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作者：霍苗苗福建医科大学

学位级别：硕士

【目的】本课题旨在观察DMP-1、e11、Sclerostin在高磷诱导的残肾大鼠血管钙化模型及高磷诱导的钙化血管平滑肌细胞中的表达，试图阐明CKD血管钙化的可能机制。通过硫代硫酸钠对高磷诱导的残肾大鼠的早期干预，探讨硫代硫酸钠对CKD... 详细信息

【目的】本课题旨在观察DMP-1、e11、Sclerostin在高磷诱导的残肾大鼠血管钙化模型及高磷诱导的钙化血管平滑肌细胞中的表达，试图阐明CKD血管钙化的可能机制。通过硫代硫酸钠对高磷诱导的残肾大鼠的早期干预，探讨硫代硫酸钠对CKD血管钙化的防治作用及其可能机制。【方法】 1.35只SD雄性大鼠分别行5/6肾切除（n=21）或假手术（n=14）,术后开始给予高磷或正常磷饮食16周。动物分为5组：（1）假手术+正常磷饮食（SNP）;（2）假手术+高磷饮食（SHP）;（3）残肾+正常磷饮食（NNP）;（4）残肾+高磷饮食，即血管钙化模型组（NHP）;（5）残肾+高磷饮食+硫代硫酸钠治疗组（THP）。正常磷饮食配方为：磷（0.9%），钙（1.2%），高磷饮食配方为：磷（1.2%），钙（1.6%），硫代硫酸钠予以腹腔注射，每周三次，对照组予以同等体积无菌注射用水腹腔注射。16周后，大鼠处死前测量尾动脉血压，收集尿量检测24h尿蛋白，取血检测血肌酐、尿素氮、血钙、血磷，eLISA法检测血清iPTH。处死后，取胸主动脉，采用He、Vonkossa和茜素红染色检测血管钙化程度，采用免疫组织化学方法和Western blot检测血管e11蛋白表达。RT-PCR方法检测DMP-1、e11、Sclerostin mRNA表达，Real-time PCR方法检测血管DMP-1mRNA表达。2.组织块贴壁法原代培养VSMC,倒置相差显微镜观察细胞形态及α-SMA免疫组化鉴定;3～8代VSMC用于实验，分为空白对照组（0.9mmol/L）、正常磷（1.3mmol/L）组、高磷（2.6mmol/L）组，培养第6天，通过茜素红染色检测钙沉积情况， RT-PCR和Real-time PCR技术检测DMP-1、e11、Sclerostin mRNA表达情况、Western Blot检测e11蛋白表达情况，所有实验至少重复3次。【结果】 1.高磷饮食16周后，与SNP大鼠相比，NHP组大鼠血肌酐、尿素氮、血磷、尿蛋白、iPTH以及动脉血压明显升高（P＜0.05）。经硫代硫酸钠治疗后，THP组大鼠血清肌酐、尿素氮、均较钙化组明显下降（P＜0.05）、血磷浓度、尿蛋白、iPTH以及血压均下降（P＜0.05）。 Von kossa染色显示，16周后SNP和SHP组大鼠主动脉未见明显的黑色钙盐沉积物， NNP组仅出现散在点状黑色钙盐沉积物，而NHP组大鼠主动脉出现明显的点状及线状的黑色钙盐沉积物，经硫代硫酸钠治疗后，THP组血管黑色钙盐沉积物明显减少。茜素红染色与Von kossa染色结果一致，阳性结果为橘红色钙盐沉积物。 RT-PCR显示，与SNP组相比，NHP组血管DMP-1、e11、Sclerostin的mRNA表达明显升高（P＜0.05），经硫代硫酸钠治疗后THP组血管DMP-1、e11、Sclerostin的mRNA表达较NHP组降低（P＜0.05）。Real-time PCR显示，与SNP组相比，NHP组血管DMP1mRNA表达明显升高（P＜0.05），经硫代硫酸钠治疗后THP组血管DMP1mRNA表达较NHP组降低（P＜0.05）。免疫组化染色显示，与SNP组相比，NHP组血管e11表达明显增加（P＜0.05），经硫代硫酸钠治疗后，THP组血管e11表达较NHP组明显减少（P＜0.05）。Westernblot显示，与SNP组相比，NHP组血管e11蛋白表达明显升高（P＜0.05），经硫代硫酸钠治疗后THP组血管e11蛋白表达较NHP组降低（P＜0.05）。 2.在高磷诱导的VSMC中，茜素红染色结果显示，与空白对照组和正常磷组相比，高磷组钙盐沉积明显升高（P﹤0.05）。RT-PCR和Real-Time PCR结果同样显示，高磷组VSMC DMP-1、e11、Sclerostin mRNA表达明显增加（P﹤0.05）。Western Blot检测VSMC e11蛋白表达,高磷组较空白对照组和正常磷组明显增加（P﹤0.05）。【结论】 1.5/6肾切除手术加高磷饮食喂养16周，可成功建立残肾大鼠血管钙化模型;高磷条件可在体外成功诱导大鼠VSMC钙化。骨细胞标志性蛋白DMP-1、e11、Sclerostin在钙化的血管和VSMC中表达增加，提示血管钙化过程中血管平滑肌细胞最终向骨细胞样细胞转分化。 2.硫代硫酸钠早期干预组DMP-1、e11、Sclerostin的表达降低，提示硫代硫酸钠可能通过下调来DMP-1、e11、Sclerostin的表达来减轻血管钙化。

