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Molecular Characterization of Gastrointestinal Stromal Tumors (Gist) and Contribution of Immunohistochemistry in Congolese from Kinshasa

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Open Journal of Gastroenterology 2024年第4期14卷 109-116页

作者： Rive Lukuaku Jérémie Okumadi Fabrice Bokambandja Andy Mbangama Vincent Mbatu Georges Mvumbi Jean-Louis Mumbere David Azako Serge Pezo Dieudonné Mvumbi Faculty of Medicine Bel Campus Technological University Kinshasa DR Congo Department of Anatomy and Pathological Cytology University Clinics of Kinshasa Kinshasa DR Congo Department of Gyneco-Obstetrics University Clinics of Kinshasa Kinshasa DR Congo Molecular Biology Department Faculty of Medicine University of Kinshasa Kinshasa DR Congo Institute of Medical Immunology Free University of Brussels Ixelles Belgium

Introduction: The differentiation of digestive tumors very often requires the use of techniques currently not widely in use in the Democratic Republic of Congo (DRC), such as immunohistochemistry. This is perfectly verified for GISTs whose precise, or at least highly certain, diagnosis can only be made using immunohistochemical markers. This underuse of these techniques due to lack of equipment and human skills explains the limited epidemiological data available to date, thus leading to untargeted and too often late treatment of patients. Research question: What contribution can immunohistochemical markers make to the diagnosis of digestive tract tumours? Objective: Discuss the contribution of immunohistochemical markers in the diagnosis of GIST and provide basic data on the epidemiology of these nosological entities in Kinshasa. Methodology: This was a retrospective study carried out at the LEBOMA private anatomy and pathological cytology centre. The main inclusion criterion was any digestive tract block or slide whose diagnosis of GIST had been requalified after review by at least 2 pathologists. An immuhistochemical study was performed using an automated technique (with a Ventana XT machine) using a panel of antibodies: CD-117 and dog-1 which are listed in the literature as strongly correlated with the occurrence of GIST, all slides were made at Hj Hospital using an OLYMPUS BX41 co-observation microscope. Results: Of 601 cases of digestive tumors recorded during the concerned period, 32 (5.32%) concerned GIST. This prevalence was confirmed by our immunohistochemical results where the expression of CD117 and that of dog-1 were positive in 90.6% and 100% of cases which prevalence is high compared with the worldwide prevalence according to the literature, respectively. The distribution of the patients concerned was made with a sex ratio of 1.6 women/men with a median age of 53 years. Most cases (81%) had a gastric location and were fusiform GISTs. Conclusion: Gastrointestinal stromal tumours, although rare and un

关键词： Digestive Tumors GIST Immunohistochemistry CD117 dog-1

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Histopathologic and Immunohistochemical Analysis of 66 Cases of Gastrointestinal Stromal Tumor

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Journal of Biosciences and Medicines 2023年第6期11卷 140-147页

作者： Tianzhi Zhang Chao Liang Danting Su Department of Pathology The Seventh Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University Shenzhen China

Background and Objective: To investigate the histopathological characteristics and immunohistochemistry of gastrointestinal stromal tumors (GIST). Immunohistochemistry (IHC) refers to the expression and meaning of CD117, dog-1, CD34. Methods: Sixty-six gastrointestinal stromal tumor (GIST) samples with complete clinical data and definite clinicopathological diagnosis were collected from the Seventh Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University from January 2019 to December 2022. Retrospective analysis was performed on the pathological data of 66 patients with GIST, and the histopathology and IHC were analyzed and summarized. Results: Among the 66 cases, 46, 14, 1, 5 were found in the stomach, small intestine, large intestine, and gastroenteral area. There were 45 cases (97%), 11 cases (79%), 1 case (100%), 5 cases (100%) in order of fusiform cell type. There were 1 case (3%), 2 cases (14%), 0 case, 0 case of upper dermatiform;Mixed type in 0 case, 1 case (7%), 0 case, 0 case;CD117 positive 66 cases (100%), dog-1 positive 66 cases (100%), CD34 positive 61 cases (92%), CD117 and/or CD34 negative 5 cases (8%);CD34, CD117 and dog-1 were negative simultaneously in 0 case. 19 cases (28%) were positive for SMA and 7 cases (11%) were positive for S-100. Conclusion: Fusiform cell type is the common type of GIST, followed by epithelioid type and mixed type, but the tumor sites are different, and the comparison cases are not completely the same. CD117, dog-1 and CD34 are high surface in GIST, and the combination of SMA, S-100 and histomorphology can be used to diagnose most GIST.

