检索结果-南通市图书馆

南方水产科学 2023年第6期19卷 166-172页

作者：汪泳昌祝骏贤李建松陈辰纪利芹洪孝友刘晓莉王亚坤吴聪聪余汶君罗来福陈海港魏成清朱新平张俊杰李伟新疆农业大学生命科学学院新疆乌鲁木齐830052 中国水产科学研究院珠江水产研究所/农业农村部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室广东广州510380 惠州市财兴实业有限公司广东惠州516000

dkkl1基因在哺乳动物睾丸发育和精子发生过程中扮演着重要角色,然而其在龟鳖类动物中的研究十分有限。为探索龟鳖类dkkl1基因的潜在功能和作用机制,克隆了中华鳖(Pelodiscus sinensis)dkkl1基因的cDNA片段,分析其序列特征、表达模式以... 详细信息

dkkl1基因在哺乳动物睾丸发育和精子发生过程中扮演着重要角色,然而其在龟鳖类动物中的研究十分有限。为探索龟鳖类dkkl1基因的潜在功能和作用机制,克隆了中华鳖(Pelodiscus sinensis)dkkl1基因的cDNA片段,分析其序列特征、表达模式以及对外源性激素处理的响应。克隆获得的dkkl 1基因cDN A序列长度为823 bp,其中3'-非编码区(UTR)为67 bp,5'UTR为90 bp,开放阅读框为666 bp,共编码222个氨基酸。中华鳖dkkl1蛋白是一种稳定性较差、亲水性较强的碱性蛋白,其二级结构和三级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主。氨基酸序列同源性比对结果显示其与中华草龟(Chinemys reevesii)dkkl1蛋白的相似性较高(81%),与棱皮龟(Dermochelys coriacea)dkkl1蛋白的同源性较低(70%)。通过RT-PCR和RT-qPCR分析发现,中华鳖dkkl1 mRNA在3冬龄成体精巢中极显著性高表达(P1),而在其余体组织中几乎不表达。并且随着年龄的增长,中华鳖精巢中dkkl1基因的表达量逐渐上升,并在3冬龄时达到顶峰。此外,17β-雌二醇(E2)和17α-甲基睾酮(17α-MT)处理均可显著抑制成体中华鳖精巢中dkkl1基因的表达(Pdkkl1基因可能在中华鳖睾丸发育和精子发生过程中起着重要作用。

关键词：中华鳖 dkkl1基因睾丸发育精子发生生物信息学分析外源性激素

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精子顶体相关基因dkkl1在正常人和男性不育患者睾丸组织中的表达差异

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实用医学杂志 2014年第1期30卷 36-39页

作者：颜秋霞唐爱发来永庆蔡志明桂耀庭广东省清远市人民医院生殖中心 511518 深圳大学第一附属医院深圳市第二人民医院 518035 北京大学深圳医院泌尿外科 518036 北京大学深圳医院广东省和深圳市男性生殖与遗传重点实验室 518036

目的:研究精子顶体相关基因dkkl1在正常人和男性不育患者睾丸组织中的表达差异。方法:采用RT-PCR和Western Blot方法检测dkkl1基因在人多组织中的表达特征,并比较其在正常人和男性不育患者睾丸组织中的表达差异。采用免疫组化方法分析DK... 详细信息

目的:研究精子顶体相关基因dkkl1在正常人和男性不育患者睾丸组织中的表达差异。方法:采用RT-PCR和Western Blot方法检测dkkl1基因在人多组织中的表达特征,并比较其在正常人和男性不育患者睾丸组织中的表达差异。采用免疫组化方法分析dkkl1蛋白在正常和男性不育患者睾丸组织中的表达差异。结果:人多组织RT-PCR和Western Blot结果显示dkkl1基因为睾丸组织特异性表达,与正常人睾丸组织比较,dkkl1基因在男性不育患者睾丸组织中表达减弱或消失。免疫组化结果显示dkkl1蛋白主要定位在正常男性睾丸的精母细胞和圆形精子细胞,而在唯支持细胞综合征(SCOS)和隐睾患者睾丸组织中不表达,在各种生精细胞阻滞患者的睾丸中观察到不同的表达特征。结论:dkkl1基因在男性不育患者睾丸组织中对精子发生可能具有重要作用,其表达降低或消失可能是男性不育症发生的重要原因之一。

