检索结果-南通市图书馆

有氧运动对青年期小鼠海马体Cdc42及dna损伤反应相关因子的短期和长期影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国病理生理杂志 2023年第11期39卷 1956-1963页

作者：骆远宋诗语赵格彭爽李良鸣刘淑靖广州体育学院广东广州510500 广州理工学院广东广州510540 广东科技学院广东东莞523083

目的:探讨有氧运动对青年期小鼠海马体细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle protein 42,Cdc42)及dna损伤反应(dna-damage response,DDR)相关因子的短期和长期影响。方法:构建运动小鼠模型,将40只8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为... 详细信息

目的:探讨有氧运动对青年期小鼠海马体细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle protein 42,Cdc42)及dna损伤反应(dna-damage response,DDR)相关因子的短期和长期影响。方法:构建运动小鼠模型,将40只8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为安静组和运动组,每组20只,均使用普通饲料喂养。运动组小鼠进行12周的中等强度(75%VO_(2)max)跑台运动,安静组小鼠在不跑步的情况下暴露于跑步机噪声和振动中。12周训练结束后,从安静组和运动组中随机选取小鼠各10只(5月龄),分别为安静青年期小鼠(Sed-young)组和运动青年期小鼠(Exe-young)组;剩余的10只安静组小鼠和10只运动组小鼠继续喂养至老年期(18月龄),作为安静老年期小鼠(Sed-old)组和运动老年期小鼠(Exe-old)组。所有小鼠均收集Y迷宫、体成分数据及海马体组织,通过Cdc42活性检测和Western blot法比较各组小鼠海马体Cdc42-GTP活性及Cdc42蛋白表达情况,通过RT-qPCR比较各组小鼠海马体Cdc42、Pak4、Pak5、Cofilin、Chk2、Atm和P53等DDR相关因子的mRNA水平。结果:与安静组比较,有氧运动可显著降低青年期小鼠脂肪百分比(Pdna损伤而死亡或衰老直至老年期。

关键词：运动海马体细胞分裂周期蛋白42 dna损伤反应衰老

维普期刊数据库博看期刊

端粒保护蛋白TPP1调控食管鳞癌细胞dna损伤反应及其对顺铂化疗敏感性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

端粒保护蛋白TPP1调控食管鳞癌细胞DNA损伤反应及其对顺铂化疗敏...

作者：文继林川北医学院

学位级别：硕士

背景:食管鳞状细胞癌（Esophageal squamous cell cancer,ESCC）是我国常见恶性肿瘤之一。世界卫生组织（WHO）数据显示,2020年我国食管癌新发病例42.4万例,死亡病例30.1万例,分别占全球食管癌发病数的53.7%,死亡数的55.4%。ESCC具有早... 详细信息

