检索结果-南通市图书馆

生物化学与生物物理进展 2023年第9期50卷 2205-2219页

作者：赵昌麒葛科立贾子涵白佳瑶张金玉葛银林青岛大学基础医学院生物化学与分子生物学系山东青岛266071 青岛大学基础医学院免疫学系山东青岛266071

目的研究连接适配体的dna-rna分子作为杂交载体靶向肿瘤细胞并导入功能性rna分子进入细胞的有效性,以及对肿瘤细胞的影响。方法设计合成短的互补dna、rna分子,组装成dna-rna杂合链;连接AS1411适配体为靶向分子,再分别连接p21 sarna和TIG... 详细信息

目的研究连接适配体的dna-rna分子作为杂交载体靶向肿瘤细胞并导入功能性rna分子进入细胞的有效性,以及对肿瘤细胞的影响。方法设计合成短的互补dna、rna分子,组装成dna-rna杂合链;连接AS1411适配体为靶向分子,再分别连接p21 sarna和TIGIT sirna作为药物分子,记为P21 sarna和TIGIT sirna,构成杂交载体,通用结构式为AS1411-dna/rna-sxrna;检测AS1411-dna/rna-sxrna能否靶向结合并进入肿瘤细胞及其对瘤细胞生存、迁移、侵袭和凋亡的影响。结果将设计的杂交载体各部分等摩尔加入杂交缓冲体系并于特定温度条件下孵育,TBM聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到AS1411-dna/rna-sxrna成功组装;AS1411-dna/rna-sxrna杂交载体在10%血清条件下也显示出良好的抗降解稳定性;荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察,SKOV3细胞表面及胞内存在绿色大量荧光信号,杂交载体成功进入肿瘤细胞。杂交载体孵育后:在mrna水平上,p21基因表达(2.14±0.25)是对照组(1.02±0.10)2倍以上,Prna(3.10±0.13)和TIGIT sirna(2.91±0.13)杂交载体孵育组与空白对照组(3.67±0.15)相比,卵巢癌细胞增殖能力显著下降(Prna孵育组愈合率(42.53±2.90)%、TIGIT sirna孵育组愈合率(36.23±3.43)%,明显低于空白对照组(76.47±3.64)%,Prna孵育组(128.25±5.36)、TIGITsirna孵育组(119.50±8.79)低于对照组(186.5±8.56);侵袭能力:P21sarna孵育组(145.5±9.45)、TIGITsirna孵育组(112.25±5.63)也显著低于对照组(202.50±10.12),Prna孵育组(11.74%±2.47%)、TIGIT sirna孵育组(17.12%±2.04%)明显高于对照组(5.66%±1.44%),Pdna/rna-sxrna杂交载体能够有效靶向肿瘤细胞,携带功能性小rna靶向导入肿瘤细胞并调控目的基因表达,使肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力受到抑制;该结果为利用dna-rna偶联AS1411适配体作为靶向工具的杂交载体,靶向杀伤表面表达NCL蛋白的肿瘤细胞提供了实验基础。

关键词： dna-rna杂交载体 AS1411适配体小rna 肿瘤

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