关键词： Gastrointestinal Stromal Tumor Immunological Organization CD117 dog-1 CD34

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dog-1在胃肠道间质瘤中的表达及其临床意义

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中华病理学杂志 2011年第5期40卷 315-318页

作者：姜兴莲杨红李科董丹丹胥颖李芳华四川省医学科学院四川省人民医院病理科成都610072

目的探讨dog-1在胃肠道间质瘤（GIST）中的表达及其临床意义.方法应用免疫组织化学EnVision法检测dog-1在84例GIST患者肿瘤组织中的表达,并与CD117、CD34标记进行比较观察.结果 GIST患者手术切除肿瘤组织主要由数量不等的梭形细胞和... 详细信息

目的探讨dog-1在胃肠道间质瘤（GIST）中的表达及其临床意义.方法应用免疫组织化学EnVision法检测dog-1在84例GIST患者肿瘤组织中的表达,并与CD117、CD34标记进行比较观察.结果 GIST患者手术切除肿瘤组织主要由数量不等的梭形细胞和上皮样细胞组成,两种细胞可按不同比例混合性或单一性组成肿瘤的实体.dog-1、CD117和CD34在极低度及低度危险性GIST组织中阳性表达率分别为91.3%（42/46）、95.7%（44/46）和82.6%（38/46）,在中度及高度危险性GIST组织中其阳性表达率分别为100%（38/38）、100%（38/38）和78.9%（30/38）,对照组真性平滑肌瘤、神经鞘瘤、纤维瘤病及正常胃肠道黏膜组织中dog-1、CD117、CD34均无表达,dog-1标记GIST的敏感性及特异性与CD117相似,差异无统计学意义（P＞0.05）,而标记中度及高度危险性GIST的敏感性与特异性明显高于CD34,其表达差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 dog-1是一种新的诊断GIST比较特异的标记,尤其是对中度及高度危险性GIST比CD34有更高的敏感性和特异性.与CD117联合应用将有利于进一步提高GIST的诊断水平.

关键词：胃肠道间质肿瘤原癌基因蛋白质c-kit 抗原 CD34 免疫组织化学 dog-1

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甲状腺乳头状癌中dog-1和C-erbB-2的表达及临床意义

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临床与实验病理学杂志 2017年第12期33卷 1360-1363页

作者：贺亚敏高丽丽李惠钱晓萍南京中医药大学附属医院江苏省中医院病理科南京210029 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院肿瘤中心南京210008

目的探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中dog-1和C-erb B-2的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测48例PTC和30例甲状腺良性病变(结节性甲状腺肿15例、桥本甲状腺炎15例)中dog-1和C-erb B-2蛋白的表达。结... 详细信息

目的探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中dog-1和C-erb B-2的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测48例PTC和30例甲状腺良性病变(结节性甲状腺肿15例、桥本甲状腺炎15例)中dog-1和C-erb B-2蛋白的表达。结果 PTC中dog-1的阳性率(27.08%,13/48)明显高于甲状腺良性病变(0,0/30),两者差异有显著性(P19/48)也明显高于甲状腺良性病变(3.33%,1/30),两者差异有显著性(Pdog-1、C-erb B-2的表达均与患者临床分期、淋巴结转移明显相关;在多灶且有淋巴结转移病例中dog-1与C-erb B-2的表达呈显著正相关(r=0.503,P=0.024)。结论 dog-1及C-erb B-2的表达与PTC的转化、进展密切相关,联合检测可以作为判断PTC的生物学行为、评估其复发风险的重要指标,并为靶向治疗提供可能性。

关键词：甲状腺肿瘤甲状腺乳头状癌 dog-1 C-erbB-2

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dog-1和PKC-θ表达与c-Kit/PDGFRA基因突变在胃肠道间质瘤诊断中的意义

DOG-1和PKC-θ表达与c-Kit/PDGFRA基因突变在胃肠道间质瘤诊断中...