背景:食管鳞状细胞癌（Esophageal squamous cell cancer,ESCC）是我国常见恶性肿瘤之一。世界卫生组织（WHO）数据显示,2020年我国食管癌新发病例42.4万例,死亡病例30.1万例,分别占全球食管癌发病数的53.7%,死亡数的55.4%。ESCC具有早期发病隐匿,恶性程度高,易复发和转移等特点,缺乏准确的肿瘤检测标志物,导致大多数ESCC患者确诊时多处于中晚期,错过手术治疗黄金时期,故多采用放化疗以及靶向治疗。顺铂作为临床常用化疗药物,用于多种恶性肿瘤的治疗,但长期使用易产生化疗耐药,并且其耐药机制目前尚未具体阐明,为此寻找增加肿瘤细胞化疗敏感性的新方法就显得尤为重要。进一步阐明ESCC发生发展的潜在分子作用机制,对降低ESCC发病率和死亡率具有重要意义。肿瘤是机体在各种致癌因素作用下,局部组织的某一个细胞在基因水平上失去对其增殖的正常调控,导致其克隆性异常增生而形成的新生物。目前,恶性肿瘤已经成为威胁我国国民生命健康的主要因素之一,因其具有分化增殖异常、高浸润性以及高转移性等特点,给患者造成巨大的经济负担并影响其生存质量。研究发现,与机体正常细胞相比,大多数肿瘤细胞的端粒长度不会随着增殖次数的增加而缩短,这可能与其无限增殖的生物学属性存在潜在联系。因此,研究肿瘤发病机制对肿瘤治疗策略的制定具有重要意义。端粒作为存在于真核细胞线性染色体末端的特殊结构,由串联重复的dna序列（TTAGGG）和蛋白质组成,参与维持染色体结构完整性和基因组稳定性。端粒保护蛋白复合体作为端粒重要组成部分之一,即Shelterin结构,由六个蛋白质亚基组成:TPP1、POT1、TRF1、TIN2、TRF2和Rap1。TPP1作为Shelterin结构发挥端粒保护功能的关键分子之一,通过与POT1相互结合形成TPP1-POT1异源二聚体招募端粒酶加入到端粒末端,复制延长端粒。同时TPP1-POT1异源二聚体可介导POT1对端粒单链dna 3’末端的保护,避免其被错误识别为断裂dna,激活ATM依赖的dna损伤反应,影响染色体结构稳定性和基因组稳定性。此外,TPP1异常表达与多种肿瘤密切相关,如慢性淋巴细胞白血病、胶质瘤和黑色素瘤等。课题组前期研究发现,在小鼠成纤维细胞中抑制TPP1表达可诱发ATM依赖的dna损伤反应,继而激活p53介导的细胞衰老,但在缺乏ATM依赖的dna损伤反应情况下,TPP1缺失则导致端粒功能障碍,促进正常细胞的恶性转化,最终导致肿瘤的形成。由此,我们作出科学推测:TPP1表达异常可能与ESCC发生发展存在潜在联系,但其具体分子机制尚不明确。本研究拟通过在ESCC细胞中干预TPP1表达,探索TPP1表达异常是否参与ESCC发生发展及其可能的分子机制,为ESCC的诊断治疗提供潜在的肿瘤标志物和治疗靶点。此外,我们发现在胃鳞癌细胞中抑制TPP1表达可以抑制其增殖活力,增加其对顺铂的化疗敏感性,进而促进胃鳞癌细胞凋亡。本实验使用顺铂处理敲低和过表达TPP1的ESCC细胞,探究TPP1表达水平与ESCC细胞顺铂化疗敏感性的关系。目的:1.阐明TPP1在ESCC发生发展中的生物学作用。2.阐明TPP1调控ESCC细胞dna损伤反应的分子机制。3.探索TPP1与ESCC细胞顺铂化疗敏感性的关系。方法:1.借助生物信息学数据库分析TPP1 m RNA和蛋白在ESCC组织和癌旁组织中的表达水平。2.构建包含TPP1敲低质粒的慢病毒并感染ESCC细胞KYSE150和TE1;q RT-PCR检测转染TPP1敲低质粒后ESCC细胞中TPP1 m RNA表达水平;Western blot检测转染TPP1敲低质粒后ESCC细胞TPP1蛋白及下游相关蛋白的表达水平;CCK-8实验检测敲低TPP1后ESCC细胞增殖活力变化;细胞划痕实验检测敲低TPP1后ESCC细胞迁移能力变化;流式细胞术检测敲低TPP1后ESCC细胞生长周期变化;β-半乳糖苷酶染色评估敲低TPP1后ESCC细胞衰老变化;细胞免疫荧光实验检测敲低TPP1后ESCC细胞核中蛋白γ-HAX表达水平;彗星实验评估敲低TPP1后ESCC细胞dna损伤严重程度。3.裸鼠荷瘤模型体内评估敲低TPP1对ESCC细胞体内成瘤的影响;q RT-PCR检测ESCC移植瘤组织中TPP1 m RNA表达水平;Western blot检测ESCC移植瘤组织中TPP1、p ATM、p ATR和γ-HAX等蛋白表达水平;免疫组织化学染色（Immunohistochemistry,IHC）检测ESCC移植瘤组织中TPP1、γ-HAX和Ki67蛋白表达水平。4.构建TPP1过表达慢病毒感染敲低TPP1的ESCC细胞KYSE150和TE1;q RT-PCR检测转染TPP1过表达质粒后ESCC细胞中

