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荧光活性染料dio标记腹腔巨噬细胞的示踪与应用研究

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生物化学与生物物理进展 2023年第3期50卷 647-656页

作者：梁靖蓉麦凤怡舒俊翔郭婕廖翔肖礼祖李陈广华中科技大学协和深圳医院疼痛科深圳518052

目的以细胞膜绿色荧光活性染料dio(dioC_(18)(3))标记腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage),探讨在巨噬细胞消失反应(macrophage disappearance reaction,MDR)中腹腔巨噬细胞的示踪研究。方法dio标记腹腔巨噬细胞,过继移植给C57BL/6小鼠;以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导体内MDR。采用荧光显微镜和流式细胞术检测dio标记的腹腔巨噬细胞数量及荧光强度;分离收集小鼠的各组织,进行冰冻切片,检测dio标记的腹腔巨噬细胞分布情况。结果荧光显微镜和流式细胞仪观察发现,腹腔注射LPS能显著降低腹腔中dio标记的腹腔巨噬细胞数量及荧光强度。在MDR过程中消失的腹腔巨噬细胞,通过冰冻切片发现在肝脏、胸腺及脾脏中有分布。结论dio标记对腹腔巨噬细胞的存活无影响且能长效保持荧光,是一种安全、有效的示踪腹腔巨噬细胞分布的技术手段。

关键词： dio 腹腔巨噬细胞巨噬细胞消失反应示踪

绵羊dio2基因组织表达及其多态性与产羔数关联分析

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南京农业大学学报 2020年第1期43卷 134-142页

作者：安雪姣赵生国潘章源张仁森田志龙马琳蔡原储明星中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业农村部动物遗传育种与繁殖重点实验室北京100193 甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃兰州730070 临沂大学农林科学学院山东临沂276005

[目的]本试验旨在探明Ⅱ型脱碘酶(dio2)基因在常年发情的小尾寒羊和季节性发情的草地型藏羊中的表达模式,并探讨其多态性与绵羊季节性繁殖和产羔数之间的关系。[方法]通过荧光定量PCR(qPCR)检测dio 2基因在不同品种绵羊的10种组织中的表... 详细信息

[目的]本试验旨在探明Ⅱ型脱碘酶(dio2)基因在常年发情的小尾寒羊和季节性发情的草地型藏羊中的表达模式,并探讨其多态性与绵羊季节性繁殖和产羔数之间的关系。[方法]通过荧光定量PCR(qPCR)检测dio 2基因在不同品种绵羊的10种组织中的表达,同时利用SNP技术对3个常年发情绵羊品种(小尾寒羊、策勒黑羊和湖羊)和3个季节性发情绵羊品种(滩羊、苏尼特羊和草地型藏羊)的dio 2基因2个SNP位点多态性进行检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析。[结果]qPCR结果显示,dio2基因在小尾寒羊和草地型藏羊各组织中广泛表达,其中草地型藏羊下丘脑、垂体、卵巢、子宫和输卵管组织中的表达量显著高于小尾寒羊(Pdio2基因g.88484603G>C位点基因型频率和等位基因频率在季节性发情和常年发情绵羊品种间差异均达到极显著水平(Pdio 2基因g.88484594T>C位点在滩羊和策勒黑羊中表现为中度多态(0.25C位点在这6个绵羊群体中均表现为中度多态(0.25C位点在这6个群体中均处于哈代温伯格不平衡状态(PC位点在这6个绵羊品种中均处于哈代温伯格平衡状态(P>0.05)。生物信息学分析表明,g.88484603G>C位点突变前、后的mRNA二级结构发生了改变,而且其最小结构自由能降低,结构稳定性增强,蛋白质二级结构没有发生变化,但三级结构有一些变化。关联分析表明,这2个SNP位点与小尾寒羊前3胎产羔数均无显著关联(P>0.05)。[结论]dio 2基因与绵羊的季节性繁殖密切相关,其g.88484603G>C位点对绵羊季节性繁殖性状有一定的调控作用。