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作者：王超吉林大学

学位级别：硕士

背景胃肠道间质瘤（GIST）是一类起源于胃肠道间叶组织的肿瘤。GISTs诊断的主要依据是形态学特征结合免疫表型KIT蛋白即CD117阳性表达，同时联合检测平滑肌、神经源分化标志物进行鉴别诊断，以排除胃肠道肌源性或神经源性肿瘤。免疫组... 详细信息

背景胃肠道间质瘤（GIST）是一类起源于胃肠道间叶组织的肿瘤。GISTs诊断的主要依据是形态学特征结合免疫表型KIT蛋白即CD117阳性表达，同时联合检测平滑肌、神经源分化标志物进行鉴别诊断，以排除胃肠道肌源性或神经源性肿瘤。免疫组化联合检测CD117和CD34是诊断GIST最有效的方法。但现在认为，至少存在4%-10%的CD117阴性病例，也还有相当一部分肿瘤可以表达CD117，如，黑色素瘤、子宫内膜间质肿瘤、腺样囊性癌、孤立性纤维瘤等，其中有些肿瘤很难与GIST区别开来。最近研究发现，对基因表达谱分析，鉴定出两种新颖的在GISTs高度表达的生物学标志，即dog-1和蛋白激酶C-θ（PKC-θ）。dog-1是一种钙依赖的受体激活的氯离子通道蛋白[41]。有研究表明，dog-1在GISTs的诊断中比CD117的敏感性和特异性更高[3]，约30％的CD117阴性病例中dog-1阳性。 PKC-θ在胃肠道间质瘤中也过度表达[4]。尤其在CD117阴性的GISTs病例中有重要诊断价值。目的探讨dog-1和PKC-θ在胃肠道间质瘤(GISTs）中的表达，以确定其在GISTs中的敏感性和特异性及诊断价值。方法收集吉林大学白求恩第一医院自2010年4月至2012年5月经手术切除的资料完整、诊断明确的GISTs患者组织标本147例，另收集与GIST形态相似的非间叶源性肿瘤组织标本51例，其中平滑肌瘤17例、黑色素瘤4例、平滑肌肉瘤4例、神经鞘瘤21例、腺样囊性癌5例。记录患者的年龄，性别，肿瘤大小，发病部位，组织学类型，危险度分级。对所收集的病例标本应用组织芯片技术，结合免疫组织化学检测147例GISTs及51例非GISTs肿瘤患者中CD117、dog-1、PKC-θ、CD34、Ki-67、SMA、S-100和Desmin的表达;通过PCR产物直接测序法完成c-Kit基因(exon9、11、13和17)和PDGFRA基因(exons12和18)的突变状态检测。采用SPSS18.0软件进行统计学处理，数据分析采用X2检验，Fisher确切概率法分析组间差异和相关分析。结果本研究显示GIST患者中，CD117阳性表达率为94.5%，dog-1为96%，PKC-θ为90.5%。dog-1具有100%的特异性，CD117和PKC-θ的特异性分别为90%和80%。dog-1及PKC-θ的表达与CD117的表达之间没有显著性差异。非GISTs患者中，CD117在总标本中阳性率为9.8%，在4例腺样囊性癌和1例恶性黑色素瘤中表达;PKC-θ在部分平滑肌瘤，恶性黑色素瘤和神经鞘瘤中表达，总阳性率为19.6%;dog-1均呈阴性表达。基因突变检测的42例GISTs中，c-Kit基因突变率为71.5%，PDGFRA基因突变率为7%，野生型c-Kit/PDGFRA基因占21.5%。c-Kit基因突变大部分位于第11外显子，突变类型主要为框内缺失突变，第9外显子的突变类型均为错义突变;PDGFRA基因突变类型主要为第18外显子842个密码子点突变。c-Kit基因第13，17外显子和PDGFRA基因第12外显子没有发生突变。结论1.dog-1的表达还是比CD117稍高，提示dog-1对于GIST的诊断是比CD117更敏感且更特异的免疫组化标记物，与CD117联合应用将有利于进一步提高GIST的诊断水平;2.PKC-θ的检测可以作为GISTs的常规免疫组化诊断指标，尤其是在CD117阴性或dog1也同时阴性时;3.大部分GIST存在c-Kit基因突变，在没发生c-kit基因突变的GIST病例中一部分存在PDGFRA基因突变;4.c-Kit基因突变主要发生在第11外显子，其次为第9外显子，PDGFRA基因突变主要发生在第18外显子;5.在CD117阴性病例和PKC-θ阴性病例中均发生c-Kit和（或） PDGFRA基因突变，提示此时基因突变检测就成为GIST的诊断及治疗的重要依据。