关键词：食管鳞状细胞癌 TPP1 dna损伤反应 ATM/ATR-p53信号通路顺铂

H19参与幽门螺杆菌CagA诱导的胃癌细胞dna损伤反应和恶性进程

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

H19参与幽门螺杆菌CagA诱导的胃癌细胞DNA损伤反应和恶性进程

作者：何小凤贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:探究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)细胞毒素相关基因A蛋白(Cytotoxin associated gene A protein,CagA)是否调控lncRNA H19表达,以及是否参与其诱导胃癌细胞的dna损伤反应和细胞的恶性进程。方法:(1)生物信息学分析H19在胃... 详细信息

目的:探究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)细胞毒素相关基因A蛋白(Cytotoxin associated gene A protein,CagA)是否调控lncRNA H19表达,以及是否参与其诱导胃癌细胞的dna损伤反应和细胞的恶性进程。方法:(1)生物信息学分析H19在胃癌组织中表达定位情况及与预后的关系。(2)用*** CagA阳性野生株GZ7/cagA和CagA基因敲除突变株GZ7/ΔcagA分别以MOI为60:1感染胃癌细胞AGS、SGC7901 24h,提取总RNA,实时荧光定量PCR检测H19的表达;荧光原位杂交检测GZ7/cagA、GZ7/ΔcagA感染后H19的表达及细胞亚定位。(3)用过表达H19质粒(pc dna3.1-H19)转染AGS、SGC7901细胞,构建高表达H19的细胞模型,q PCR检测H19的表达,WB检测dna损伤修复关键蛋白γH2A.X、P53和Rad51表达,免疫荧光技术检测细胞中γH2A.X的表达及定位情况;细胞划痕实验、transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力。(4)用RNA干扰技术下调AGS、SGC7901细胞中H19基因表达,再经GZ7/ΔcagA和GZ7/cagA感染,实时荧光定量PCR检测H19的表达变化;WB检测dna损伤关键蛋白γH2A.X、P53和RAD51的表达,免疫荧光技术检测γH2A.X的表达及定位;实时无标记高通量细胞分析实验、细胞划痕实验和transwell实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力,分析H19敲低对*** CagA引起的dna损伤及细胞增殖、侵袭迁移的影响。(5)用RNA pull-down技术通过sense-H19下拉GZ7/cagA感染AGS细胞中H19互作蛋白,结合质谱鉴定寻找与***感染相关的H19结合靶蛋白,并分析***及H19对靶蛋白表达的影响;流式细胞术检测H19基因敲低对***感染细胞周期分布的影响。结果:(1)TCGA数据库分析显示H19在胃癌中高表达,且与预后不良显著相关。(2)与未感染对照组比较GZ7/cagA和GZ7/ΔcagA感染AGS、SGC7901细胞中H19表达升高,GZ7/cagA感染组H19表达升高更明显,差异具有统计学意义(Pdna3.1-H19转染AGS、SGC7901细胞中H19表达升高(Pdna损伤修复关键蛋白γH2A.X表达增加,P53、Rad51降低;细胞划痕、transwell实验表明过表达H19可以明显的促进细胞的侵袭和迁移(Pdna损伤修复关键蛋白γH2A.X明显增加,P53、Rad51表达降低,免疫荧光γH2A.X的平均荧光强度增加,细胞增殖、侵袭迁移能力增强,敲低H19基因后可以抑制GZ7/cagA感染引起细胞的dna损伤、增殖和侵袭迁移(Pdna损伤反应过程,并促进胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移。(2)YWHAZ可能作为H19的结合蛋白,在***感染促进H19高表达所参与的细胞周期中发挥作用。

