随胆固醇浓度增加,***926细胞活性下降,呈浓度依赖性.0.8 mmol/L胆固醇高糖培养液培养12 h的细胞活性与正常对照组(高糖培养液+0 mmol/L胆固醇)具显著性差异(P926细胞不同时间后,细胞活性呈时间依赖性下调,48 h后细胞大部分变圆,脱落.高糖高胆固醇处理的细胞大部分发生凋亡(50%),HSPD1基因表达显著上调.

关键词：高糖高胆固醇 ea.hy926细胞动脉硬化 HSPD1 细胞凋亡

红景天苷对模拟失重下过氧化氢诱导***926细胞凋亡的抑制作用

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作者：贾茗雯锦州医科大学

学位级别：硕士

目的失重或模拟失重可导致心血管功能失调,血管内皮功能异常在其中具有重要作用。研究证明,在模拟失重的条件下,诱导血管内皮功能异常中,氧化应激水平增加有非常关键作用。本实验的目的是研究模拟失重条件下,应用过氧化氢(HO)来刺激人... 详细信息

目的失重或模拟失重可导致心血管功能失调,血管内皮功能异常在其中具有重要作用。研究证明,在模拟失重的条件下,诱导血管内皮功能异常中,氧化应激水平增加有非常关键作用。本实验的目的是研究模拟失重条件下,应用过氧化氢(HO)来刺激人脐静脉内皮细胞(***926),探讨其对细胞凋亡的影响及其相关的机制,并对红景天苷的细胞保护作用及机制进行深入探讨。方法***926细胞,用10%的胎牛血清的DMEM高糖培养液在5%CO2,37℃的细胞培养箱内进行细胞培养,当细胞传代到四代后,随机分为对照组(Con72)、回转组(Z72),细胞回转72h后,两组细胞再随机分组,同时分别给予以下处理:(1)不给予HO刺激(Con72和Z72组);(2)给予HO刺激5h(Con72+HO和Z72+HO组);(3)HO刺激5h的同时给予红景天苷干预(C+HO+Sal和Z+HO+Sal组);(4)HO刺激5h的同时给予红景天苷和PI3K通路抑制剂LY-294002干预(C+HO+Sal+LY和Z+HO+Sal+LY组)。以流式细胞仪器的方法检测其细胞凋亡,采用二代测序技术对Con72、Con72+HO、Z72和Z72+HO四组细胞进行转录测序,筛选凋亡相关差异基因,并以生物信息学技术进行GO及KEGG分析,以RT-q PCR技术对筛选的差异基因进行验证。在此基础上,以RT-q PCR技术检测红景天苷作用下对差异基因表达的影响,分析其对抗模拟失重下HO诱导细胞凋亡的分子机制。结果通过流式细胞仪Annexin V-FITC/7-AAD法对细胞凋亡检测结果表明模拟失重条件下经过氧化氢刺激诱导***926细胞能够发生明显凋亡,红景天苷能够抑制模拟失重条件下过氧化氢诱导的细胞凋亡,起到保护***926细胞的功效。转录组测序筛选出的6个显著差异基因,分别为BCL-2A1、FAM196B、TMEM158、PPP1R16B、CXCL8、PPP1R3B。应用q RT-PCR技术验证发现BCL-2A1、FAM196B与转录组测序结果一致,其中BCL2A1为抗凋亡基因,FAM196B基因是促进性因子,能够促进细胞增殖。同时发现红景天苷干预后,BCL2A1、FAM196B基因显著增加,说明红景天苷可通过调控这2个基因发挥抗凋亡作用,保护模拟失重下过氧化氢诱导的内皮细胞凋亡。结论模拟失重下***926细胞经HO刺激后细胞凋亡率显著升高,中药红景天的有效活性成分红景天苷能够抑制模拟失重下HO刺激诱导的细胞凋亡,其机制与红景天苷调控BCL2A1及FAM196B基因表达相关。