关键词：残肾大鼠血管钙化血管平滑肌细胞DMP-1 e11 Sclerostin慢性肾脏病硫代硫酸钠治疗

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DMP1、e11和Sclerostin在高磷诱导钙化的血管平滑肌细胞中的表达

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中国中西医结合肾病杂志 2016年第4期17卷 303-306,I0002页

作者：霍苗苗余毅南京军区福州总医院(福建医科大学福总临床医学院)血液净化科福州350025 福建省福州市第二医院福州350025

目的：观察DMP1、e11和Sclerostin在高磷诱导钙化的血管平滑肌细胞（VSMC）中的表达,探讨VSMC钙化的可能机制。方法：组织块贴壁法原代培养VSMC,倒置相差显微镜观察细胞形态及α-SMA免疫组化鉴定;3~8代VSMC用于实验,分为空白对照组、正... 详细信息

目的：观察DMP1、e11和Sclerostin在高磷诱导钙化的血管平滑肌细胞（VSMC）中的表达,探讨VSMC钙化的可能机制。方法：组织块贴壁法原代培养VSMC,倒置相差显微镜观察细胞形态及α-SMA免疫组化鉴定;3~8代VSMC用于实验,分为空白对照组、正常磷组和高磷组（Pi分别为0.9、1.3和2.6 mmol/L）。培养第6天,茜素红染色检测钙沉积,RT-PCR或Real-time PCR检测DMP1、e11、Sclerostin mRNA表达,Western Blot检测e11蛋白表达。结果：与空白对照组和正常磷组相比,高磷组VSMC钙盐沉积明显增多;DMP1、e11和Sclerostin mRNA表达明显上调（P〈0.05）;e11蛋白表达明显增加（P〈0.05）。结论：骨细胞标志性蛋白DMP1、e11和Sclerostin在高磷诱导钙化的VSMC中表达增加,提示血管钙化过程中VSMC最终向骨细胞样细胞转分化。

关键词：血管钙化血管平滑肌细胞 DMP1 e11 Sclerostin

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中国船舶广船国际深中通道沉管隧道e11管节顺利过驳 004

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中国船舶报

作者：莫蕾露张奇

本报讯日前,中国船舶集团有限公司旗下广船国际深中通道GK01标项目部制造的深中通道沉管隧道e11管节钢壳顺利完成过驳。e1 1管节钢壳移位后周期为45天,在已完工管节钢壳中周期最短,而且总拼周期也仅用时83天,比计划要求提前了 7天,再... 详细信息

本报讯日前,中国船舶集团有限公司旗下广船国际深中通道GK01标项目部制造的深中通道沉管隧道e11管节钢壳顺利完成过驳。e1 1管节钢壳移位后周期为45天,在已完工管节钢壳中周期最短,而且总拼周期也仅用时83天,比计划要求提前了 7天,再次刷新纪录。根据业主方的计划要求,e11