关键词：幽门螺杆菌 CagA蛋白 H19 dna损伤反应

dna损伤反应相关lncRNA的筛选及初步功能分析

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

军事医学 2018年第11期42卷 828-833页

作者：唐晶王瑞国郑晓飞杜彩素付汉江大连大学附属中山医院辽宁大连116001 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850

目的通过多柔比星(阿霉素)处理诱导细胞dna损伤,筛选出与dna损伤相关的长链非编码RNA(lncRNA)分子。方法阿霉素处理宫颈癌HeLa细胞和乳腺癌MCF-7细胞诱发dna损伤,lncRNA芯片筛选与dna损伤相关的lncRNA分子。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验... 详细信息

目的通过多柔比星(阿霉素)处理诱导细胞dna损伤,筛选出与dna损伤相关的长链非编码RNA(lncRNA)分子。方法阿霉素处理宫颈癌HeLa细胞和乳腺癌MCF-7细胞诱发dna损伤,lncRNA芯片筛选与dna损伤相关的lncRNA分子。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证这些lncRNA在dna损伤反应中表达量的变化。双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA对p53转录活性的影响。结果与结论发现部分lncRNA的表达量在dna损伤反应过程中发生显著改变,且这些lncRNA表达变化具有一定细胞类型特异性。dna损伤反应中部分lncRNA的表达变化依赖于p53,同时发现lncRNA HG512439对p53的转录活性具有一定调控作用。

关键词： dna损伤反应长链非编码RNA p53基因宫颈肿瘤乳腺肿瘤 HeLa细胞

温石棉暴露诱发核糖体dna拷贝数变异及dna损伤反应研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

预防医学 2022年第6期34卷 547-554页

作者：刘佳琪冯玲芳陈俊斐夏海玲蒋兆强吴帆龚晓雪楼建林杭州医学院公共卫生学院浙江杭州310013

目的探索温石棉暴露对核糖体dna(rdna)拷贝数的影响及其与dna损伤反应的关系,为石棉致癌机制研究提供依据。方法分别用1.25、2.5、5μg/cm^(2)(低、中、高浓度)的温石棉悬液处理MeT-5A人胸膜间皮细胞,磷酸盐缓冲液处理作为对照。分别收... 详细信息

目的探索温石棉暴露对核糖体dna(rdna)拷贝数的影响及其与dna损伤反应的关系,为石棉致癌机制研究提供依据。方法分别用1.25、2.5、5μg/cm^(2)(低、中、高浓度)的温石棉悬液处理MeT-5A人胸膜间皮细胞,磷酸盐缓冲液处理作为对照。分别收集处理6、24、48和72 h的细胞,采用实时荧光定量PCR检测rdna拷贝数及核仁蛋白基因BIRC5、HRAS、GINS4和RRM2 mRNA表达;使用Muse细胞分析仪及相应试剂盒检测细胞凋亡和dna损伤。比较不同处理时间不同温石棉浓度组细胞rdna拷贝数、dna损伤反应和核仁蛋白基因mRNA表达水平。结果温石棉悬液处理6、48、72 h时,低、中、高浓度组和对照组45S rdna拷贝数差异均有统计学意义(Pdna拷贝数均低于对照组(Pdna拷贝数高于低、中浓度组(Pdna拷贝数比较,差异均有统计学意义(Pdna拷贝数均低于对照组(Pdna拷贝数均低于低浓度组(Pdna双链断裂率比较,差异均有统计学意义(Pdna双链断裂率均高于对照组(Pdna拷贝数变异,引起相关核仁蛋白表达改变,可能参与dna损伤反应过程的调控。

关键词：温石棉核糖体dna 拷贝数变异 dna损伤反应核仁蛋白

六价铬诱发rdna拷贝数变异对不同细胞系dna损伤反应的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

