检索结果-南通市图书馆

荧光dna-银纳米簇用于某些疾病相关基因检测的研究

中国化学会第29届学术年会

作者：刘小荣邵娜北京师范大学化学学院

以dna为模板合成的ag ncs具有优良的光学性质,因此受到人们的广泛关注,并已广泛应用于生物识别领域。然而,对于dna-ag ncs的发光机理至今仍不是很清楚。我们通过一系列光谱实现证明,dna-ag ncs的发光是由于发生了从配体dna的富电子原子N... 详细信息

以dna为模板合成的ag ncs具有优良的光学性质,因此受到人们的广泛关注,并已广泛应用于生物识别领域。然而,对于dna-ag ncs的发光机理至今仍不是很清楚。我们通过一系列光谱实现证明,dna-ag ncs的发光是由于发生了从配体dna的富电子原子N到ag ncs金属核的电荷转移。另外,dna-ag ncs的光谱呈现不均匀性——发射波长随激发波长变化而变化,我们通过理论公式计算和实验证明,这是因为dna-ag ncs中表面等离子体和激子之间发生耦合。我们设计的dna的链包含两部分,一部分用于诱导ag ncs的生成,另一部分是能够与溶菌酶特异性结合的核酸适配体,溶菌酶与其适配体结合可以增强ag ncs的荧光,且（F-F0）/F0与溶菌酶浓度在一定范围内呈线性关系,从而可实现对溶菌酶的检测。该研究对进一步理解dna-ag ncs的发光具有重要的意义。

关键词： dna-ag ncs 配体到金属电荷转移耦合溶菌酶

来源： cnki会议评论

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荧光DNA-银纳米簇用于某些疾病相关基因检测的研究

作者：韩丹山西大学

学位级别：硕士

核酸适配体由于其与靶物质结合的高亲和力、高特异性、自身分子质量小、免疫原性低、热/化学稳定性高、靶标分子范围广、化学制备操作简单、成本低等特点被广泛应用于生物传感探针的构建。近年来,dna-ag ncs作为一种新型的荧光纳米材料... 详细信息

核酸适配体由于其与靶物质结合的高亲和力、高特异性、自身分子质量小、免疫原性低、热/化学稳定性高、靶标分子范围广、化学制备操作简单、成本低等特点被广泛应用于生物传感探针的构建。近年来,dna-ag ncs作为一种新型的荧光纳米材料,因其量子效应、小尺寸效应及表面效应等呈现出许多特有的物理化学性质,代替传统的荧光标记物在生物传感和生物成像等领域中得到广泛的应用。本论文构建了一种荧光dna-ag ncs分子探针用于一些疾病相关基因的生物传感和检测。该探针的dna序列由三部分构成:ag ncs的合成模板---富C序列,与靶标完全互补的适配体序列,和与富C序列部分互补的锁定序列。当只有探针dna在PBS溶液中退火时,由于其5?端的富C序列和3?端的锁定序列之间的互补配对,原本处于自由状态的探针将会自组装形成发夹结构,从而将ag ncs的合成模板锁定起来,此时合成ag ncs很容易聚沉形成粒径大的、不具有荧光性质的ag NPs。然而,如果在此体系中加入靶标dna并孵育,由于靶dna与探针上其相应的适配体序列之间的完全互补配对,发夹结构的dna探针即被打开并暴露出ag ncs的合成模板---富C序列,即可合成荧光dna-ag ncs。当被激发时,ag ncs将发射出强烈的荧光信号,成功地实现对靶基因的传感检测。另外,该分子信标设计还可以通过替换适配体序列而通用于不同的靶标的传感检测。而且,如果被合成的几种dna-agncs的发射光谱刚好不重叠时,此传感系统也可以用于多种基因的同时检测。具体研究内容和结果如下所述:（1）由于dna-ag ncs的光学性质高度依赖于dna模板的序列、长度和二级结构,因此本论文通过文献调研,利用常用于ag ncs合成的富C序列并结合靶标基因,设计了四种不同的荧光dna-ag ncs探针首先用于人类免疫缺陷病毒（HIV）基因的检测。在对4种探针的检测性能测试时发现,探针4较之于探针1,2和3传感性能更优越,在其它实验条件都相同的情况下,基于探针4的传感体系的荧光强度增加了几乎20倍。随后,受HIV探针4设计的启发,仅仅通过替换相应的适配体序列,又设计出了另外两个流感病毒基因H1N1和H5N1的检测探针并用于相应靶标的检测。其中H1N1探针展示出了最佳的响应效果,即当靶标H1N1引入后,该传感体系的荧光强度甚至增加了400倍左右,H5N1探针传感系统的荧光也增强了10倍左右。（2）在PBS缓冲体系中,通过紫外可见吸收光谱,荧光光谱,透射电镜,凝胶电泳,以及圆二色光谱等方法进一步研究了检测机理。在优化的实验条件下,对靶标HIV,H1N1,H5N1进行了浓度滴定,发现其检出限分别为3.53、0.12和3.95 nM,检测线性范围分别为5-2000 nM、10-250 nM和50-500 nM,同时在血清中也能实现对靶标的检测,表明该方法有潜在的实际应用价值。（3）尤其可喜的是,我们发现三种ag ncs的荧光发射光谱不重叠,最大发射波长分别为:580 nm、605 nm、680 nm。基于此,我们在缓冲溶液中完成了对HIV、H1N1和H5N1基因的同时检测。（4）最后,基于同样的传感机理,利用其它富C序列和p53基因,本论文合成了六种荧光dna-ag ncs。通过序列和实验条件的优化,实现了对p53基因的定量检测,检出限为3.57 nM,检测线性范围为250-2500 nM。

