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胃癌中dna甲基化转移酶3a的表达与幽门螺杆菌感染的关系

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癌症进展 2021年第4期19卷 360-363,406页

作者：杨梦迪王学红潘世锐马雪芹郜茜绽永华李源化李春霞安琪青海大学研究生院西宁810001 北京市海淀医院重症医学科北京100089 青海大学附属医院消化内科西宁8100010

目的探讨胃癌患者胃黏膜上皮组织中dna甲基化转移酶3a(DNMT3a)表达与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法选取胃癌(GC)、腺瘤性息肉(GA)、慢性萎缩性胃炎(CAG)、慢性非萎缩性胃炎(CNAG)患者各30例,比较不同患者胃黏膜组织中DNMT3a mRNA的表... 详细信息

目的探讨胃癌患者胃黏膜上皮组织中dna甲基化转移酶3a(DNMT3a)表达与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法选取胃癌(GC)、腺瘤性息肉(GA)、慢性萎缩性胃炎(CAG)、慢性非萎缩性胃炎(CNAG)患者各30例,比较不同患者胃黏膜组织中DNMT3a mRNA的表达水平及Hp的感染情况。结果4种胃部疾病患者胃黏膜组织中DNMT3a mRNA的相对表达量比较,差异有统计学意义(P﹤0.01)。随着病情的发展,DNMT3a mRNA的相对表达量呈逐渐升高趋势。GC患者胃黏膜组织中DNMT3a mRNA的相对表达量高于CAG和CNAG患者,GA患者胃黏膜组织中DNMT3a mRNA的相对表达量高于CNAG患者(P﹤0.05)。在同种疾病的胃黏膜组织中,Hp感染胃部疾病患者胃黏膜组织中DNMT3a mRNA的相对表达量高于非Hp感染的胃部疾病患者(P﹤0.05)。低分化、伴有淋巴结转移GC患者GC组织中DNMT3a mRNA的相对表达量分别高于高中分化、不伴淋巴结转移的GC患者(P﹤0.05)。结论Hp感染可诱导胃黏膜中DNMT3a高表达,DNMT3a表达的上调可能促进GA、GC的发生发展,Hp感染和DNMT3a可协同作用参与从慢性炎症向GC发展的过程。

关键词：胃癌 dna甲基化 dna甲基化转移酶3a 幽门螺杆菌

青海地区汉族、藏族胃癌患者中甲基化转移酶表达的研究

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青海地区汉族、藏族胃癌患者中甲基化转移酶表达的研究

作者：郝瑞青海大学

学位级别：硕士

目的:检测汉族、藏族甲基化转移酶3a（DNMT3a）在胃癌（GC）组织、癌旁组织、慢性非萎缩性胃炎（CNAG）组织、慢性萎缩性胃炎（CAG）组织的表达,分析汉藏两族DNMT3a表达的差异性,探讨DNMT3a参与胃癌发生的机制。方法:选取经胃镜检查及... 详细信息