关键词：红景天苷模拟失重过氧化氢 ea.hy926细胞细胞凋亡

罗布麻总黄酮及异槲皮苷抑制H2O2诱导***926细胞凋亡作用机制研究

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作者：朱美霞山西中医学院

学位级别：硕士

目的:本论文旨在以人脐静脉内皮融合细胞(***926 cell)为研究对象研究罗布麻总黄酮(Total Flavonoids of Folium Apocyni veneti TFF)及异槲皮苷(isoquercitrin ISO)对过氧化氢(hydrogen peroxide H2O2)诱导的***926细胞凋亡的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法:1.采用MTT法检测TFF及ISO对H2O2诱导的***926细胞活力的影响;2.运用Hoechst33342/PI双染、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术、线粒体膜电位检测试剂盒检测TFF及ISO对H2O2诱导的***926细胞凋亡的影响;3.应用免疫印迹(Western-blot)检测TFF及ISO对H2O2诱导***926细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3,-9及Mcl-1表达情况的影响,荧光定量PCR(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)检测TFF及ISO对H2O2诱导***926细胞凋亡相关基因caspase-3,-9及Mcl-1m RNA表达情况的影响;4.采用Western-blot检测TFF及ISO、PI3K抑制剂LY294002与GSK3β抑制剂SB216373作用后对PI3K/Akt通路中Akt、GSK3β磷酸化水平的影响及对Mcl-1的表达水平的影响。结果:***及ISO分别在浓度为4.5-144 mg/L和2.5-80μmol/L范围内对细胞没有毒性,H2O2浓度达到200μmol/L时,细胞活力降低至50%左右,TFF在浓度为9、18、36 mg/L时,ISO在浓度为5、10、20μmol/L时,能明显抑制H2O2诱导的***926细胞活力降低。***33342/PI荧光双染、Annexin V-FITC/PI双染流式术结果均表明,H2O2能明显使细胞凋亡率升高(P细胞凋亡率降低,且成剂量依赖性(P926细胞cleaved caspase-9,-3的表达升高(Peaved caspase-9,-3表达降低(P926细胞caspase-9,-3 m RNA的表达升高(P926细胞凋亡,其主要机制可能是通过激活PI3K/Akt信号通路,诱导GSK3β的磷酸化,降低GSK3β的活性,减少Mcl-1的泛素化降解,抑制caspase-3,-9的裂解活化,进而发挥抑制H2O2诱导的细胞凋亡作用。

关键词：罗布麻总黄酮异槲皮苷 ea.hy926细胞 PI3K/Akt/GSK3β 线粒体途径细胞凋亡机制

党参多糖对H_2O_2所致***926细胞氧化损伤的保护作用

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解放军药学学报 2018年第3期34卷 195-199,204页

作者：王慧云李义波谢荣丹张帆甘肃中医药大学甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究重点实验室甘肃兰州730000

目的研究党参多糖对低浓度过氧化氢(H2O2)刺激下***926细胞的保护作用。方法采用体外培养***926细胞,利用H_2O_2小剂量长时间刺激进行造模,并选用维生素E作为阳性对照组。采用MTT法检测细胞的增殖情况,光学显微镜观察细胞形态学的改变,... 详细信息

目的研究党参多糖对低浓度过氧化氢(H2O2)刺激下***926细胞的保护作用。方法采用体外培养***926细胞,利用H_2O_2小剂量长时间刺激进行造模,并选用维生素E作为阳性对照组。采用MTT法检测细胞的增殖情况,光学显微镜观察细胞形态学的改变,SA-β-半乳糖苷酶染色法检测细胞的衰老水平,流式细胞术检测细胞周期,比色法检测细胞细胞培养上清中一氧化氮含量及细胞内的超氧化物歧化酶、丙二醛的含量,ELISA检测细胞培养基中内皮素-1、诱导型一氧化氮合酶、内皮型一氧化氮合酶的水平,DCFH-DA检测细胞内活性氧的水平。结果党参多糖各浓度组、维生素E组与模型组比较细胞的形态均有不同程度改善。与模型组比较,党参多糖各浓度组、维生素E组细胞的存活率升高,细胞G1期比例下降,SA-β-半乳糖苷酶染色的细胞蓝染率下降,超氧化物歧化酶、一氧化氮、内皮型一氧化氮合酶的水平升高,丙二醛、诱导型一氧化氮合酶、内皮素-1、活性氧水平下降。结论党参多糖可能通过提高***926细胞的抗氧化能力、调控内皮素-1与一氧化氮的动态平衡发挥其对氧化损伤的保护作用。