关键词：绵羊 dio 2基因组织表达 SNP分型季节性繁殖产羔数

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dio基因多态性与有氧耐力的相关性研究

中国应用生理学杂志 2019年第2期35卷 183-188页

作者：周文婷胡扬遵义师范学院贵州遵义563000 哈尔滨体育学院黑龙江哈尔滨150001 北京体育大学北京100084

目的:研究碘代甲状腺氨酸脱碘酶(dio)基因多态性与有氧耐力的相关性,寻找与有氧耐力表型相关的分子标记。方法:应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测技术,对123名中国北方汉族优秀长跑运动员(EEA)与127名中国北方汉族普通大学生(CG... 详细信息

目的:研究碘代甲状腺氨酸脱碘酶(dio)基因多态性与有氧耐力的相关性,寻找与有氧耐力表型相关的分子标记。方法:应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测技术,对123名中国北方汉族优秀长跑运动员(EEA)与127名中国北方汉族普通大学生(CG)dio1基因C785T位点及dio2基因的Thr92Ala和Gly3Asp位点进行解析并分析比较,其中优秀运动员又根据运动等级和运动项目分为国际健将与健将组(43vs80),及5/10km和马拉松组(92vs31)。结果:在dio1的C785T位点及dio2的Thr92Ala位点,各组间基因型和等位基因频率均无显著性差异(P>0.05);在dio2的Gly3Asp位点,三种基因型在CG组与国际健将组、CG组与马拉松组间的分布均差异显著(Pdio2的Thr92Ala及Gly3Asp位点处于强连锁不平衡,CT单体型在男CG组与女CG组、男CG组与男EEA组间分布均差异显著(Pdio2基因Thr92Ala及Gly3Asp位点的CT单体型分布具有性别差异,是男子EEA有氧耐力素质的分子标记,可用于男子长跑健将级运动员及马拉松运动员的分子选材,TC单体型则是女子长跑国际健将运动员和5000m、10000m运动员有氧耐力素质的分子标记。

关键词： dio 基因多态性有氧耐力遗传标记

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dio-C18-(3)介导细胞融合

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1997年第3期29卷 55-61页

作者：金承志李伟王炯复旦大学分析测试中心细胞图象分析实验室

发现荧光分子探针ＤｉＯ－Ｃ１８－（３）在等渗、室温、无外源Ｃａ２＋及ｐＨ７．４的条件下快速介导人红细胞融合。丝氨酸蛋白水解酶抑制剂苯甲磺酰氟（ＰＭＳＦ）不能阻断这个过程。ＤｉＯ－Ｃ１８－（３）亦引起Ｌ－９２９（小鼠成... 详细信息

发现荧光分子探针ＤｉＯ－Ｃ１８－（３）在等渗、室温、无外源Ｃａ２＋及ｐＨ７．４的条件下快速介导人红细胞融合。丝氨酸蛋白水解酶抑制剂苯甲磺酰氟（ＰＭＳＦ）不能阻断这个过程。ＤｉＯ－Ｃ１８－（３）亦引起Ｌ－９２９（小鼠成纤维细胞瘤）细胞融合。细胞的ＤｉＯ荧光图象显示质膜上存在ＤｉＯ局域浓度很高的结合位点，从细胞及融合体表面伸出一至数条细丝，表明在细胞融合条件下，质膜确实存在一种有力的机制使细胞向外伸出稳定的质膜结构组分。结合膜静电学及膜间应力性质，推论此类突起或细丝之端区可能是细胞融合过程中水化斥力最弱且最早发生脂膜接触与融合的部位。

关键词： dio 细胞融合细丝

Adipose tissue resistin gene expression in dio and DR rats

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Journal of Nanjing Medical University 2006年第1期20卷 26-29页