目的:检测汉族、藏族甲基化转移酶3a（DNMT3a）在胃癌（GC）组织、癌旁组织、慢性非萎缩性胃炎（CNAG）组织、慢性萎缩性胃炎（CAG）组织的表达,分析汉藏两族DNMT3a表达的差异性,探讨DNMT3a参与胃癌发生的机制。方法:选取经胃镜检查及病理活检确诊的汉族、藏族GC患者各30例作为实验组和癌旁组织各30例及CNAG和CAG患者胃黏膜各30例作为对照组,采用实时荧光定量PCR法检测实验组与对照组DNMT3a表达。结果:***组、癌旁组织组、CNAG组、CAG组中DNMT3a的相对表达量分别为:1.91（1.12,3.26）、0.70（0.52,1.16）、0.69（0.50,1.01）、0.87（0.56,1.75）。GC组织中DNMT3a的相对表达量较癌旁组织组、CNAG组和CAG组明显升高（P＜0.05）,DNMT3a的相对表达量在癌旁组织组、CNAG组与CAG组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。***3a在汉族GC组、癌旁组织组、CNAG组、CAG组胃黏膜活检组织中的相对表达量分别为1.97（1.09,3.31）、0.73（0.52,1.47）、0.71（0.53,0.97）,1.00（0.50,1.71）,藏族同级别病变中相对表达量分别为1.91（1.20,3.25）、0.66（0.54,1.14）、0.60（0.49,1.81）,0.87（0.60,1.99）。DNMT3a在两个民族同级别胃粘膜活检组织中的表达无统计学差异（P＞0.05）。***3a在GC组织中的表达量与GC的分化程度,淋巴结转移有关（P＜0.05）,而与患者的性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、远处转移、TNM分期无关,差异无统计学意义（P＞0.05）。低分化GC组织中DNMT3a表达明显高于中高分化GC（P＜0.05）,淋巴结转移GC组织中DNMT3a表达高于淋巴结无转移的GC组织（P＜0.05）。结论:***3a的表达在汉、藏族同级别胃粘膜活检组织之间无显著性差异,提示民族因素可能并不影响DNMT3a的表达。***3a的表达在慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、癌旁组织中没有差异,在胃癌组织中高于慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、癌旁组织,表明DNMT3a参与了胃癌的发生发展。3.低分化GC组织中DNMT3a表达明显高于中高分化GC,淋巴结转移GC组织中DNMT3a表达高于淋巴结无转移的GC组织,提示DNMT3a参与了胃癌的进展及迁移,动态监测DNMT3a的表达水平对于判断胃癌的进展阶段及预后可能会提供一定的参考。

关键词：胃癌 dna甲基化转移酶3a 实时荧光定量PCR

沉默DNMT3a表达对银屑病样细胞周期进展和细胞增殖的抑制作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2022年第3期48卷 773-782页

作者：潘延斌苏家光谭美乐杨猛覃文飞黄榆秀蒙世豪黄耀辉梁坚强苏雪芳黄姿婵李建民广西医科大学第三附属医院皮肤科广西南宁530031 广西医科大学第一附属医院皮肤科广西南宁530021

目的:探讨沉默dna甲基化转移酶3a(DNMT3a)表达对银屑病样HaCaT细胞周期进展和细胞增殖的抑制作用,阐明其可能机制。方法:收集15例寻常性银屑病患者皮损组织(银屑病组)与15名健康者皮肤组织(对照组)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组... 详细信息

目的:探讨沉默dna甲基化转移酶3a(DNMT3a)表达对银屑病样HaCaT细胞周期进展和细胞增殖的抑制作用,阐明其可能机制。方法:收集15例寻常性银屑病患者皮损组织(银屑病组)与15名健康者皮肤组织(对照组)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组研究对象皮肤组织中DNMT3a mRNA表达水平。siRNA转染技术将沉默DNMT3a表达的si-DNMT3a转染至HaCaT细胞中,RT-qPCR和Western blotting法检测si-DNMT3a的转染效率。采用M5方法诱导HaCaT细胞并建立银屑病样细胞模型,将细胞分为对照组、si-DNMT3a组、si-NC组和HaCaT组。CCK-8法检测各组细胞增殖率,流式细胞术检测不同细胞周期各组细胞百分率,AnnexinⅤ-FITC实验检测各组细胞凋亡率。MSP实验检测银屑病组和对照组研究对象皮肤组织中LATS1基因启动子区甲基化水平。Western blotting法检测各组细胞中大肿瘤抑制基因1(LATS1)、Yes-相关蛋白1(YAP1)、Cyclin D1、CDK6和cleaved caspase-3蛋白表达水平。结果:与对照组比较,银屑病组患者皮肤组织中DNMT3a mRNA表达水平明显升高(P3a mRNA和蛋白表达水平均降低(P3a组HaCaT细胞增殖率和S期HaCaT细胞百分率均升高(P3a组HaCaT细胞增殖率和S期HaCaT细胞百分率均降低(P甲基化水平较对照组升高(P3a组HaCaT细胞中YAP1、Cyclin D1及CDK6蛋白表达水平明显升高(P3蛋白表达水平明显降低(P3a组HaCaT细胞中YAP1、Cyclin D1和CDK6蛋白表达水平降低(P3蛋白表达水平升高(P3a表达可能通过降低LATS1的甲基化水平并下调YAP1的表达,从而抑制银屑病样HaCaT细胞周期进展和细胞增殖,并诱导细胞发生凋亡。