关键词：广船国际 e11 沉管隧道

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大鼠成骨细胞和骨细胞表达的标志物——e11抗原的特性与克隆

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国际骨科学杂志 1996年第4期17卷 244-244页

作者：胡雷

本文报道了一种与成骨细胞和骨细胞反应的单克隆抗体(mAb)的制备和特性、编码e11抗原的cDNA克隆及对该抗原表达的分析。用大鼠成骨细胞株IRO10/30-mye3对6周龄雌性小鼠Balb/c进行免疫,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞P3X63 Ag8U.1融合。培... 详细信息

本文报道了一种与成骨细胞和骨细胞反应的单克隆抗体(mAb)的制备和特性、编码e11抗原的cDNA克隆及对该抗原表达的分析。用大鼠成骨细胞株IRO10/30-mye3对6周龄雌性小鼠Balb/c进行免疫,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞P3X63 Ag8U.1融合。培养10天后

关键词：骨细胞抗原 e11 标志物

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硫代硫酸钠早期干预对高磷诱导的残肾大鼠血管钙化的影响

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中华高血压杂志 2016年第4期24卷 348-353页

作者：余毅霍苗苗王琰南京军区福州总医院血液净化科福建福州350025

目的探讨硫代硫酸钠(STS)早期干预对高磷诱导的残肾大鼠血管钙化的影响。方法 SD雄性大鼠35只随机分为5组:假手术+正常磷喂食(SNP组);假手术+高磷喂食(SHP组);残肾+正常磷喂食(NNP组);残肾+高磷喂食(NHP组);残肾+高磷喂食+STS治疗组(THP... 详细信息

目的探讨硫代硫酸钠(STS)早期干预对高磷诱导的残肾大鼠血管钙化的影响。方法 SD雄性大鼠35只随机分为5组:假手术+正常磷喂食(SNP组);假手术+高磷喂食(SHP组);残肾+正常磷喂食(NNP组);残肾+高磷喂食(NHP组);残肾+高磷喂食+STS治疗组(THP组),每组7只。分别行5/6肾切除或假手术,术后开始给予高磷或正常磷喂食16周(THP组给予STS 0.4g/kg腹腔注射)。16周后,大鼠处死前测量尾动脉血压,检测24h尿蛋白、血肌酐、钙、磷和全段甲状旁腺激素(iPTH)。取胸主动脉,采用Von Kossa和茜素红染色检测血管钙化,逆转录聚合酶链反应检测血管e11 mRNA表达,免疫组织化学和Western blot检测e11蛋白表达。结果与SNP组大鼠比较,NHP组大鼠血压[收缩压(156.6±10.2)比(105.4±3.4),舒张压(102.4±6.3)比(72.8±1.8)mm Hg]、血肌酐[(144.8±18.7)比(39.2±5.9)μmol/L]、磷[(2.63±0.22)比(1.92±0.10)mmol/L]、iPTH[(374.2±23.6)比(97.0±9.0)ng/L]和尿蛋白[(172.8±38.2)比(56.8±15.6)mg/24h]明显升高(均P11.5)比(156.6±10.2),舒张压(91.0±6.4)比(102.4±6.3)mm Hg]、血肌酐[(96.5±16.3)比(144.8±18.7)μmol/L]、磷[(2.30±0.27)比(2.63±0.22)mmol/L]、iPTH[(260.6±46.0)比(374.2±23.6)ng/L]和尿蛋白[(92.5±36.6)比(172.8±38.2)mg/24h]下降(均Pe11mRNA和蛋白表达明显增加(均Pe11mRNA和蛋白表达较NHP组明显减少(均Pe11的表达,减轻高磷诱导的残肾大鼠的血管钙化。

关键词：血管钙化 e11 残肾大鼠硫代硫酸钠

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IDC DR平板探测器及相关故障维修

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医疗装备 2013年第1期26卷 89-90页

作者：李元俊杨开泰李斌云南省玉溪市人民医院设备科云南玉溪653100

本文主要介绍了加拿大IDC 1600数字化X光机(DR)图像伪影严重,平板探测器故障;报e33 Serial Communication error,高压发生器通讯错误;报e11 No voltage in the Capacitor Bank,不给曝光的分析与维修。

关键词： IDC 1600 DR 平板探测器故障维修 e33 e11

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