作者： Yuanyuan Zhao Yuhui Ni Xirong Guo Haixia Gong Xia Chi Ronghua Chen Nanjing Red Cross Blood Center Nanjing 2100031 Department of Pediatrics Center of Human Functional Genomics of Nanjing Medical University Nanjing 210029 China

Objective： To investigate the expression of resistin gene in diet-induced obesity （dio） and diet resistance （DR） rats. Methods： dio and DR models were prepared with male SD rats after 6 weeks feeding by a diet of relatively high fat, sucrose, and caloric content （HE diet）. Body-weight, fat mass, and the concentration of serum insulin were measured, and the expression of resistin and Peroxisome proliferator-activated receptory-7（PPAR-7） gene in whit adipose tissue （WAT） was also detected by RT-PCR. Results： ① Body weight, fat mass and the concentration of serum insulin were significantly increased in dio rats and decreased in DR rats. ② The expression of resistin and PPAR7 gene was upregulated in dio group and supressed in DR group, but the expression of resistin was not detectable in all samples within three groups. Conclusion： Resistin may serve as a link between obesity and insulin resistance, but the individual difference is enormous.

关键词： obesity dio DR resistin insulin resistance

泛华恒兴推出64通道dio转接模块MDU-3843

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测控技术 2014年第8期33卷 157-158页

北京泛华恒兴科技有限公司（简称泛华恒兴）近日推出了一款屏蔽式I／O接线盒PSMDU-3843，适用于工业自动化检测系统、自动化控制、电子和逻辑测试等应用领域。MDU-3843内置接线端子台，搭配相关转接电缆可实现与PXI-3305、PCI-3304间的... 详细信息

北京泛华恒兴科技有限公司（简称泛华恒兴）近日推出了一款屏蔽式I／O接线盒PSMDU-3843，适用于工业自动化检测系统、自动化控制、电子和逻辑测试等应用领域。MDU-3843内置接线端子台，搭配相关转接电缆可实现与PXI-3305、PCI-3304间的简便连接，指定通道支持高达3A的过通电流；内部提供电阻表贴位置，便于实现3305／3304相关的信号量控制应用；背部设有上架卡口，方便机柜内安装。

关键词：转接通道 dio 自动化检测系统模块控制应用自动化控制逻辑测试

IL-33/ST2信号在dio小鼠脂质生成中的作用研究

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IL-33/ST2信号在DIO小鼠脂质生成中的作用研究

作者：郑韦韦广东药科大学

学位级别：硕士

机体长期能量摄入大于消耗,脂质过量累积在脂肪细胞中促使细胞肥大,进而导致机体体重增加是饮食诱导肥胖（Diet-induced obesity,dio）的主要特点。脂质代谢平衡的破坏,引发机体糖脂代谢紊乱,导致全身炎症反应,破坏机体内稳态,进一步发... 详细信息