关键词：银屑病 dna甲基化转移酶3a 大肿瘤抑制基因1 Yes-相关蛋白

DNMT3a单核苷酸多态性与噪声性听力损失易感性的关联研究

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卫生研究 2018年第4期47卷 638-643页

作者：郭浩然程剑盛荣建蔡文妍信义亮丁恩民张恒东朱宝立东南大学公共卫生学院南京210009 南京鼓楼医院集团仪征医院南京医科大学公共卫生学院江苏省疾病预防控制中心职业病防治所

目的探讨dna甲基化转移酶3a基因(DNMT3a)的单核苷酸多态性与中国汉族噪声暴露工人的噪声性听力损失(NIHL)易感性之间的关联。方法采用病例-对照的研究方法,以江苏省某化纤工厂和某能源公司2015年参加职业健康体检的噪声暴露的998名作业... 详细信息

目的探讨dna甲基化转移酶3a基因(DNMT3a)的单核苷酸多态性与中国汉族噪声暴露工人的噪声性听力损失(NIHL)易感性之间的关联。方法采用病例-对照的研究方法,以江苏省某化纤工厂和某能源公司2015年参加职业健康体检的噪声暴露的998名作业工人(男性908人,女性90人)为研究对象。通过问卷调查和现场噪声检测(GBZ/T 189.8—2007)获取研究对象的一般信息和噪声暴露情况,按照纯音气导听阈测试(GBZ 49—2014)的结果将其分为病例组(n=498,双耳高频平均听阈>25 dB)和人为匹配的对照组(n=500,双耳高频平均听阈≤25 dB)。采用TaqMan探针法对DNMT3a的单核苷酸多态性位点rs7590760进行基因分型。结果显性模型中,rs7590760各基因型在病例组和对照组之间的分布差异具有统计学意义(P=0.001),运用Logistics回归模型对性别、年龄、吸烟和饮酒情况进行调整后,CC/CG基因型噪声性听力损失发病风险是GG基因型发病风险的1.56倍,调整OR=1.56(95%CI 1.22~2.01)。对接噪工龄和噪声暴露水平进行分层分析后发现,当噪声作业工龄≤16年和>16年时,调整OR分别为1.67(95%CI 1.17~2.38)和1.52(95%CI 1.06~2.17);在≤85 dB、86~92 dB和>92 dB 3种噪声暴露强度下,对应的调整OR分别为1.56(95%CI 1.06~2.30)、1.67(95%CI 0.94~2.99)和1.51(95%CI 1.01~2.26)。结论 DNMT3a基因rs7590760位点的CC/CG基因型可能是中国汉族噪声暴露作业工人发生噪声性听力损失的危险因素。

关键词： dna甲基化转移酶3a 单核苷酸多态性噪声性听力损失易感性职业性疾病

miRNA-143通过DNMT3a介导血管平滑肌细胞增殖作用的研究

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广东医学 2016年第21期37卷 3181-3184页

