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A one-step specific assay for continuous detection of sirtuin 2 activity

Acta Pharmaceutica Sinica B 2019年第6期9卷 1183-1192页

作者： Qi Dai Zhihua Zheng Fan Xia Peiqing Liu Min Li School of Pharmaceutical Sciences Sun Yat-Sen UniversityNational and Local United Engineering Lab of Druggability and New Drugs EvaluationGuangdong Provincial Key Laboratory of New Drug Design and EvaluationGuangzhou 510006China

Sirtuins(SIRTs)are nicotinamide adenine dinucleotide(NAD^+)-dependent histone deacetylases with diverse physiological functions.A variety of small molecules have been developed to interrogate the physiological function of ***,it is desirable to establish efficient and convenient assays to screen SIRTs *** this study,we designed a series of fluorescent nonapeptide probes derived from substrates of *** increment of these probes is based on SIRT-mediated removal of the acyl side chain with fluorophore,which makes this system free of lysine-recognizing *** the reaction of these fluorescent nonapeptide substrates with SIRT1-SIRT3 and SIRT6,it was confirmed that this assessment system was the most suitable for SIRT2activity ***,SIRT2 was used to modify substrates by truncating the amino acids or lysine side chain of ***,two specific and efficient fluorescent probes for SIRT2,ne-D9 and ne-K4a,were *** of the results revealed that ne-K4a based assay was more suitable for modulators screening in vitro,while the other specific substrate ne-D9 was stable in cell lysate and could detect the activity of SIRT2 in the *** summary,this study presents a novel strategy for detecting SIRT2 activity in vitro and in cell lysate.

关键词： deacetylate Deacylate Fluorescent probe One-step assay Sirtuins SIRT2

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