关键词：胃肠道间质瘤 CD117 dog-1 PKC-θ c-Kit基因 PDGFRA基因

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CD117、CD34、dog-1在胃肠道间质瘤中的表达及预后分析

CD117、CD34、DOG-1在胃肠道间质瘤中的表达及预后分析

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作者：郭文文皖南医学院

学位级别：硕士

目的:通过评价CD117、CD34和dog-1等在胃肠道间质瘤中的表达,来分析这些表达的蛋白对肿瘤的特异性识别和对高危患者的生存率预测的影响。方法:回顾性分析皖南医学院第一附属医院2011年8月-2015年9月以来经过病理证实的胃肠间质瘤病人133... 详细信息

目的:通过评价CD117、CD34和dog-1等在胃肠道间质瘤中的表达,来分析这些表达的蛋白对肿瘤的特异性识别和对高危患者的生存率预测的影响。方法:回顾性分析皖南医学院第一附属医院2011年8月-2015年9月以来经过病理证实的胃肠间质瘤病人133例,并应用免疫组化的方法检测GISTs患者中CD117、CD34和dog-1等相关标记物的表达,采用SPSS19.0软件分析上述免疫组织化学指标与临床病理因素(部位、肿瘤大小、核分裂象、组织学类型和危险度)的相关性.结果:其中男性患者70例,女性患者63例,比例为1:0.9。发病时间为2天-数月不等。患者发病年龄最小为41岁,年龄最大为86岁,中位发病年龄64岁,年龄与CD117、CD34、dog-1之间并无统计学意义(P>0.05)。本研究中间质瘤位于胃的占80例(60.15%),其次是小肠37例(27.81%),结直肠为13例(9.77%),最后腹腔或系膜部位3例(2.25%)。其中镜下组织细胞分型中梭形细胞为主型86例,上皮样细胞为主型25例,混合型22例;免疫组化CD117阳性率96.24%(128/133)、CD34阳性率90.2%(120/133)、dog-1阳性率90.2%(120/133)。133例患者随访17个月9个月,失访34例,肿瘤复发25例,其他死亡原因者14例,余60例患者一般情况良好。根据美国国立卫生研究院(NIH)确定的GIST危险度分级(2008年)进行恶性度分级(表2)后,极低危26例(20%)、低危38例(29%)、中危27例(20%)和高危42例(31%)。133例患者随访17-69个月,失访34例,肿瘤复发25例,其他死亡原因者14例,余60例患者一般情况良好。dog-1蛋白的表达与肿瘤的组织学类型之间的关系有显著性差异(P=0.005),CD34的表达与肿瘤的位置之间的关系有显著性差异(P=0.026)。在生存率曲线中,CD117、CD34和dog均无统计学意义(P>0.05),但dog-1阳性表达(P=0.096)患者有更长的生存时间。结论:CD117、CD34和dog可以相互补充提高GIST患者诊断率。肿瘤的形态学特征对预测间质瘤病人的生存时间有着很大的关联性,对每一种情况都进行深入分析对预测患者的生存期起着关键性作用,这可能为其以后的治疗提供帮助。