关键词：适配体dna dna-ag ncs 荧光探针疾病相关基因

基于功能纳米材料的荧光生物传感器的设计、构建及应用研究

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基于功能纳米材料的荧光生物传感器的设计、构建及应用研究

作者：邱芊南京理工大学

学位级别：硕士

纳米材料由于具有尺度上的独特优势,被广泛应用于医药、催化、传感等各个领域。本文利用不同类型的功能纳米材料构建了两种不同类型的荧光传感器,用于特定目标物的检测,探索了纳米材料的参与的荧光生物传感器传感的设计、构建和应用。首... 详细信息

纳米材料由于具有尺度上的独特优势,被广泛应用于医药、催化、传感等各个领域。本文利用不同类型的功能纳米材料构建了两种不同类型的荧光传感器,用于特定目标物的检测,探索了纳米材料的参与的荧光生物传感器传感的设计、构建和应用。首先,以具有发光功能的纳米金属材料——银纳米簇作为传感器的信号发生器,利用银纳米簇对dna模板序列和结构的依赖和特异性适配体,建立灵敏的三磷酸腺苷(ATP)传感器。ATP作为人体内重要的生理指标,其水平检测对各类生理疾病的前期诊断具有重要意义。本工作最终构建了一种基于多色银纳米簇(dna-ag ncs)的比率型荧光生物传感器。该传感系统包含两个核心成分:包含ATP适配体的、锚定序列和用于合成绿色银纳米簇的特殊模板序列的发卡形dna以及一条与锚定序列不完全互补的单链dna(ss dna)。目标物ATP加入后,ATP/适配体复合物的形成可以打开发卡结构并释放锚定序列,锚定序列与ss dna杂交,该过程伴随着绿色荧光的“关闭”和红色荧光的“开启”,通过测量两种信号的荧光强度比成功建立了比率型生物传感器,检测限(LOD)低至0.38μM。同时,该比值生物传感器在实际样品分析中显示出稳定的回收率,并且具有良好的抗干扰能力,显示了其在实际应用中的潜力。其次,以多孔纳米非金属材料——介孔纳米硅球作为传感器的固体基质,利用介孔硅表面氨基和β-二酮结构对稀土发光离子Eu的双重螯合作用,建立了灵敏的左氧氟沙星(LVFX)传感器。左氧氟沙星(LVFX)是一种广泛使用的氟喹诺酮类抗生素,过量使用可能会进入生态循环,对环境造成破坏。在此,我们建立了一种由Eu(III)功能化的氨基化介孔二氧化硅纳米颗粒(Am-MSNs@Eu)用于LVFX荧光传感检测,该传感器通过将Eu作为信号源,和氨基化的MSNs组装形成一个复合系统,通过荧光共振能量传递过程,LVFX中β-二酮二齿配体的可以有效传递能量,敏化Eu@Am-MSNs的发光,从而实现对LVFX的识别。该体系可以快速定性(50秒内)和定量(ppb水平)检测LVFX在水溶液和牛奶上清液中的含量。这是首次尝试使用镧系离子功能化的MSNs构建耦合多个机制检测LVFX的荧光传感器。

关键词：纳米荧光传感器双信号比率型传感器 dna-ag ncs 适配体稀土离子发光介孔二氧化硅复合材料

dna基银和铜银纳米簇性质研究及对H2O2和葡萄糖的检测

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DNA基银和铜银纳米簇性质研究及对H2O2和葡萄糖的检测

作者：杜志伟山西大学

学位级别：硕士

近年来,采用模板法合成贵金属纳米团簇发展迅速,尤其是以dna为模板合成的贵金属纳米团簇因其水溶性好、光学性质良好、和生物相容性高等诸多优点从而作为一种新兴纳米材料广泛应用于生物医药、催化和传感等领域。本文设计了十条dna序列... 详细信息

