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黑色素瘤患者中BRAF V600e蛋白表达的同质性(英)

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诊断病理学杂志 2015年第7期22卷 M0004-M0004页

作者：许春伟解放军307医院

关注转移性黑色素瘤患者瘤体内BRAF基因突变状态的异质性,因它的存在导致了哪些标本应优先接受BRAF基因测试的不确定性。本研究设法检测多发性肿瘤患者中BRAFV600e蛋白表达的异质性程度。通过免疫组化方法检测BRAFV600e突变体特异性抗体... 详细信息

关注转移性黑色素瘤患者瘤体内BRAF基因突变状态的异质性,因它的存在导致了哪些标本应优先接受BRAF基因测试的不确定性。本研究设法检测多发性肿瘤患者中BRAFV600e蛋白表达的异质性程度。通过免疫组化方法检测BRAFV600e突变体特异性抗体Ve1评估不同进展阶段的64位患者的171个肿瘤。黑色素瘤部分通过Ve1染色强度（0-3分）检查,被审查（得分为0-3分）的瘤内异质性与分子BRAF基因的基因型存在一致性。

关键词：转移性黑色素瘤肿瘤患者 e蛋白表达 BRAF基因突变同质性免疫组化方法特异性抗体异质性

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周期蛋白e在乳腺浸润性导管癌中的表达

江苏医药 2005年第7期31卷 517-518页

作者：王旭芬张绪森陈同钰苏州大学附属第三医院乳房外科常州213003 苏州大学附属第三医院病理科常州213003

目的探讨周期蛋白e(cycline)蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与预后的关系。方法采用免疫组化方法检测35例乳腺浸润性导管癌组织周期蛋白e蛋白表达,分析与临床病理学特征的关系。结果周期蛋白e在乳腺癌中的高表达率为57.14%(20/35)... 详细信息

目的探讨周期蛋白e(cycline)蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与预后的关系。方法采用免疫组化方法检测35例乳腺浸润性导管癌组织周期蛋白e蛋白表达,分析与临床病理学特征的关系。结果周期蛋白e在乳腺癌中的高表达率为57.14%(20/35),低表达率为42.86%(15/35)。周期蛋白e的高表达与乳腺浸润性导管癌肿瘤最大径、淋巴结转移无关,但与eR、PR均阴性的乳腺浸润性导管癌患者的预后高度相关。结论周期蛋白e蛋白的检测对评估eR、PR均阴性的乳腺浸润性导管癌患者的预后,指导术后辅助治疗具有一定的意义。

关键词：乳腺浸润性导管癌周期蛋白e 临床病理学特征免疫组化方法术后辅助治疗 e蛋白表达淋巴结转移表达率癌患者预后表达及癌组织乳腺癌最大径癌肿瘤高表达检测 eR 阴性 PR

斜床站立对脊髓损伤后体位性低血压兔下丘脑肾素血管紧张素系统的影响

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中国康复医学杂志 2005年第5期20卷 333-337页

作者：潘钰关骅首都医科大学康复医学院中国康复研究中心北京市丰台区角门100068

目的:建立兔脊髓损伤(SCI)后体位性低血压(OH)动物模型,探讨斜床站立训练对兔SCI后OH的影响及其可能作用机制。方法:应用T5脊髓完全横断和直立倾斜实验(HUT)抬高60°的方法建立兔SCI后OH模型,术后第4天开始斜床站立训练,共训练28天,用... 详细信息