作者：杨晓玲郭凤英朱光荣马胜超杨安宁贾月霞徐华张鸣号李桂忠姜怡邓宁夏医科大学基础医学院银川750004 宁夏医学科学研究所银川750004

目的探讨miRNA-143(miR-143)和DNMT3a在血管平滑肌细胞增殖中的作用及机制。方法分别用miR-143的前体和抑制物干预血管平滑肌细胞(VSMCs),MTT法检测VSMCs增殖情况,qRT-PCR法检测miR-143和DNMT3a的表达,Western blot法检测DNMT3a的蛋白表达,巢式降落式特异性甲基化PCR法分析miR-143启动子区的甲基化状态,双荧光素酶报告基因检测系统分析荧光素酶活性。结果 miR-143的前体干预VSMCs后,细胞的增殖活性显著下降,DNMT3a mRNA和蛋白表达均降低,而miR-143的抑制物作用后细胞增殖活性明显增强,DNMT3a表达增加;转染miR-143前体后,荧光素酶活性减弱,而用miR-143抑制物作用细胞后,荧光素酶活性明显增强(P3a后,miR-143的表达增加,但miR-143启动子区甲基化程度降低。结论 miR-143和DNMT3a相互调控可能是VSMCs增殖的重要机制。

关键词： miR-143 dna甲基化转移酶3a 血管平滑肌细胞增殖

5-Aza-CdR对绒毛膜癌JEG-3细胞生长及Dnmt3a表达的影响

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中国细胞生物学学报 2010年第1期32卷 73-78页

作者：王元虎丁裕斌陈雪梅刘学庆王应雄何俊琳重庆医科大学公共卫生学院重庆400016

用不同浓度(1、4、8、16、32μmol/L)的dna甲基化酶抑制剂5-Aza-CdR处理绒毛膜癌JEG-3细胞,显微镜下观察细胞形态的变化,MTT法检测5-Aza-CdR对JEG-3细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测5-Aza-CdR对JEG-3细胞凋亡的影响,Transwell小室检测... 详细信息

用不同浓度(1、4、8、16、32μmol/L)的dna甲基化酶抑制剂5-Aza-CdR处理绒毛膜癌JEG-3细胞,显微镜下观察细胞形态的变化,MTT法检测5-Aza-CdR对JEG-3细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测5-Aza-CdR对JEG-3细胞凋亡的影响,Transwell小室检测JEG-3细胞侵袭能力的改变,进一步应用Real Time PCR及Western印迹检测5-Aza-CdR处理细胞后dna甲基化转移酶3a(dna methyltransferase 3a,Dnmt3a)基因及其蛋白的表达变化。研究结果显示,5-Aza-CdR能致细胞皱缩、细胞核聚集成块,可明显抑制细胞增殖,促进其凋亡,降低细胞侵袭力。5-Aza-CdR同时还可抑制Dnmt3a mRNA和其蛋白的表达。

关键词： 5-Aza—CdR 绒毛膜癌 dna甲基化转移酶3a 细胞凋亡

急性髓系白血病中DNMT3a R882突变及HOXD10甲基化的相关性及其临床意义

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急性髓系白血病中DNMT3A R882突变及HOXD10甲基化的相关性及其临...

作者：王蕾蚌埠医学院

学位级别：硕士

背景:急性髓系白血病(Acute myeloid leukemia,AML)是一类髓系造血干细胞分化受阻及增殖异常的血液系统恶性肿瘤。近几年越来越多研究发现成人AML患者中dna甲基化转移酶3a(dna methyltransferase 3a,DNMT3a)的R882位点高频突变,且是患... 详细信息