关键词：党参多糖 ea.hy926细胞维生素E 氧化损伤

汉滩病毒感染***926细胞上调固有免疫相关分子表达的研究

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传染病信息 2020年第5期33卷 401-406页

作者：王晓艳李璟申焕君杜虹权会琴李光玉王平忠空军军医大学第二附属医院传染科西安710038 Department of Pathology The University of Texas Medical BranchAmericaGalveston 77555

目的探讨汉滩病毒(hantaan virus,HTNV)感染***926细胞诱导抗病毒固有免疫相关分子的表达,为建立HTNV感染的细胞模型提供依据。方法将HTNV感染***926细胞,利用间接免疫荧光和实时荧光定量PCR技术于不同感染时间段,检测***926细胞中模式... 详细信息

目的探讨汉滩病毒(hantaan virus,HTNV)感染***926细胞诱导抗病毒固有免疫相关分子的表达,为建立HTNV感染的细胞模型提供依据。方法将HTNV感染***926细胞,利用间接免疫荧光和实时荧光定量PCR技术于不同感染时间段,检测***926细胞中模式识别受体、细胞因子及抗病毒相关分子的mRNA表达水平。结果HTNV感染***926细胞后,随着感染时间的持续,核蛋白mRNA相对表达倍数显著上调,且不同感染时间段差异具有统计学意义(P926后,Toll样受体3、RIG-I和MDA5模式识别受体mRNA相对表达倍数均显著上调(P均细胞因子mRNA相对表达倍数均显著上调(P均926细胞后,可上调抗病毒固有免疫相关分子的表达,该细胞可以作为体外HTNV感染的细胞模型。

关键词：汉滩病毒 ea.hy926细胞固有免疫

苞叶雪莲粗提物对***926细胞缺氧损伤的保护作用

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湖北农业科学 2016年第1期55卷 167-169,175页

作者：李海丽卢永昌钱帅朱奎德青海民族大学化学与生命科学学院西宁810007 青海省植物化学资源重点实验室西宁810007

通过确定Na_2S_2O_4对***926细胞造成缺氧损伤的最佳浓度和时间点建立缺氧损伤模型,以只加Na_2S_2O4为对照组,添加不同浓度的苞叶雪莲(Saussurea obvallata)粗提物,从细胞形态和细胞生存率两个方面检测其抗缺氧作用,分析苞叶雪莲粗提物... 详细信息

通过确定Na_2S_2O_4对***926细胞造成缺氧损伤的最佳浓度和时间点建立缺氧损伤模型,以只加Na_2S_2O4为对照组,添加不同浓度的苞叶雪莲(Saussurea obvallata)粗提物,从细胞形态和细胞生存率两个方面检测其抗缺氧作用,分析苞叶雪莲粗提物对Na_2S_2O4造成***926细胞缺氧损伤的保护作用。结果表明,苞叶雪莲粗提物从1.25 mg/m L浓度开始呈剂量依赖性的增加了缺氧模型组中***926细胞的相对存活率,在10 mg/m L浓度下与Na_2S_2O4模型组相比,极显著增加了细胞存活率,是缺氧模型组的6.3倍,表明苞叶雪莲具有很强的抗缺氧损伤能力。

关键词：苞叶雪莲(Saussurea obvallata) ea.hy926细胞缺氧损伤