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HPV18 Utilizes Two Alternative Branch Sites for e6*I Splicing to Produce e7 Protein

Virologica Sinica 2019年第2期34卷 211-221页

作者： Ayslan Castro Brant Vladimir Majerciak Miguel Angelo Martins Moreira Zhi-Ming Zheng Tumor Virus RNA Biology Section RNA Biology Laboratory Center for Cancer Research National Cancer Institute NIH Frederick MD 21702 USA Genetics Post-Graduation Program Rio de Janeiro Federal University Rio de Janeiro Brazil Genetics Program Nacional Cancer Institute INCA Rio de Janeiro 20231-050 Brazil

Human papillomavirus 18(HPV18) e6 and e7 oncogenes are transcribed as a single bicistronic e6 e7 pre-mRNA. The e6 ORF region in the bicistronic e6 e7 pre-mRNA contains an intron. Splicing of this intron disrupts the e6 ORF integrity and produces a spliced e6*I RNA for efficient e7 translation. Here we report that the e6 intron has two overlapped branch point sequences(BPS) upstream of its 30 splice site, with an identical heptamer AACUAAC, for e6*I splicing. One heptamer has a branch site adenosine(underlined) at nt 384 and the other at nt 388. e6*I splicing efficiency correlates to the expression level of e6 and e7 proteins and depends on the selection of which branch site. In general, e6*I splicing prefers the 30 ss-proximal branch site at nt 388 over the distal branch site at nt 384. Inactivation of the nt 388 branch site was found to activate a cryptic acceptor site at nt 636 for aberrant RNA splicing. Together, these data suggest that HPV18 modulates its production ratio of e6 and e7 proteins by alternative selection of the two mapped branch sites for the e6*I splicing, which could be beneficial in its productive or oncogenic infection according to the host cell environment.

关键词： Human papillomavirus 18 (HPV18) HPV splicing Branch point e6,e7,e6 intron HPV oncogenes

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