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热带作物学报 2016年第1期37卷 80-85页

作者：刘福平陈淳林志楷福建省亚热带植物研究所福建省亚热带植物生理生化重点实验室福建厦门361006

为了解抗氧化剂减缓长期继代蝴蝶兰类原球茎衰老的机理,本实验在培养基添加抗氧化剂100 mg/L半胱氨酸和8 g/L甘露醇继代类原球茎24个月,分析其相关氧化指标及dna稳定性。结果表明,类原球茎培养期间处理组总活性氧水平变化趋势与对照组不... 详细信息

为了解抗氧化剂减缓长期继代蝴蝶兰类原球茎衰老的机理,本实验在培养基添加抗氧化剂100 mg/L半胱氨酸和8 g/L甘露醇继代类原球茎24个月,分析其相关氧化指标及dna稳定性。结果表明,类原球茎培养期间处理组总活性氧水平变化趋势与对照组不同,处理组比对照组低,对照组总活性氧水平消长趋势与超氧阴离子(O_2^-)生成速率较为一致,处理组则与羟自由基(·OH)相对含量的消长趋势较一致。继代期间丙二醛含量变化趋势与总活性氧水平变化趋势相似,处理组比对照组低。类原球茎dna的SRAP分析结果表明,继代培养期间处理组与对照组间均未发生明显的dna差异。类原球茎dna甲基化程度变化趋势与总活性氧水平变化大体相同,中后期处理组比对照组低。

关键词：蝴蝶兰类原球茎长期继代抗氧化剂氧化指标 dna稳定性

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维持dna结构稳定性的因素

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生物学通报 2012年第6期47卷 12-13页

作者：卢龙斗孙富丛邓传良高武军河南师范大学生命科学学院河南新乡453007

对dna分子结构的稳定性的原因进行了讨论,介绍了维持dna分子一级结构的主要因素,即共价键和核糖上羟基的缺乏;维持dna分子二级结构的主要因素,即氢键、碱基堆积力、正负电荷作用以及dna分子双螺旋结构本身的一些特征。

关键词： dna稳定性碱基堆积力氢键共价键

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生物环境中能提取到dna吗

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生物学教学 2018年第12期43卷 67-68页

作者：龚佐山安徽省六安市霍邱县第一中学六安237400

以dna类型、来源和学生的质疑引入环境dna概念,从dna稳定性因素分析生物环境中能够提取到dna的可能性,简要介绍环境dna的采集和提取方法。

关键词：环境dna 环境样本 dna稳定性采集和提取

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心叶淫羊藿多糖的水酶法提取、抗氧化与抗dna损伤活性评价及保健口服液研制

心叶淫羊藿多糖的水酶法提取、抗氧化与抗DNA损伤活性评价及保健...

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作者：杨娟陕西师范大学

学位级别：硕士

淫羊藿是著名的药食两用植物,心叶淫羊藿是《中华人民共和国药典》记载的五种淫羊藿之一。为了使心叶淫羊藿资源在食品工业中得到更科学合理的利用,本文优选了心叶淫羊藿多糖的提取方法并对其提取工艺进行了优化,在此基础上对比研究了... 详细信息

淫羊藿是著名的药食两用植物,心叶淫羊藿是《中华人民共和国药典》记载的五种淫羊藿之一。为了使心叶淫羊藿资源在食品工业中得到更科学合理的利用,本文优选了心叶淫羊藿多糖的提取方法并对其提取工艺进行了优化,在此基础上对比研究了心叶淫羊藿不同组织部位的多糖含量及其抗氧化活性,并对其结构进行表征,最后研制了一款淫羊藿抗氧化保健的保健口服液,并对其保健功效进行了评价。本文首先对水酶法提取心叶淫羊藿多糖所使用的酶及其配比进行选择优化,然后在确定的混合酶比例下优化水酶法提取淫羊藿多糖的提取条件。接着考察了心叶淫羊藿多糖的提取率,并将水酶法提取与加热法提取和无酶法提取这两种传统提取方法进行对比。水酶法的最优工艺为：混合酶比例（木瓜蛋白酶：纤维素酶：果胶酶）为2.5%：2.0%：1.5%,溶剂pH值为6.0、提取温度50℃、提取时间60 min,此工艺下淫羊藿多糖的提取率达0.93 mg/g。而传统的去酶法和加热法的多糖提取率分别为0.51 mg/g和0.64 mg/g。相比加热法提取,水酶法大大的减少了提取时间、溶剂用量和提取温度。而相较去酶法提取,水酶法提取将心叶淫羊藿多糖的提取率提高了82.4%。本研究进一步对比研究了淫羊藿不同组织部位中多糖含量及其抗氧化活性。结果发现,在心叶淫羊藿的根、茎、叶中,根中的多糖含量最高,且显著高于心叶淫羊藿叶子和茎中的多糖（P＜0.05）。抗氧化活性分析对比发现心叶淫羊藿叶子多糖的抗氧化活性显著高于心叶淫羊藿根和茎多糖的抗氧化活性（P＜0.05）。对心叶淫羊藿叶子的理化性质和其保护dna氧化损伤的活性进行研究分析发现经过水酶法提取的心叶淫羊藿多糖具有很高的纯度,且心叶淫羊藿多糖在酸性溶液中的溶解度显著高于在碱性溶液中的溶解度（P＜0.05）。同时,红外光谱扫描得出水酶法提取出的心叶淫羊藿多糖分子中含有吡喃环和吡喃糖苷的结构,还含有-（CH2）链,并且这个链的数目小于4（n＜4）。最后的凝胶电泳实验发现,心叶淫羊藿多糖具有保护由氧化应激引起的dna损伤的活性,并且这种活性较Vc强。因此,水酶法提取在分离具有一定抗氧化活性和保护dna损伤活性作用的淫羊藿多糖的开发利用中展现出巨大的发展潜力。在对心叶淫羊藿多糖进行提取工艺优化、理化性质分析及体外活性研究后,研制出一款心叶淫羊藿抗氧化保健的口服液：口服液的研制以淫羊藿多糖为主要添加原料同时考察Vc、柠檬酸以及木糖醇的添加量四个因素优化配方。经过正交试验和模糊数学综合评判得出最优配方为添加淫羊藿多糖0.012%、抗坏血酸0.012%、柠檬酸0.020%、木糖醇1.200%时,口服液的感官品质最佳。最后测定得淫羊藿多糖口服液中淫羊藿多糖的含量为0.12mg/mL,该工艺能较好的保存淫羊藿多糖的活性成分。经过抗氧化实验发现,在DPPH实验中口服液的ICso值为3.49μg/mL, Vc的ICso值为4.32 μg/mL;在ABTS实验中,口服液的ICso值为35.72μg/mL, Vc的ICso值为36.37μg/mL。该结果表示淫羊藿口服液的抗氧化活性比抗坏血酸的抗氧化活性高,证明研制的淫羊藿抗氧化保护dna活性口服液具有一定的类似于淫羊藿的保健功效。