关键词：胃肠道间质瘤 CD117 CD34 dog-1 预后分析

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胃肠间质瘤伴发其他原发癌11例临床病理学分析

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临床与实验病理学杂志 2014年第10期30卷 1170-1172页

作者：李辛辛林思彤罗元广西医科大学附属南宁市第一人民医院病理科南宁530022 广西医科大学附属肿瘤医院病理科南宁530021

目的探讨胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)伴发其他原发癌的临床病理学及免疫表型特征。方法对11例GIST伴发其他原发癌的病例进行临床病理特征分析,应用免疫组化法检测dog-1在伴发其他原发癌的GIST细胞及原发癌细胞中... 详细信息

目的探讨胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)伴发其他原发癌的临床病理学及免疫表型特征。方法对11例GIST伴发其他原发癌的病例进行临床病理特征分析,应用免疫组化法检测dog-1在伴发其他原发癌的GIST细胞及原发癌细胞中的表达,并复习相关文献。结果伴发其他原发癌的GIST平均直径为1.9 cm,其中伴发食管癌5例(46%);胃癌2例(18%);肝癌、子宫颈癌、胰腺癌和肾癌各1例(各占9%)。组织学类型均为梭形细胞型。生物学危险度分级较低(Pdog-1阳性者11例(100%);癌细胞dog-1阳性者8例(72.7%)。结论 GIST伴发其他原发癌主要为消化系统癌变,组织学以梭形细胞型为主。熟悉GIST伴发其他原发癌的免疫表型和临床病理学特征对该类疾病病理诊断的认识具有重要的意义。

关键词：胃肠间质瘤原发癌临床病理特征 dog-1

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运脾和胃法治疗餐后不适综合征的疗效观察及机制探索

运脾和胃法治疗餐后不适综合征的疗效观察及机制探索

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作者：韩诚正南京中医药大学

学位级别：硕士

目的观察运脾和胃法治疗功能性消化不良餐后不适综合征的临床疗效,并通过动物实验探讨运脾和胃法治疗功能性消化不良餐后不适综合征的作用机理。方法临床研究：采用随机对照研究方法,将60例确诊的功能性消化不良餐后不适综合征脾虚气滞... 详细信息

目的观察运脾和胃法治疗功能性消化不良餐后不适综合征的临床疗效,并通过动物实验探讨运脾和胃法治疗功能性消化不良餐后不适综合征的作用机理。方法临床研究：采用随机对照研究方法,将60例确诊的功能性消化不良餐后不适综合征脾虚气滞证患者分为两组,治疗组30例予以运脾和胃汤口服治疗,对照组30例予以口服多潘立酮治疗,疗程为4周,1个疗程结束后,观察治疗前后两组主要临床症状改善情况,进行疗效评价。实验研究：采用碘乙酰胺灌胃制备功能性消化不良模型,SD大鼠随机分为4组：正常组、模型组、运脾和胃汤组及多潘立酮组,各组连续给药3周后,观察各组大鼠胃窦黏膜组织病理的情况,运用酚红排空实验测定各组大鼠胃排空率,免疫组化法测定胃窦组织中dog-1表达水平。结果临床研究：两组患者在餐后饱胀、早饱、嗳气、上腹胀、餐后恶心等症状改善方面,治疗组优于对照组,差异有统计学意义。治疗组总有效率为93%,对照组总有效率为70%,差异有统计学意义(Pdog-1表达均有升高,差异有统计学意义(Pdog-1表达升高,差异有统计学意义(Pdog-1表达有关。

关键词：运脾和胃法功能性消化不良餐后不适综合征脾虚气滞证胃排空 dog-1

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肠系膜纤维瘤病、孤立性纤维性肿瘤和胃肠道间质瘤的免疫组织化学观察

肠系膜纤维瘤病、孤立性纤维性肿瘤和胃肠道间质瘤的免疫组织化学...