背景:急性髓系白血病(Acute myeloid leukemia,AML)是一类髓系造血干细胞分化受阻及增殖异常的血液系统恶性肿瘤。近几年越来越多研究发现成人AML患者中dna甲基化转移酶3a(dna methyltransferase 3a,DNMT3a)的R882位点高频突变,且是患者预后不良的重要分子生物学标志。而DNMT3a是重要的dna甲基化转移酶,在dna从头甲基化中起到关键作用。HOXD10则是同源异型盒基因(Homeohox gene,HOX)家族中的一员,在胚胎发育、细胞增殖分化中发挥重要作用。有研究发现HOXD10在DNMT3a R882突变的AML患者中呈现低甲基化趋势。目的:通过检测DNMT3a R882突变型AML患者、DNMT3a野生型AML患者及缺铁性贫血患者骨髓样本的DNMT3a R882突变率、HOXD10甲基化率及DNMT3a mRNA相对表达量,揭示DNMT3a R882突变与HOXD10甲基化之间的相互作用,以及DNMT3a R882突变和HOXD10甲基化在AML的发生发展中可能起到的作用,为AML患者的诊断与治疗提供新思路。方法:收集初发急性髓系白血病患者的骨髓样本116例,及缺铁性贫血患者的骨髓样本30例作为良性对照组。通过基因测序检测骨髓样本中DNMT3a R882突变情况,并将AML组患者分为DNMT3a R882突变型组及DNMT3a野生型组;通过甲基化特异性PCR检测各组样本HOXD10甲基化率;通过逆转录实时荧光定量PCR检测DNMT3a mRNA相对表达量。最后运用相关软件进行统计学分析。结果:1.116例初发AML患者中,DNMT3a R882突变共16例,包括R882H突变9例,R882C突变7例,且均为杂合突变,而良性对照组中无1例突变;DNMT3a R882突变型AML组中NK-AML或M4、M5人数显著多于DNMT3a野生型AML组,且差异有统计学意义(P3a R882突变型AML组患者年龄、外周血白细胞数及血小板数显著高于DNMT3a野生型AML组患者,差异有统计学意义(P0.05)。***3a R882突变型AML组与DNMT3a野生型AML组间患者CR率差异无统计学意义(P>0.05),但DNMT3a R882突变型AML组患者OS率、DFS率均显著低于DNMT3a野生型AML组患者,差异有统计学意(P3a R882突变型AML组HOXD10甲基化率显著低于DNMT3a野生型AML组,差异有统计学意义(P3a mRNA相对表达量在DNMT3a R882突变型AML组、DNMT3a野生型AML组、及良性对照组间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。6.在AML中,HOXD10甲基化组与HOXD10未甲基化组间患者CR率差异无统计学意义(P>0.05),且两组间OS率、DFS率差异也均无统计学意义(P>0.05)。结论:***3a R882突变易发生于AML患者,特别是NK-AML或M4、M5患者,且常合并高龄与高白危险因素;DNMT3a R882位点在AML中易发生R882H突变,其次为R882C突变;DNMT3a R882突变是AML患者预后不良的生物学标志。***3a R882突变可能通过降低DNMT3a酶活性,从而使HOXD10甲基化率下降,但其突变对于DNMT3a酶活性改变在DNMT3a基因转录过程中可能只起到微弱作用。***患者预后与HOXD10是否甲基化无关;DNMT3a R882突变虽然使HOXD10甲基化率下降,但突变患者预后较差的机制可能是通过影响HOXD10以外的其他基因甲基化而实现的。

关键词：急性髓系白血病 dna甲基化转移酶3a 同源盒基因D10

miR-26a-5p下调DNMT3a表达抑制心肌成纤维细胞活化增殖的机制研究

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中国循证心血管医学杂志 2020年第10期12卷 1179-1184页

作者：何涛丁安周文杰杨仁杰湖北江汉油田总医院心血管内科潜江433124 湖北省人民医院心血管内科武汉430000

目的研究miR-26a-5p在SD大鼠心肌纤维化心脏组织中的表达及通过下调dna甲基化转移酶3a(DNMT3a)对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法构建SD大鼠心肌纤维化模型,HE和Masson法观察病理学改变,qRT-PCR检测miR-26a-5p的表达,Western blot... 详细信息