关键词：心叶淫羊藿多糖水酶法提取抗氧化 dna稳定性口服液

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马铃薯块茎光照变绿时质体和线粒体dna含量的变化

马铃薯块茎光照变绿时质体和线粒体DNA含量的变化

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作者：张国栋甘肃农业大学

学位级别：硕士

细胞核基因组、质体基因组、线粒体基因组的协调表达是植物正常生长、发育的必要条件。此前有研究报道植物的质体基因组dna和线粒体基因组dna会因光照而降解。在叶绿体光合磷酸化产生的ATP是否会降低细胞对线粒体的需求这两个问题上也... 详细信息

细胞核基因组、质体基因组、线粒体基因组的协调表达是植物正常生长、发育的必要条件。此前有研究报道植物的质体基因组dna和线粒体基因组dna会因光照而降解。在叶绿体光合磷酸化产生的ATP是否会降低细胞对线粒体的需求这两个问题上也存在争论。大多数对变绿过程中叶绿体基因组的研究是以植物的叶片为材料,还缺乏对其他组织器官中的研究,因此我们还不确定植物不同组织器官的叶绿体基因组在稳定性等方面是否存在共性。在本研究中,我们采用马铃薯品种“费乌瑞它”和“夏波蒂”的块茎为实验材料,每一品种的块茎分成两组,分别进行光照(变绿)处理和避光处理;费乌瑞它的光照实验包含两组重量不同的块茎,以研究不同重量块茎在变绿时dna含量的变化。在经过光照(变绿)处理和避光处理后,光照组削取1-2 mm厚的块茎表层变绿组织以提取总dna,避光组则削取与光照组相同部位的组织。然后采用实时定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction;简称real-time PCR)和长链聚合酶链式反应(Long PCR)的方法来分析块茎表皮组织的总dna。***-time PCR实验中的参考引物对B20B22为核基因组(Solanum tuberosum cultivar DM 1-3 516 R44 unplaced genomic scaffold,SolTub.0scf00001,whole genome shotgun sequence)单拷贝区;叶绿体引物对C5C6扩增序列位于叶绿体基因组accD基因(乙酰辅酶A羧化酶β亚基基因acetyl-Co A carboxylase beta subunit)的单拷贝区;线粒体引物对C13C14、C15C16扩增序列位于线粒体基因组的单拷贝区,C13C14对应线粒体ATPase 6基因的片段,C15C16对应线粒体COX I基因的片段,两个基因分别为线粒体呼吸功能关键酶ATP合成酶(ATPase)和细胞色素C氧化酶(COX)的蛋白亚基编码基因,以上引物对依据Li等(未发表)。通过real-time PCR数据分析表明:块茎重量相似时,光照处理组的块茎变绿组织总dna与避光处理组的块茎表皮组织总dna相比,其质体基因组dna拷贝数有所降低,线粒体基因组dna拷贝数也表现出明显地降低;这一结果在马铃薯品种“费乌瑞它”和“夏波蒂”的块茎中均有表现。这可能表明了在经过光照处理的两个马铃薯品种的块茎变绿组织中,细胞对质体总量的需求有所降低,以及细胞降低了对线粒体呼吸作用产生ATP的需求。在块茎重量不同的情况下,较重块茎的细胞器基因组dna拷贝数多于较轻的块茎。较重块茎变绿组织的叶绿体基因组dna拷贝数较多;C13C14所扩增的ATPase 6基因拷贝数增加显著(Pdna中均成功扩增出了长度约8000 bp的序列,结果表明质体基因组dna基本稳定。这些结果表明在两个品种的块茎变绿组织中质体基因组dna拷贝数受光照影响而降低,随块茎质量增大而增加;变绿组织线粒体dna的拷贝数受光照影响降低,随块茎重量增大而增加。

关键词：马铃薯薯块变绿叶绿体线粒体 dna稳定性

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