机体长期能量摄入大于消耗,脂质过量累积在脂肪细胞中促使细胞肥大,进而导致机体体重增加是饮食诱导肥胖（Diet-induced obesity,dio）的主要特点。脂质代谢平衡的破坏,引发机体糖脂代谢紊乱,导致全身炎症反应,破坏机体内稳态,进一步发展为2型糖尿病、高血脂等代谢性疾病。综上所述,调控脂质代谢成为预防及治疗肥胖的潜在靶点。IL-33作为IL-1家族新成员,在内皮细胞、上皮细胞、成纤维细胞中广泛表达。IL-33通过结合细胞表面ST2受体,启动Th2型免疫应答,对维持机体内环境稳态发挥重要作用。IL-33/ST2信号已成为调节自身免疫病、过敏性疾病、心脑血管疾病、病原体感染等炎症相关疾病的潜在靶点。本课题建立小鼠dio模型,探讨IL-33/ST2信号在调节脂质生成中的作用及潜在机制。研究目的:探讨IL-33/ST2信号在dio小鼠脂质生成中的作用。研究方法:用60 Kcal%高脂饲料喂养雄性WT和ST2C57BL/6小鼠,腹腔给予IL-33处理,比较各组小鼠代谢性指标变化;HE染色检测脂肪和肝脏组织的病理结构变化;PCR、Western Blot测定脂肪组织中炎症及脂质代谢相关因子的表达;油红染色、Western Blot检测IL-33对脂质代谢因子PPARγ和UCP1表达的影响。研究结果:1、ST2基因缺失对dio小鼠代谢的影响建立dio小鼠模型,与WT肥胖小鼠相比,ST2肥胖小鼠加重代谢性指标紊乱水平,增加脂质生成转录因子PPARγ表达,降低脂质代谢因子UCP1蛋白表达。2、IL-33对dio小鼠脂肪炎症及脂质生成的影响与正常小鼠比较,肥胖小鼠脂肪组织中ST2和IL-33表达明显升高。IL-33处理后改善代谢性指标紊乱变化,诱导巨噬细胞向M2型极化,下调脂质生成PPARγ、C/EBP家族因子表达,上调脂质代谢UCP1蛋白表达。3、IL-33/ST2信号对脂质生成的调节机制体外诱导脂肪前体细胞（3T3-L1）分化为脂肪细胞。IL-33处理降低PPARγ表达,而上调UCP1表达。特异性抗体阻滞IL-33/ST2信号,拮抗IL-33抑制脂质生成作用,同时下调UCP1表达。GW9662（PPARγ抑制剂）处理证实PPARγ在IL-33调节脂肪细胞脂质生成中的作用。结论:激活IL-33/ST2信号通路,抑制脂质生成相关基因PPARγ表达,影响细胞脂质代谢,在肥胖疾病中发挥调节作用。

关键词： IL-33/ST2 dio 脂肪细胞 PPARγ

五甲基槲皮素改善dio小鼠代谢异常和NAFLD的作用及机制研究

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五甲基槲皮素改善DIO小鼠代谢异常和NAFLD的作用及机制研究

作者：王敏华中科技大学

学位级别：硕士

高脂饮食(High fat diet,HFD)诱导的肥胖小鼠模型是最常用的dio(Diet-induced obesity,dio)模型之一,该模型小鼠主要表现为向心性肥胖、糖脂代谢异常、胰岛素抵抗和肝脏病变等。PMQ(Pentamethylquercetin,PMQ)是天然的多甲氧基黄酮类化... 详细信息