目的研究miR-26a-5p在SD大鼠心肌纤维化心脏组织中的表达及通过下调dna甲基化转移酶3a(DNMT3a)对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法构建SD大鼠心肌纤维化模型,HE和Masson法观察病理学改变,qRT-PCR检测miR-26a-5p的表达,Western blot法测定Col1A1、α-SMA、DNMT3a表达。TargetScan预测miR-26a-5p与DNMT3a间靶向结合关系,双荧光素酶报告基因实验进行验证;提取SD乳鼠心肌成纤维细胞,将miR-NC、miR-26a-5p、miR-26a-5p和pcdna 3.1及miR-26a-5p和pcdna 3.1-DNMT3a转染至细胞中,分别记为miR-NC组、miR-26a-5p组、miR-26a-5p+Vector组和miR-26a-5p+DNMT3a组。qRT-PCR检测miR-26a-5p、DNMT3a、Col1A1和α-SMA mRNA水平,Western blot测定DNMT3a、Col1A1和α-SMA蛋白表达,MTT法检测心肌成纤维细胞增殖能力。结果ISO组SD大鼠心肌细胞排列紊乱,组织胶原沉积明显增多,Col1A1、α-SMA、DNMT3a蛋白表达升高,miR-26a-5p表达降低。TargetScan预测DNMT3a是miR-26a-5p的潜在靶基因。双荧光素酶报告基因实验检测结果显示,miR-26a-5p组心肌成纤维细胞中DNMT3a-Wt荧光素酶活性[(0.38±0.05)vs.(1.03±0.11),P3a-Mut荧光素酶活性[(0.97±0.09)vs.(0.99±0.10),P>0.05]与miR-NC组比较无明显差异,提示DNMT3a是miR-26a-5p的一个靶基因。与miR-NC组比较,miR-26a-5p组心肌成纤维细胞中Col1A1[(0.42±0.04)vs.(1.04±0.09),(0.33±0.03)vs.(0.77±0.08),P3±0.06)vs.(1.02±0.10),(0.36±0.04)vs.(0.86±0.09),P3a[(0.25±0.03)vs.(0.97±0.09),(0.32±0.03)vs.(0.75±0.08),P3a可逆转miR-26a-5p对心肌成纤维细胞活化增殖的抑制作用。结论miR-26a-5p在SD大鼠心肌纤维化心脏组织中低表达,miR-26a-5p可能通过下调DNMT3a来抑制心肌成纤维细胞的活化增殖,从而改善心肌纤维化。

关键词： miR-26a-5p dna甲基化转移酶3a 心肌成纤维细胞心肌纤维化

DNMT3a R882突变在急性髓系白血病中的临床意义

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蚌埠医学院学报 2020年第3期45卷 327-330,334页

作者：王蕾杨艳丽张凤李佳佳耿英华李骏蚌埠医学院第一附院医院血液科安徽蚌埠233004

目的:研究初发急性髓系白血病(AML)病人中dna甲基化转移酶3a(DNMT3a)R882位点突变情况,并分析其相关临床资料特征。方法:运用dna基因测序法检测116例AML病人与30例缺铁性贫血病人骨髓样本中DNMT3a R882突变情况。结果:116例初发AML病人... 详细信息

目的:研究初发急性髓系白血病(AML)病人中dna甲基化转移酶3a(DNMT3a)R882位点突变情况,并分析其相关临床资料特征。方法:运用dna基因测序法检测116例AML病人与30例缺铁性贫血病人骨髓样本中DNMT3a R882突变情况。结果:116例初发AML病人中,DNMT3a R882突变共16例,包括R882H突变9例,R882C突变7例,且均为杂合突变,而良性对照组中无突变;DNMT3a R882突变型AML(Mut-DNMT3a)组病人核型正常的AML(NK-AML)人数及M4、M5人数多于DNMT3a野生型AML组(Wild-DNMT3a组)(P3a组病人年龄、外周血白细胞数及血小板数高于Wild-DNMT3a组(P3a组病人总生存率、无病生存率均低于Wild-DNMT3a组(P3a R882突变易发生于AML病人,特别是NK-AML及M4、M5病人,且常合并高龄、高白细胞危险因素;DNMT3a R882突变是AML病人预后不良的生物学标志。

关键词：急性髓系白血病 dna甲基化转移酶3a 突变