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diff-quik染色法在中华鳖血细胞染色中的应用

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水产养殖 2011年第7期32卷 8-12页

作者：王津津赵海泉林锋曹铮钱冬安徽农业大学安徽合肥230036 浙江淡水水产研究所浙江湖州313001

采用diff-quik染色法对中华鳖的血涂片进行染色,用DP-71显微成像系统采集血片细胞显微图像,经Image-proExpress5.1测量和分析中华鳖各类血细胞大小、比例。结果表明:①diff-quik染色后中华鳖各类血细胞核质染色差别明显,核质界面明显,... 详细信息

采用diff-quik染色法对中华鳖的血涂片进行染色,用DP-71显微成像系统采集血片细胞显微图像,经Image-proExpress5.1测量和分析中华鳖各类血细胞大小、比例。结果表明:①diff-quik染色后中华鳖各类血细胞核质染色差别明显,核质界面明显,各类白细胞的颗粒明显、易分辨。②中华鳖红细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞大小分别为17.86μm×12.43μm、16.26μm×13.67μm、12.28μm×10.98μm、14.63μm×12.83μm。嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞占白细胞百分比分别为54.7、13.72、6.22和24.72,嗜碱性粒细胞仅为0.65。③比较diff-quik法、Giemsa法、Wright-Giemsa法对染色效果的影响,3种染色方法在细胞大小及白细胞分类比例上无明显差异。从核质界面、细胞颗粒特征性染色等来看,diff-quik法和Giemsa法优于Wright-Giemsa法。diff-quik法染色快捷、核质和颗粒染色清晰度更高,是一种适合大量标本快速染色的染色法,可适用于中华鳖的血细胞染色。

关键词：中华鳖血细胞 diff-quik染色应用

嗜水气单胞菌T0608菌株对中华鳖（Pelodiscus sinensis）血液免疫相关指标的影响

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嗜水气单胞菌T0608菌株对中华鳖（Pelodiscus sinensis）血液免疫...

作者：王津津安徽农业大学

学位级别：硕士

中华鳖(Pelodiscus sinensis)是我国珍贵的经济水产动物之一，我国的中华鳖产量一直位居世界产量的首位。但近年来，由于大规模养殖，随着高密度化养殖的迅速发展和养殖范围的日益扩大，危害养殖中华鳖的各种病原也不断出现，养殖的中... 详细信息

中华鳖(Pelodiscus sinensis)是我国珍贵的经济水产动物之一，我国的中华鳖产量一直位居世界产量的首位。但近年来，由于大规模养殖，随着高密度化养殖的迅速发展和养殖范围的日益扩大，危害养殖中华鳖的各种病原也不断出现，养殖的中华鳖常常会爆发大规模疾病和死亡。中华鳖常发生的疾病有腐皮病、红底板病、白底板病、红脖子病、疥疮病、腮腺炎病、穿孔病、出血病等，病原包括真菌、细菌、病毒、寄生虫及其他非生物因素和不明病因的原因等，这些疾病多传染性强、感染范围广、传播范围大、死亡率高，给中华鳖养殖业造成了严重的经济损失，严重制约了中华鳖养殖产业的健康可持续发展。胡大雁等人[1]从发病的中华鳖肝脏、脾脏、肾脏中分离出一株毒力强、危害大的嗜水气单胞菌T0608菌株，并认为该菌株是这次中华鳖疾病爆发的继发病原。本论文的研究将嗜水气单胞菌T0608菌株分1.5×1010、1.5×109、1.5×108cuf/ml三个梯度感染健康中华鳖，并取濒死的中华鳖进行细菌分离，证明该菌株能有效地感染健康中华鳖和导致其发病，并得出了该菌株对中华鳖的亚致死浓度为1.5×108cuf/ml。为建立嗜水气单胞菌T0608菌株亚致死剂量感染中华鳖的实验条件，在本论文的研究中对中华鳖的饲养水体条件进行了监测，绘制了氨氮标准曲线和亚硝态氨曲线，对水体采用恒定控温、定时换水、氯化铵调节氨氮含量，使中华鳖饲养环境保持在稳定范围，把环境因子改变产生的影响降至最低;还进行了不同的采血方式对中华鳖血清酶指标的测定影响的研究，结果证明常用抗凝剂肝素和EDTA的使用不影响中华鳖血清酶指标的测定。本论文的研究采用了三种染色方法，即diff-quik染色法、Giemsa法、Wright-Giemsa法对中华鳖血细胞进行染色，用DP-71显微成像系统采集血细胞显微图像，经Image-pro Express5.1测量和分析中华鳖各类血细胞大小、比例。结果表明diff-quik染色下中华鳖各类血细胞核质染色差别最明显，核质界面明显，各类白细胞的颗粒明显、易分辨，并测得中华鳖红细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞大小分别为17.86μm×12.43μm、16.26μm×13.67μm、12.28μm×10.98μm、14.63μm×12.83μm;嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞占白细胞百分比分别为54.7%、13.72%、6.22%和24.72%;嗜碱性粒细胞仅为0.65%。比较diff-quik法、Giemsa法、Wright-Giemsa法三种染色法后得出虽然三种染色方法在细胞大小及白细胞分类比例上无明显差异，但从核质界面、细胞颗粒特征性染色等来看，diff-quik法和Giemsa法优于Wright-Giemsa法，diff-quik法染色快捷、核质和颗粒染色清晰度更高，是一种适合大量标本快速染色的染色法，最适用于中华鳖的血细胞染色。研究还对健康中华鳖和T0608菌株亚致死感染量的中华鳖血细胞进行了AKP染色，结果显示健康的中华鳖成熟嗜中性粒细胞内有碱性磷酸酶阳性颗粒，感染T0608菌株的中华鳖嗜中性粒细胞碱性磷酸酶阳性颗粒和阳性率细胞有所减少;健康中华鳖和T0608菌株亚致死感染量的中华鳖血细胞的MPO染色显嗜中性粒细胞均呈红色，部分细胞内有阳性颗粒。健康中华鳖和T0608菌株感染后中华鳖血细胞均有PAS阳性颗粒，无明显差别。亚致死感剂量嗜水气单胞菌T0608菌株感染后24h－48h内中华鳖的白细胞数目增多，其中以嗜中性粒细胞和单核细胞的增多最为明显，血清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、超氧化物歧化酶和溶菌酶均有所上升。96h攻毒后中华鳖血清中各种酶指标和白细胞数目都有所下降，但依然高于对照组中华鳖的对应指数。攻毒组的GOT活力在96小时最高、GPT活力在48小时最高，达到72.74卡门式单位，与对照组有显著性差异。AKP、ACP、SOD和LZM的活力都是48小时达到最高，都与对照组有显著性差异。本研究中还用嗜水气单胞菌T0608菌株的灭活菌悬液以7.5×10cuf/ml的浓度注射中华鳖，24h、48h和96h后分别测量免疫中华鳖血清中AKP，ACP，GOT，GPT，SOD，LZM等指标的变化，结果表明免疫组AKP活力均高于对照组，作用效果较为显著;免疫组的各种酶指标都有上升，GOT的活力在96小时最高，比对照组提高了59.37%，GPT的活力在24小时最高，达到了44.87卡门式单位，LZM在96小时可达到2.74U，比对照组有所升高，但和对照组差异并不显著。