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作者：施娟红山东大学

学位级别：硕士

【目的】探讨肠系膜纤维瘤病(mesenteric fibromatosis, MF)、孤立性纤维性肿瘤(solitary fibrous tumors, SFT)和胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors, GIST)的免疫组织化学鉴别诊断。【方法】本实验运用组织芯片技术结合... 详细信息

【目的】探讨肠系膜纤维瘤病(mesenteric fibromatosis, MF)、孤立性纤维性肿瘤(solitary fibrous tumors, SFT)和胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors, GIST)的免疫组织化学鉴别诊断。【方法】本实验运用组织芯片技术结合免疫组织化学技术对肠系膜纤维瘤病(MF)、孤立性纤维性肿瘤(SFT)和胃肠道间质瘤(GIST)进行CD117、CD34、β-catenin、S-100、Desmi、Bcl-2和dog-1的免疫组化分析。【结果】 ①75%的肠系膜纤维瘤病为β-catenin阳性,而13例胃肠道间质瘤和7例孤立性纤维性肿瘤β-catenin均为阴性;②CD117和dog-1表达于85%以上的胃肠道间质瘤,8例肠系膜纤维瘤病和7例孤立性纤维性肿瘤CD117均为阴性,且8例肠系膜纤维瘤病dog-1均为阴性,仅有少数肠系膜纤维瘤病可以表达dog-1;③71%的孤立性纤维性肿瘤表达CD34和Bcl-2,而仅有少数胃肠道间质瘤表达CD34(23%),8例肠系膜纤维瘤病未表达CD34,Bcl-2表达于13%肠系膜纤维瘤病和77%胃肠道间质瘤。【结论】我们认为组合应用CD117或dog-1、CD34、β-catenin并结合HE染色切片的组织形态特点可以有效地鉴别肠系膜纤维瘤病、孤立性纤维性肿瘤和胃肠道间质瘤。配合应用S-100和Desmin,可以进一步排除肌源性和外周神经源性肿瘤。

关键词：间质瘤免疫组织化学 CD117 CD34 dog-1

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SCIN促进胃癌细胞侵袭机制及胃肠道间质瘤细胞系的建立

SCIN促进胃癌细胞侵袭机制及胃肠道间质瘤细胞系的建立

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作者：刘军言第三军医大学

学位级别：硕士

第一部分摘要 SCIN促进胃癌细胞侵袭机制研究研究背景与研究目的:胃癌在全世界范围内,其发病率排在所有肿瘤的第四位,而死亡率则位居所有肿瘤相关死亡原因的第二位。尽管由于近年来手术技术的发展、放化疗的应用以及早期诊断的增多,胃... 详细信息