预防医学 2023年第5期35卷 374-379页

作者：吴帆冯玲芳陈俊斐蒋兆强龚晓雪秦瑶楼建林杭州医学院公共卫生学院浙江杭州310013 湖州师范学院浙江湖州313000

目的观察六价铬暴露致rdna拷贝数变异对不同细胞系dna损伤反应的影响,为六价铬诱发rdna拷贝数变异参与dna损伤反应过程的研究提供思路和方法。方法人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)和人胚肺细胞(MRC-5)采用2μmol/L重铬酸钾10μL染毒,24 h后去... 详细信息

目的观察六价铬暴露致rdna拷贝数变异对不同细胞系dna损伤反应的影响,为六价铬诱发rdna拷贝数变异参与dna损伤反应过程的研究提供思路和方法。方法人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)和人胚肺细胞(MRC-5)采用2μmol/L重铬酸钾10μL染毒,24 h后去毒,置于新鲜培养基继续孵育,对照组用等体积磷酸盐缓冲液处理;收集染毒24 h、去毒后3 d和去毒后7 d的细胞,采用实时荧光定量PCR法检测rdna拷贝数;采用Muse细胞分析仪检测细胞周期、细胞凋亡和dna损伤情况,通过共济失调毛细血管扩张突变基因(ATM)激活率、dna双链断裂率和变体组蛋白(H2A.X)磷酸化率评估dna损伤情况。结果MRC-5细胞背景45S rdna(1.54±0.26)和5S rdna拷贝数(6.97±1.07)高于BEAS-2B细胞(1.02±0.18和3.00±0.15)(均Pdna拷贝数(0.80±0.04)低于对照组,BEAS-2B细胞45S rdna拷贝数(1.43±0.07)高于对照组(均Pdna双链断裂率(4.45%±0.85%)和H2A.X磷酸化率(1.68%±0.56%)均高于对照组(1.53%±0.61%、1.18%±0.22%、0.97%±0.21%和0.29%±0.06%)(均Pdna拷贝数变异对不同细胞系dna损伤反应的影响不同,背景rdna拷贝数较低的BEAS-2B细胞反应更明显,而背景rdna拷贝数较高的MRC-5细胞相对稳定。

关键词：六价铬核糖体dna 拷贝数变异 dna损伤反应

下调髓系白血病细胞系K562细胞中乳腺癌缺失因子1表达对其dna损伤反应的作用初探

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海医学 2022年第2期45卷 77-84页

作者：董林田晓雪梁爱斌同济大学附属同济医院血液科上海200065

目的探讨乳腺癌缺失因子1(DBC1)在慢性髓系白血病细胞系K562细胞dna损伤反应(dna damage response,DDR)中的作用。方法采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测DBC1在白血病及淋巴瘤细胞中的表达水平。通过RNA干扰(RNAi)... 详细信息

目的探讨乳腺癌缺失因子1(DBC1)在慢性髓系白血病细胞系K562细胞dna损伤反应(dna damage response,DDR)中的作用。方法采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测DBC1在白血病及淋巴瘤细胞中的表达水平。通过RNA干扰(RNAi)技术构建稳定的DBC1基因沉默的K562细胞,分为干扰组(DBC1-sh1和DBC1-sh2组)和阴性对照组[无效慢病毒组(SCR组)]。通过依托泊苷(etoposide,vp16)诱导dna损伤。溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)核酸掺入实验检测DBC1下调后K562细胞在dna损伤前后细胞周期分布变化。克隆形成实验检测DBC1对K562细胞克隆形成能力的影响。流式细胞术检测DBC1下调后K562细胞在dna损伤前后细胞凋亡的变化。蛋白质印迹法检测dna损伤相关蛋白(γ-H2AX)和dna损伤修复相关通路蛋白表达情况。单细胞凝胶电泳分析K562细胞dna损伤程度。查询癌症基因组图谱(TCGA)肿瘤数据库,采用Kaplan-Meier生存分析研究DBC1表达与髓系白血病患者生存率的关系。结果DBC1高表达的髓系白血病患者总体生存率显著低于低表达者(Pdna损伤程度显著重于SCR组(Pdna损伤应答反应的重要蛋白,具有调节K562细胞dna损伤应答的作用。