关键词：中华鳖嗜水气单胞菌T0608菌株血细胞分类 diff-quik染色血清酶指标

不同染色法对精子顶体染色效果及适用性的比较

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华夏医学 2010年第4期23卷 350-352页

作者：李大文孟繁华韩伟广西壮族自治区人民医院生殖与遗传中心广西南宁530021

目的:通过比较瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、diff-quik法及吉-姆萨染色法对精子顶体染色的效果,寻找有效、更易于判读精子顶体的染色方法。方法:100份精液标本同时采用瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、diff-quik法及吉-姆萨... 详细信息

目的:通过比较瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、diff-quik法及吉-姆萨染色法对精子顶体染色的效果,寻找有效、更易于判读精子顶体的染色方法。方法:100份精液标本同时采用瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、diff-quik法及吉-姆萨染色法对精液涂片进行染色,分析四种染色方法的结果。结果:四种染色方法对型、型精子顶体的评估结果无显著性差异(P>0.05);改良巴氏染色法相对其他三种染色法对精子顶体染色效果稳定。结论:改良巴氏染色法相对其他三种染色法在精子顶体完整率的判读上具有染色效果稳定的优势,且染液价格经济,适于精子顶体完整率的判读。

关键词：精子顶体瑞氏-吉姆萨染色改良巴氏染色 diff-quik染色吉-姆萨染色

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不同染色方法对精子形态学评估的影响

泸州医学院学报 2012年第2期35卷 148-150页

作者：张红斌毛熙光陈绍威梁冠男黄桂英王芳泸州医学院附属医院人类辅助生殖医学技术部四川泸州646000 泸州医学院附属医院医学实验中心四川泸州646000

目的:探讨diff-quik染色法及改良巴氏染色法对精子形态学评估的异同性及相关性。方法:对80例标本分别涂片两张,利用diff-quik染色法及改良巴氏染色法分别进行染色,并记录同一标本不同染色方法其正常精子百分率、头部缺陷精子百分率、颈... 详细信息

目的:探讨diff-quik染色法及改良巴氏染色法对精子形态学评估的异同性及相关性。方法:对80例标本分别涂片两张,利用diff-quik染色法及改良巴氏染色法分别进行染色,并记录同一标本不同染色方法其正常精子百分率、头部缺陷精子百分率、颈部和中段缺陷精子百分率、尾部缺陷精子百分率、畸形精子形态指数(TZI)、精子畸形指数(SDI)等。结果:diff-quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中,正常形态率、各种类型的缺陷率(头部、颈部与中段、尾部)、畸形精子指数、精子畸形指数等均无统计学意义(P>0.05)。结论:diff-quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中具有较为一致的结果;改良巴氏染色法虽经典,但过于繁琐;在病人多且急需出具精子形态学检验报告的情况下,可以考虑使用diff-quik染色法作为精子形态评估染色方法。

关键词：精子形态 diff-quik染色改良巴氏染色

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课堂教学中疟原虫血涂片染色方法的改进

生物学通报 2017年第9期52卷 58-59页

作者：温砚子张平黄建荣中山大学生命科学学院广东广州510275

疟原虫血涂片染色是高校寄生虫学实验课中的重要内容。传统的疟原虫血涂片染色采用的是经典的Giemsa染色法,但是染色效果受各种因素影响不稳定,严重影响教学质量。采用diff-quik染色方法进行染色发现,血涂片上的红细胞及疟原虫的形态与G... 详细信息

疟原虫血涂片染色是高校寄生虫学实验课中的重要内容。传统的疟原虫血涂片染色采用的是经典的Giemsa染色法,但是染色效果受各种因素影响不稳定,严重影响教学质量。采用diff-quik染色方法进行染色发现,血涂片上的红细胞及疟原虫的形态与Giemsa染色结果相比更加明显和典型,染色背景干净无杂质,有利于进一步分辨疟原虫形态和进行数据统计。

关键词：疟原虫 Giemsa染色 diff-quik染色实验教学