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利用标准曲线斜率与截距对HBV dna荧光定量PCR实施质量监控

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临床检验杂志 2004年第3期22卷 232-233页

作者：黄学忠杜笑雅吴祥解放军第118医院浙江温州325000

目前普遍采用TaqMan外标技术对HBV dna进行荧光定量，其结果受模板浓度及扩增反应体系的批问差异影响。本文应用HBV dna荧光定量PCR试剂标准曲线的斜率与截距对其实施质量监控，取得了满意的结果。

关键词：标准曲线斜率截距 HBV dna荧光定量 PCR 质量监控

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脂质、血红蛋白、胆红素标本对乙肝病毒dna荧光定量测定的影响

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微循环学杂志 2006年第1期16卷 32-33页

作者：郭华国姚正国湖北省黄冈市第一医院检验科邮政编码黄冈438000

目的:探讨脂血、高胆红素和溶血标本对乙肝病毒dna(HBVdna)荧光定量测定结果的影响。方法:将乙肝大三阳高脂血和非脂血、溶血血清和未溶血血清同时作HBVdna荧光定量检测;将HBVdna阴性黄疸血清和HBVdna阴性正常血清与来自同一份乙肝大三... 详细信息

目的:探讨脂血、高胆红素和溶血标本对乙肝病毒dna(HBVdna)荧光定量测定结果的影响。方法:将乙肝大三阳高脂血和非脂血、溶血血清和未溶血血清同时作HBVdna荧光定量检测;将HBVdna阴性黄疸血清和HBVdna阴性正常血清与来自同一份乙肝大三阳血清混合,在相同条件下进行HBVdna荧光定量。结果:乙肝大三阳溶血与未溶血样本HBVdna含量都在同一数量级。乙肝大三阳高脂血的HBVdna含量明显低于对照标本。高黄疸血清、正常对照血清与相同的HBVdna阳性模板组合后所测得的HBVdna结果无差异。结论:脂血对HBVD-NA定量测定有严重干扰;溶血样本、高胆红素样本对HBVdna测定结果无影响。

关键词：乙肝病毒dna 荧光定量测定高胆红素血红蛋白标本 dna荧光定量溶血样本脂质临床因素系统研究

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HBV—dna荧光定量与血清标志物和GPT检测的相关性探讨

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中国中医药咨讯 2011年第9期3卷 426-426页

作者：杨茂省王娟濮阳市第五人民医院河南濮阳457000

目的探讨本地区PCR检测HBV—dna与乙型肝炎病毒血清标志物佩对半）和谷丙转氨酶检测的相关性。方法用ELISA方法检测HBV感染者乙肝免疫学检测，用PCR方法检测HBV—dna，并对结果进行分析。结果大三阳组标本，HBV—dna阳性率达到97．7％... 详细信息

目的探讨本地区PCR检测HBV—dna与乙型肝炎病毒血清标志物佩对半）和谷丙转氨酶检测的相关性。方法用ELISA方法检测HBV感染者乙肝免疫学检测，用PCR方法检测HBV—dna，并对结果进行分析。结果大三阳组标本，HBV—dna阳性率达到97．7％，与文献报道有些出入[1]；小三阳组标本，HBV—dna阳性率为69．4％，与文献报道基本一致[2]；HBsAg（＋）、HBeAg（＋）组标本，HBV—dna阳性率为90．6％；HBsAg（＋）、HBcAb（＋）组标本，HBv—dna阳性率为71．4％；HB—sag（-）、HBeAg（-），HBV—dna阳性率为4．5％，与文献报道基本一致[3]。HBV—dna阳性患者中，转氨酶异常者占65．5％，HBV—dna阴性患者中，谷丙转氨酶异常者占26．1％。结论HBV—dna荧光定量PCR检测在临床上对乙型肝炎基因诊断，特别是进行抗病毒治疗和治疗监测方面均优于HBV血清学标志物。

关键词：乙型肝炎病毒血清标志物 dna荧光定量 HBV感染者 PT检测相关性 HBsAg(+) 谷丙转氨酶异常荧光定量PCR检测

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八氯二丙醚遗传毒性与作用机理研究及车间空气检测

八氯二丙醚遗传毒性与作用机理研究及车间空气检测

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作者：曾垂焕东南大学

学位级别：硕士

八氯二丙醚(S2)是农药增效剂的主要品种之一。它对拟除虫菊酯类农药、氨基甲酸酯类、有机磷类农药均有增效作用,广泛用于蚊香、喷雾剂、气雾剂和熏蒸剂,配有增效剂的制剂作为农田杀虫剂的品种制剂,在解决抗药性的问题上效果良好。关于S... 详细信息