目的:建立兔脊髓损伤(SCI)后体位性低血压(OH)动物模型,探讨斜床站立训练对兔SCI后OH的影响及其可能作用机制。方法:应用T5脊髓完全横断和直立倾斜实验(HUT)抬高60°的方法建立兔SCI后OH模型,术后第4天开始斜床站立训练,共训练28天,用无创兔耳血压仪检测各组动物术后3天、10天、17天、24天、31天平卧位和60°体位收缩压(SBP)和脉率(PR)变化,用免疫组织化学方法检测术后31天下丘脑血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)、血管紧张素转换酶(ACe)蛋白表达。结果:训练组斜床站立训练28天60°体位SBP高于损伤组,60°体位SBP较平卧位SBP平均下降值显著低于损伤组;损伤组动物下丘脑ANGⅡ、ACe免疫组织化学阳性细胞多于假手术组,训练组ANGⅡ、ACe免疫组织化学阳性细胞明显多于损伤组。结论:兔T5脊髓完全横断结合HUT实验可导致OH。斜床站立训练28天能部分改善兔SCI后OH,这一作用可能与斜床站立训练上调下丘脑ANGⅡ、ACe蛋白表达有关。

关键词：肾素血管紧张素系统下丘脑血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ) 脊髓损伤(SCI) 免疫组织化学方法血管紧张素转换酶站立训练体位性低血压直立倾斜实验 e蛋白表达 SBP 动物模型作用机制方法建立阳性细胞全横断平卧位训练组 ACe

鸭坦布苏病毒JS2010株的分离鉴定及间接eLISA检测方法的建立

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鸭坦布苏病毒JS2010株的分离鉴定及间接ELISA检测方法的建立

作者：靳宇田安徽农业大学

学位级别：硕士

2010年春季，在我国中东部养鸭较密集地区的鸭群中发生了一种以蛋鸭采食量减少、共济失调和产蛋量急剧下降甚至停产或死亡为主要特征的传染病。该病传播迅速，很快蔓延至上海、安徽、江苏、山东、河北等全国大部分养鸭地区，给我国养鸭... 详细信息

2010年春季，在我国中东部养鸭较密集地区的鸭群中发生了一种以蛋鸭采食量减少、共济失调和产蛋量急剧下降甚至停产或死亡为主要特征的传染病。该病传播迅速，很快蔓延至上海、安徽、江苏、山东、河北等全国大部分养鸭地区，给我国养鸭业造成了严重的经济损失。确定该病的病原，建立其快速诊断方法具有重要意义。首先，对江苏某种鸭场临床发病鸭进行病原分离和鉴定。取典型症状病鸭的组织脏器匀浆过滤液尿囊腔接种9～10日龄SPF鸡胚，4～6天后鸡胚死亡，剖检可见胚体水肿、充血，绒毛尿囊膜水肿增厚，脾脏、肾脏肿大，肝脏发黄，表面有坏死灶。收集鸡胚毒，命名为JS2010分离株。对分离毒株进行血凝性、培养特性、致病性和PCR检测，发现该毒株对鸡、鸭、鹅和猪的红细胞无凝集作用;病毒接种鸡胚成纤维细胞（CeF）和非洲绿猴肾细胞（Vero）后不造成细胞病变，RT-PCR检测病毒核酸呈阴性，但可以在乳仓鼠肾细胞（BHK-21）中增殖并产生细胞病变;对鸡胚的半数致死量和对BHK-21细胞的半数感染量分别为103.68eLD50/0.2mL和105.33TCID50/0.2mL，病毒感染后病鸭的组织病理变化主要表现在肝细胞脂肪变性，肝小叶之间淋巴细胞增生，空肠固有层细胞结构破坏严重，固有膜淋巴细胞浸润，部分上皮脱落，大肠严重出血，肠腔内充满大量血细胞，肠壁出血点明显;以鸭坦布苏病毒特异性引物从鸡胚毒中PCR扩增出862bp目的基因片段，测序结果显示与鸭坦布苏病毒BYD-1株的同源性高达99%。综合分析鉴定结果，确定该分离毒株为鸭坦布苏病毒（DuckTembusuvirus，DTMUV）。其次，对DTMUV-JS2010株进行全基因组测序分析。根据GenBank中登录的DTMUVBYD-1株（JF312912）全基因组序列设计11对特异性引物，通过RT-PCR方法对JS2010株的全基因进行分段克隆并测序。结果显示，该毒株全基因序列核苷酸为10990nt，包含一个大小为10278nt的完整的开放阅读框。序列分析表明，JS2010株与DTMUV参考毒株的全基因组核苷酸同源性为99.2%～99.6%。针对囊膜蛋白e基因进行序列比对和系统进化树分析显示，JS2010株与黄病毒属Ntaya病毒群的Tembusu病毒的核苷酸同源性为87.7%～99.5%，与JS804株处于同一进化分支上，表明JS2010株为黄病毒属Ntaya病毒群的Tembusu病毒。然后，克隆表达JS2010株囊膜蛋白e基因，制备重组e蛋白，为建立间接eLISA方法提供试验材料。应用基因重组技术构建重组表达质粒peT-32a-e，转化至***进行大量诱导表达，进而使用Ni-NTA亲合层析柱纯化重组蛋白e。经SDS-PAGe和Western-blot分析，发现制备的重组蛋白浓度为0.58mg/mL，纯度达到95%，保留天然蛋白的抗原性，满足免疫检测试剂的要求。最后，建立基于重组e蛋白的间接eLISA方法并进行临床应用。以纯化的重组e蛋白为包被抗原，优化eLISA检测方法的试验条件，确定抗原最佳包被浓度为2.9ug/mL，血清和酶标抗体最佳稀释度分别为1:200和1:5000，阴阳性临界值判定标准为0.361，从而建立了检测DTMUV抗体的间接eLISA方法。特异性、灵敏性和重复稳定性试验的结果显示该方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性。应用建立的间接eLISA方法对江苏、山东、安徽等地临床采集的鸡、鸭血清进行抗体检测，鸡血清阳性检出率24.42%（21/86），鸭血清阳性检出率32.64%（63/193）。结果表明，建立的间接eLISA诊断方法可用于鸭坦布苏病毒临床样品的抗体检测。