关键词：乳腺癌缺失因子1 dna损伤反应白血病,髓样

基因转录后调控在dna损伤反应中的重要功能

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

遗传 2014年第4期36卷 309-315页

作者：林德玲罗瑛宋宜昆明理工大学医学院昆明650500 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

dna损伤发生时,细胞会激活一系列复杂的信号网络来调控细胞周期检查,完成dna损伤修复或当损伤超过修复能力时诱导凋亡,这一信号网络被称为dna损伤反应(dna damage response,DDR)。以往DDR信号网络的研究主要集中于基因转录调控和蛋白共... 详细信息

dna损伤发生时,细胞会激活一系列复杂的信号网络来调控细胞周期检查,完成dna损伤修复或当损伤超过修复能力时诱导凋亡,这一信号网络被称为dna损伤反应(dna damage response,DDR)。以往DDR信号网络的研究主要集中于基因转录调控和蛋白共价修饰对功能分子的稳定性和活性调控。近年来,mRNA稳定性调控和mRNA翻译调控等基因转录后调控机制在DDR中的重要作用引起研究者越来越多的关注。研究证明:多种microRNAs和RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBPs)在转录后水平调控诸多重要功能蛋白的表达,在DDR信号网络中起着不可或缺的作用。文章针对DDR反应中转录后调控的研究进展以及参与其中的microRNAs和RBPs进行阐述和讨论。

关键词： dna损伤反应 microRNAs RNA结合蛋白转录后调控

西达本胺诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡及与dna损伤反应的相关性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验血液学杂志 2015年第2期23卷 450-454页

作者：徐莉唐海龙龚雪辛晓丽董莹高广勋舒汨汨陈协群第四军医大学第一附属医院血液内科中国人民解放军血液病专病中心陕西西安710032

目的:本研究旨在探讨新型组蛋白脱乙酰酶抑制剂(HDACi)西达本胺对人多发性骨髓瘤(MM)细胞凋亡的影响及其与dna损伤反应(DDR)的相关性。方法:采用MTT法检测西达本胺对MM细胞系RPMI8226的增殖抑制作用;应用流式细胞术分析靶细胞凋亡及细... 详细信息

目的:本研究旨在探讨新型组蛋白脱乙酰酶抑制剂(HDACi)西达本胺对人多发性骨髓瘤(MM)细胞凋亡的影响及其与dna损伤反应(DDR)的相关性。方法:采用MTT法检测西达本胺对MM细胞系RPMI8226的增殖抑制作用;应用流式细胞术分析靶细胞凋亡及细胞周期分布;采用Western blot检测靶细胞目标蛋白表达;应用ATM激酶特异性抑制剂KU-55933干扰DDR过程。结果:西达本胺对RPMI 8226细胞的增殖抑制作用呈时间剂量依赖性,其24、48和72 h IC50值分别为9.6,6和2.8μmol/L。西达本胺通过上调RPMI 8226细胞p21蛋白表达,将细胞周期阻滞于G0/G1期。西达本胺通过caspase-3依赖的途径诱导RPMI8226细胞凋亡,并上调DDR相关蛋白γH2AX和p ATM的表达。采用ATM激酶抑制剂KU-55933预处理靶细胞,可下调西达本胺诱导的γH2AX和p ATM蛋白表达升高,从而抑制dna损伤反应,并逆转西达本胺诱导的细胞凋亡。结论:西达本胺诱导骨髓瘤细胞增殖抑制、细胞周期停滞和细胞凋亡涉及dna损伤反应。

关键词：西达本胺 RPMI 8226细胞 ATM激酶细胞凋亡 dna损伤反应