关键词：不育男(雄)性 dkkl1基因精子发生睾丸无精子症

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乳腺癌中dkkl1的表达、作用及机制探讨

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肿瘤 2020年第10期40卷 696-707页

作者：王丁甘霖张国铎刘莉陈艳重庆市中医院普外科重庆400011 重庆市中医院甲状腺乳腺外科重庆400011 重庆市中医院手术室重庆400011

目的:研究Dickkopf样蛋白1(dickkopf-like protein 1,dkkl1)基因在乳腺癌组织和细胞系中的表达水平,探讨dkkl1基因过表达对人乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖、迁移的影响及其分子作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR检测乳腺癌细胞系... 详细信息

目的:研究Dickkopf样蛋白1(dickkopf-like protein 1,dkkl1)基因在乳腺癌组织和细胞系中的表达水平,探讨dkkl1基因过表达对人乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖、迁移的影响及其分子作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR检测乳腺癌细胞系、80例人乳腺癌和癌旁组织以及20例正常乳腺组织中dkkl1 mRNA的表达水平;免疫组织化学法检测人乳腺癌组织中dkkl1蛋白的表达水平并分析与患者临床病理特征的相关性。选取表达水平最低的MDA-MB-231和MCF-7细胞,分别转染空载体pcDNA3.1(+)-Flag质粒(作为对照组)和重组pcDNA3.1(+)-Flag-dkkl1质粒(作为实验组)后,采用蛋白质印迹法验证dkkl1蛋白是否过表达;然后分别采用CCK-8法、软琼脂克隆形成实验、吖啶橙/溴化乙锭双染实验和Transwell小室迁移实验检测MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖和迁移的变化;并采用蛋白质印迹和实时荧光定量PCR法分别检测dkkl1过表达对上皮-间质转化及下游靶分子表达和Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路的影响。结果:人乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MCF-7、BT549、MDA-MB-468、T47D和ZR-75-1中dkkl1 mRNA表达水平均明显低于正常乳腺上皮细胞MCF-10A(P值均dkkl1 mRNA和蛋白表达均明显下调(P值均dkkl1蛋白表达与乳腺癌的淋巴结转移、组织学分级及TNM分期具有明显相关性(P值均dkkl1过表达质粒转染后,乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞中dkkl1蛋白的表达水平明显上调,而细胞增殖、克隆形成、凋亡和迁移能力均被明显抑制(P值均dkkl1过表达可上调上皮标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA及蛋白表达水平,同时下调波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、Snail、BMI-1、KLF4和CD44 mRNA及蛋白的表达水平(P值均dkkl1过表达后活化的β-catenin蛋白、磷酸化的糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)蛋白及其下游c-Myc和cyclin D1蛋白的表达水平均明显下调(P值均dkkl1表达水平下调,可能通过拮抗Wnt/β-catenin信号通路调控乳腺癌的发展进程。

关键词：乳腺肿瘤 dkkl1基因细胞增殖细胞运动 Wnt/β-catenin信号通路

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精子顶体相关蛋白dkkll在小鼠睾丸组织中的表达研究

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中国男科学杂志 2013年第10期27卷 3-7页

作者：颜秋霞郭晓燕陈彩蓉李介华蔡志明唐爱发暨南大学医学院第五附属医院暨清远市人民医院生殖中心清远511518 暨南大学医学院第五附属医院暨清远市人民医院检验科深圳大学第一附属医院暨深圳市第二人民医院

目的：研究顶体相关蛋白dkkl1在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交，筛选出差异表达的dkkl1基因。采用RT-PCR方法检测dkkl1基因在小鼠不同... 详细信息

目的：研究顶体相关蛋白dkkl1在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交，筛选出差异表达的dkkl1基因。采用RT-PCR方法检测dkkl1基因在小鼠不同日龄和不同组织中的表达情况，采用免疫组化方法检测dkkl1蛋白在小鼠睾丸组织中的定位。结果对Affymetrix全基因组芯片杂交结果分析后，筛选得到1个差异表达杂交点，通过在NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知该差异表达基因是dkkl1基因。RT-PCR结果表明dkkl1 mRNA呈小鼠睾丸特异性表达，在出生31d小鼠睾丸开始高表达，在成年前达到高峰。dkkl1蛋白主要定位在睾丸精母细胞和圆形精子细胞。结论 dkkl1基因存在发育的表达调控，为小鼠年龄依赖性表达基因，其表达与小鼠精子发生的过程有很强的一致性，且具有睾丸特异性表达的特征，因此我们推测该基因可能在精子发生中具有关键作用。

关键词：基因芯片 dkkl1基因精子发生

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