关键词：鸭坦布苏病毒分离鉴定全基因组测定 e蛋白表达间接eLISA方法

P63和TTF-1在肺小细胞癌与低分化鳞癌中的鉴别诊断价值

同方学位论文库评论

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江西医药 2005年第3期40卷 170-171页

作者：刘翼军王春福江西省胸科医院病理科南昌330006 江西省胸科医院内科南昌330006

目的探讨P63、TTF-1对肺小细胞癌与低分化鳞癌的鉴别诊断价值。方法采用免疫组织化学法检测32例肺小细胞癌与肺低分化鳞癌手术标本P63、TTF-1蛋白表达及部分神经内分泌标记物Syn、CgA、NSe蛋白表达,对其结果进行分析。结果肺小细胞癌21... 详细信息

目的探讨P63、TTF-1对肺小细胞癌与低分化鳞癌的鉴别诊断价值。方法采用免疫组织化学法检测32例肺小细胞癌与肺低分化鳞癌手术标本P63、TTF-1蛋白表达及部分神经内分泌标记物Syn、CgA、NSe蛋白表达,对其结果进行分析。结果肺小细胞癌21例P63、TTF-1阳性表达分别为9.5%(2/21)、90.5%(19/21);Syn、CgA、NSe均为阳性表达。肺低分化鳞癌11例P63、TTF-1阳性表达分别为81.8(9/11)、18.2%(2/11);Syn、CgA、NSe部分表达。P63、TTF-1在肺小细胞癌与低分化鳞癌的阳性表达有显著差异(P<0.01)。结论P63与TTF-1联合检测,对肺小细胞癌与低分化鳞癌具有鉴别诊断价值。

关键词： TTF-1 肺小细胞癌诊断价值 P63 鉴别神经内分泌标记物肺低分化鳞癌免疫组织化学法阳性表达 e蛋白表达 Syn CgA 手术标本联合检测 NSe 表达及