近年来,采用模板法合成贵金属纳米团簇发展迅速,尤其是以dna为模板合成的贵金属纳米团簇因其水溶性好、光学性质良好、和生物相容性高等诸多优点从而作为一种新兴纳米材料广泛应用于生物医药、催化和传感等领域。本文设计了十条dna序列,包括5条富C序列即c-Kit、c-Myc、c-PS、c-HTG和c-Bcl,以及分别在其3’端添加富G序列的另外5条序列即c-Kit-TBA、c-Myc-TBA、c-PS-TBA、c-HTG-TBA和c-Bcl-TBA,并在不同pH条件下以上述dna序列为模板分别合成了银纳米簇（ag ncs）和铜银纳米簇（Cu/ag ncs）。通过荧光光谱,电子能谱,高分辨透射电子显微镜（HRTEM）等手段对团簇进行表征,利用其过氧化物酶活性实现了对过氧化氢以及葡萄糖的检测。本文主要研究工作如下:（1）首先以上述序列为模板在酸性和中性不同缓冲环境中合成了 ag ncs和Cu/ag ncs,从荧光光谱可以看出,dna模板序列,不同的缓冲环境以及Cu2+的加入都对合成的纳米团簇光学性质有着显著影响。中性和酸性条件下分别有利于ag ncs和Cu/ag ncs的合成,加入Cu2+合成的c-Myc-TBA-Cu/ag ncs无论在酸性或中性环境中都表现出较强的绿色荧光发射,尤其在酸性条件下荧光增强加快,稳定性更好,有利于后续应用。（2）将上述酸性条件下荧光强度大,稳定性好的c-Myc-TBA-Cu/ag ncs采用HRTEM,XPS,AES等手段进行表征,发现其尺寸小且均匀,无聚集现象发生。通过研究对比发现,在富C单链dna（c-Myc）末端连接一段富G序列,及有Cu2+存在下合成的纳米团簇,不仅能显著增强荧光强度和稳定性,而且过氧化物酶活性也大大增强。推测是在dna中的G碱基和团簇中的Cu2+与3,3’,5,5’-四甲基联苯胺的氨基共同作用下来实现的。利用较强的过氧化物酶活性,实现了对过氧化氢和葡萄糖的快速比色检测。该检测方法的线性范围分别为0.1 mM-1 mM和0.1 mM-0.7 mM,对应的检出限为7.42 μM和9.38 μM,能够应用于胎牛血清中葡萄糖的检测并得到良好的回收率,证明其实际应用潜力巨大。

关键词： dna-ag ncs dna-Cu/ag ncs 过氧化物酶活性葡萄糖

荧光dna-银纳米簇对生物分子及汞离子的检测

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荧光DNA-银纳米簇对生物分子及汞离子的检测

作者：李春英山西大学

学位级别：硕士

近些年来,以dna为模板合成的银纳米簇(dna-ag ncs)因其粒径小且具有优异的光学性质而受到科研工作者的广泛关注。结合文献本文设计了不同序列的模板dna来合成ag ncs,并分别对其光学性质进行了研究。从中筛选出荧光性能较好的B-dna-ag NC... 详细信息

近些年来,以dna为模板合成的银纳米簇(dna-ag ncs)因其粒径小且具有优异的光学性质而受到科研工作者的广泛关注。结合文献本文设计了不同序列的模板dna来合成ag ncs,并分别对其光学性质进行了研究。从中筛选出荧光性能较好的B-dna-ag ncs对生物分子和重金属Hg进行了检测,并进一步探究了dna-ag ncs与靶分子的作用机理。主要研究工作如下:(1)设计了不同序列的ssdna模板,合成了有荧光性能的dna-ag ncs,并对dna-ag ncs的光学性质进行了研究。结果表明,不同序列dna合成的ag ncs的荧光性质不同,从中选择了量子产率高(9%)且荧光较稳定的B-dna-ag ncs,进行了后续的检测实验。(2)以B-dna-ag ncs作为荧光探针对生物硫醇(Cys、GSH)和乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性进行了检测。该方法对Cys和GSH的检出限分别为0.134μM和0.172μM,检测范围分别为0-5.0μM和0.5-4.5μM。另外,该方法通过dna-ag ncs荧光强度变化可以间接检测AChE的活性,对AChE活性的检出限为0.071 U/L,检测范围为0-4.0 U/L。进一步对巯基分子与dna-ag ncs作用机理进行了研究。紫外可见吸收结果表明二者作用形成了不发射荧光的复合物,此过程属于静态淬灭;瞬态荧光结果表明巯基分子与dna-ag ncs存在激发态的相互作用,此过程属于动态淬灭;透射电镜结果表明二者相互作用使得dna-ag ncs聚集成较大颗粒进而导致荧光淬灭。该方法还可应用于尿液中生物硫醇的检测。(3)以B-dna-ag ncs为荧光探针对溶液中的Hg进行了检测。该方法对Hg的检出限低至4.5 nM,检测范围为0-150 nM。进一步对Hg与dna-ag ncs可能的作用机理进行了研究。紫外可见吸收结果表明,Hg与dna-ag ncs作用生成了不发射荧光的复合物;综合稳态荧光及瞬态荧光结果分析得出,Hg80 nM时,淬灭过程既存在动态淬灭又存在静态淬灭;透射电镜结果排除了荧光淬灭是由于dna-ag ncs的聚集引起的,另外EDTA和NaBH4的加入并未能使dna-ag ncs的荧光恢复,因此排除了金属间的相互作用。此方法还被应用于湖水及自来水中Hg的检测,具有潜在的应用价值。

关键词： dna-ag ncs 荧光生物硫醇乙酰胆碱酯酶 Hg2+