高脂饮食(High fat diet,HFD)诱导的肥胖小鼠模型是最常用的dio(Diet-induced obesity,dio)模型之一,该模型小鼠主要表现为向心性肥胖、糖脂代谢异常、胰岛素抵抗和肝脏病变等。PMQ(Pentamethylquercetin,PMQ)是天然的多甲氧基黄酮类化合物,本课题组前期研究表明PMQ可改善MSG-IO小鼠的肥胖及相关症状。本研究拟建立dio小鼠代谢异常和非酒精性脂肪肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型,在该模型上求证PMQ对代谢异常和NAFLD的改善作用,并对作用机制进行更深入的探讨。第一部分dio小鼠模型的建立目的:建立dio小鼠模型。方法:将C57/BL6小鼠于第5周龄时随机分为两组,即:NFD正常组和HFD模型组,每组15只,按组别分别给予正常饲料和高脂饲料,自由进食和饮水,每周称量体重并计算体重增量。22周龄时进行口服糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT),24周龄时宰杀收集样本并检测各组小鼠肝脏病理状况和血生化指标。采用RT-PCR检测各组小鼠肝脏代谢相关重要因子m RNA的表达。结果:(1)dio小鼠出现明显的肥胖症状,主要表现为体重、腰围、Lee指数及脂肪显著增加;(2)dio小鼠出现糖耐量受损,甘油三酯、总胆固醇、LDL-C、空腹血糖、血清胰岛素升高,出现胰岛素抵抗的症状;病理结果显示肝脏出现明显的脂肪变性;(3)高脂饮食导致FASN、CD36、PPARγ、PCSK9、SREBPs以及TNFαm RNA表达上调;PGC1α、PGC-1β、PPARβ、SIRT6和PTEN m RNA表达下调。结论:dio小鼠出现明显的向心性肥胖、糖脂代谢异常、胰岛素抵抗和肝脏病变等,为深入探索代谢异常和NAFLD的病理机制及相关药效学研究提供理想病理模型。第二部分五甲基槲皮素改善dio小鼠非酒精性脂肪肝病目的:探索PMQ改善dio小鼠非酒精性脂肪肝病的作用及机制。方法:将C57/BL6小鼠于第5周龄时随机分为正常组(NFD)、模型组(HFD)、HFD+溶剂、HFD+PMQ 5、HFD+PMQ 10、HFD+PMQ 20、HFD+RSD 5和HFD+MET 300共8组,每组15只。正常组给予正常饲料饲养,而其他组均给予高脂饲料饲养,并同时开始按Vehicle、PMQ 5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg,RSG 5 mg/kg,MET 300 mg/kg灌胃给药。22周龄时进行口服糖耐量试验,24周龄时宰杀收集样本,记录肝脏、皮下脂肪、肩胛脂和附睾脂重量,检测各组小鼠肝脏病理状况和血生化指标。采用RT-PCR检测各组小鼠肝脏代谢相关重要因子m RNA的表达。结果:(1)与溶剂组比,PMQ能够明显改善dio小鼠肥胖状态,dio小鼠的体重、腰围、Lee指数明显降低;(2)与溶剂组比,PMQ能够明显改善dio小鼠血清TC、TG、LDL-C、空腹血糖、OGTT、血清胰岛素及胰岛素抵抗指数等指标;病理结果提示PMQ能够缓解肝脏脂肪变性;(3)与溶剂组比,PMQ能够调控肝脏m RNA表达水平,不同程度下调FASN、CD36、PCSK9、SREBPs、TNFαm RNA的表达;上调PGC-1α、PGC-1β、PPARβ、SIRT6和PTEN m RNA的表达。结论:(1)PMQ能够明显改善dio小鼠的代谢异常和非酒精性脂肪肝病;(2)以下信号通路可能参与五甲基槲皮素改善代谢异常和NAFLD:(1)PMQ-SIRT6-TNFα-SREBPsPCSK9/FASN;(2)PMQ-SIRT6-PGC-1α;(3)PMQ-PPARβ-SREBPs-PCSK9/FASN;(4)PMQ-PTEN-SREBPs-PCSK9/FASN。

关键词：五甲基槲皮素 dio 非酒精性脂肪肝病 SIRT6 PTEN

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灵巧驾驭——新大洲本田dio

摩托车趋势 2009年第7期 40-41页

作者：欧阳滨

“dio”这个名字源自西班牙语，含义为“上帝之爱”!同时，这个名字也代表本田1988年推出的一款经典小型踏板车，这款踏板车在日本和欧美十分畅销，也受到全球广大消费者的喜爱。2002年6月，dio出口版（50ml）正式在新大洲本田上市，专... 详细信息

“dio”这个名字源自西班牙语，含义为“上帝之爱”!同时，这个名字也代表本田1988年推出的一款经典小型踏板车，这款踏板车在日本和欧美十分畅销，也受到全球广大消费者的喜爱。2002年6月，dio出口版（50ml）正式在新大洲本田上市，专供日本市场，成为日本女性消费者的时尚之选。此次上市的dio内销版（125ml），是本田承袭dio经典、时尚元素的基础上，针对中国消费者需求开发的全新车型。

关键词： dio 新大洲本田消费者需求灵巧日本市场踏板车西班牙