八氯二丙醚(S2)是农药增效剂的主要品种之一。它对拟除虫菊酯类农药、氨基甲酸酯类、有机磷类农药均有增效作用,广泛用于蚊香、喷雾剂、气雾剂和熏蒸剂,配有增效剂的制剂作为农田杀虫剂的品种制剂,在解决抗药性的问题上效果良好。关于S2安全性的研究国内外均有报道,包括一般毒性、遗传毒性、免疫毒性等,但对其遗传毒性的评价结论并不一致。为深入探讨S2的遗传毒性,本研究进行了体外细胞培养、整体动物实验及接触人群方面的研究。通过dna蛋白交联试验、微核试验、蛋白质氧化试验以及dna合成影响试验,探讨了S2在体外及动物体内实验条件下的遗传毒性,并从氧化应激的角度阐述了其毒性机理;应用气相色谱/质谱联用法检测了成品S2与生产原料在车间空气中的浓度,并进行了生产工人dna蛋白交联、p53蛋白等生物指标的监测;以及S2与人体血红蛋白体外相互作用的研究,通过上述研究工作为进一步评价S2的遗传毒性与毒作用机理,及制定S2生产的职业卫生标准提供科学依据。在体外细胞实验研究中采用MTT法测出S2对CHL细胞的半数生长抑制浓度(IC50)为5.478μg/ml。在此基础上进行氧化损伤实验,结果表明,一定浓度的S2在染毒24h及48h时可诱导CHL细胞产生大量羟自由基,从而导致抗氧化酶活性发生改变,进而影响NO合成与代谢,导致脂质过氧化的发生。应用dna荧光定量测定方法,检测了S2对CHL细胞的dna合成的影响,结果显示,染毒浓度为0.20μg/ml及以上时,随着染毒浓度的增加,dna合成减少,而在该浓度以下时则表现为dna合成增加;0.25μg/ml脱离染毒后4、6、12h内则表现为dna合成继续减少。采用SDS-KCL沉淀法检测了S2对CHL细胞dna蛋白的交联作用,结果显示,染毒0.5、1.0、2.0μg/ml浓度的S2可引起CHL细胞dna-蛋白质交联率较对照组明显升高(Pdna-蛋白质交联(DPC)方面,肺dna-蛋白质交联率随染毒剂量的增加而增加,高、中、低剂量组与对照组比较,差异均有显著性,但并不呈剂量-反应关系,肝仅高剂量(1128 mg/m3)组与对照组比有显著性差异(P荧光染色法观察了染毒不同时间对小鼠外周血网织红细胞微核率的影响,结果未见S2有诱发网织红细胞微核率升高的作用。应用气相色谱/质谱联用法分析了生产车间空气中成品与原料的浓度,结果显示S2仅在成品出口采样点检测到,浓度为1.33 mg/m3,而其它各采样点均可检测到三氯乙烯,浓度范围为0.83～21.82 mg/m3,此外在不同的作业岗位还有二氯甲烷、一氟丙烯、丙烯等有机物的存在。采集S2作业人群静脉血检测氧化损伤、dna-蛋白质交联及p53蛋白表达情况,结果表明,接触组血清SOD、GSH-Px酶活性略高低于对照组,差异无显著性,而脂质过氧化产物MDA的增高与对照组相比差异具有统计学意义。生产工人dna-蛋白质交联率则显著增高,且这种损伤程度与年龄、吸烟等因素不存在关联性(P>0.05),接触组血清p53蛋白水平略高于对照组,差异无显著性,但在接触组中工龄大于8年的人群

关键词：八氯二丙醚氧化损伤 dna蛋白交联微核试验 dna合成羰基含量 dna荧光定量气相色谱/质谱联用

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荧光定量与芯片杂交快速诊断患儿化脓性脑膜炎

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中华检验医学杂志 2006年第3期29卷 265-265页

作者：杨祖钦徐姗吴亦栋楼金吐尚世强浙江大学医学院附属儿童医院中心实验室杭州310003

临床确诊化脓性脑膜炎(化脓)主要依赖脑脊液细菌培养,但其耗时较长,阳性率低,难以适应临床早期诊断.为此,我们对疑似化脑患儿行脑脊液细菌dna荧光定量及芯片杂交检测,并进行脑脊液细菌培养对照,效果较好。

关键词：化脓性脑膜炎 dna荧光定量杂交检测快速诊断患儿芯片细菌培养脑脊液早期诊断阳性率

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