第一部分摘要 SCIN促进胃癌细胞侵袭机制研究研究背景与研究目的:胃癌在全世界范围内,其发病率排在所有肿瘤的第四位,而死亡率则位居所有肿瘤相关死亡原因的第二位。尽管由于近年来手术技术的发展、放化疗的应用以及早期诊断的增多,胃癌的死亡率有所下降,但是进展期胃癌患者的生存率仍然很低。许多胃癌患者在经过根治手术以及化疗后,仍然会有复发及转移,而在胃癌发生复发或转移后,其治疗更加困难,手术难度加大。而胃癌细胞的侵袭转移是目前对其治疗的最大难关,目前对胃癌侵袭转移的具体分子机制仍然不甚明了,故阐明胃癌细胞侵袭转移的具体分子机制对胃癌的治疗意义重大。我们课题组前期研究已经表明,SCIN在胃癌组织中存在表达,且表达明显高于癌旁组织,SCIN的表达与患者预后存在明显相关性,SCIN高表达的胃癌患者预后明显差于低表达者,SCIN还具有促进胃癌细胞侵袭转移和成瘤的能力,但是其中的具体分子机制和通路仍然未知。本研究旨在阐明SCIN促进胃癌细胞侵袭和转移能力的具体机制,并探讨SCIN作为胃癌预后指标及成为治疗靶点的可能性。主要材料及方法:1.通过免疫荧光染色的方法来观察在敲低SCIN后,胃癌细胞系MGC803和原代胃癌细胞XN0422的伪足形成能力的变化情况。2.通过q RT-PCR检测敲低SCIN后胃癌细胞系MGC803和原代胃癌细胞XN0422中Cdc42分子RNA表达的改变。3.通过Western blotting检测在敲低SCIN后,胃癌细胞系MGC803和胃癌原代细胞XN0422中Cdc42分子蛋白表达的改变。主要研究结果:1.免疫荧光染色发现,在胃癌细胞系MGC803和原代胃癌细胞XN0422中敲低SCIN后,两种细胞均能观察到敲低组细胞的伪足数量较对照组明显减少。2.通过q RT-PCR检测胃癌细胞系MGC803和原代胃癌细胞XN0422中敲低SCIN后,两种细胞的敲低组Cdc42的RNA表达减少,且较对照组减少约50%。3.通过Western blotting检测胃癌细胞系MGC803和原代胃癌细胞XN0422中敲低SCIN后,两种细胞的敲低组Cdc42的蛋白表达均较对照组减少,而蛋白表达减少量较RNA表达减少量更加明显。主要结论:1.伪足形成能力的改变参与了SCIN促进胃癌细胞的侵袭转移过程。2.敲低SCIN可以降低胃癌细胞中Cdc42的RNA和蛋白质表达量,说明SCIN对伪足形成的调控作用是通过对Cdc42的调控而实现。第二部分摘要胃肠道间质瘤细胞系的建立及特性鉴定研究背景与研究目的:胃肠道间质瘤(Gastrointestinal stromal tumor,GIST)是胃肠道最常见的间叶源性肿瘤,起源于胃肠道间质的Cajar细胞,其发病率约为每年100/10万。胃肠道间质瘤主要发生于胃(50%0%),其次为小肠(20%0%),其他发病部位可包括食管,结直肠甚至消化道外的其他部位(小于10%)。目前原发性胃肠道间质瘤的主要治疗方法是手术切除并配合术后伊马替尼进行靶向治疗。c-kit基因(75%–85%)或者PDGFRA基因(platelet-derived growth factor receptor alpha;5%–7%)发生功能获得性突变是大多数胃肠道间质瘤发病的始动因素,进而使酪氨酸激酶持续激活,并获得不受机体调控的增殖能力。因此胃肠道间质瘤是可以通过酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼类药物进行治疗的。然而伊马替尼也无法治愈此病,耐药后的复发是最主要因素,有多达50%的患者会发生耐药进而肿瘤复发,而发生耐药及复发的时间往往在中位治疗期2年内。尽管目前对伊马替尼耐药的部分机制有所了解,但是对其深层的分子机制仍然知之甚少。而当前对胃肠道间质瘤的研究因为缺乏合适的及容易获取的细胞系而受到限制。据我们所知,目前有公开报道的胃肠道间质瘤细胞系并不多,仅包括GIST-T1、GIST-H1以及GK1C和GK3C。我们的研究旨在建立一株胃肠道间质瘤细胞系,并对其进行相对完整的特性鉴定以使其可以广泛应用于胃肠道间质瘤的研究。主要材料及方法:1.通过组织块法对肿瘤组织进行原代细胞培养,在肿瘤细胞爬出后通过局部传代的方式富集肿瘤细胞,而后通过冻存、复苏和传代以淘汰成纤维细胞并获得稳定的胃肠道间质瘤细胞系。2.通过免疫组织化学染色的方法检测患者肿瘤组织以及移植瘤中的CD117,CD34,dog-1,α-SMA,S-100的表达。3.通过免疫荧光染色的方法检测细胞中CD117分子的表达情况。4.通过免疫细胞化学染色方法,检测细胞中CD117,CD34,dog-1,α-SMA,及S-100的表达。5.通过绘制生长曲线并计算倍增周期的方法以获得其增殖能力特性。通过透射电镜观察细胞微结构,通过核型鉴定分析染色体变异情况。6.通过裸鼠皮下移植瘤形成实验验证其成瘤能力。将裸鼠按照接种细胞数目分为4组:1×104组,1×105组,5×105组,1×106组。每组

关键词：胃癌侵袭转移肌切蛋白伪足 Cdc42 胃肠道间质瘤原代培养 CD117 CD34 dog-1 伊马替尼倍增周期

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