检索结果-南通市图书馆

天津医药 2011年第3期39卷 265-266页

作者：孟英韬宋力舒剑波党利亨天津市儿童医院 300074

苯丙氨酸羟化酶（phenylalanine hydroxylase,PAH,酶学委员会1.***.16.1）基因发生突变是引发苯丙酮尿症的主要原因,PAH的合成障碍、活性降低或缺乏可导致苯丙氨酸在体内蓄积，轻者为高苯丙氨酸血症，

关键词：苯丙酮尿症苯丙氨酸羟化酶突变 dna引物聚合酶链反应

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滚环dna扩增的原理、应用和展望

中国生物工程杂志 2004年第9期24卷 33-38页

作者：肖乐义祁自柏姜俊张子宽河南省科学院郑州450003 国家药品生物制品检定所北京100050 河南康鑫生物技术有限公司郑州450003

滚环dna扩增 (rollingcirclednaamplification ,RCA)是一种等温信号扩增方法 ,其线性扩增倍数为 1 0 5,指数化扩增能力大于 1 0 9,产生的扩增产物连接在固相支持物 (如玻片、微孔板等 )表面的dna引物或抗体上。RCA是一种适合在芯片上 (o... 详细信息

滚环dna扩增 (rollingcirclednaamplification ,RCA)是一种等温信号扩增方法 ,其线性扩增倍数为 1 0 5,指数化扩增能力大于 1 0 9,产生的扩增产物连接在固相支持物 (如玻片、微孔板等 )表面的dna引物或抗体上。RCA是一种适合在芯片上 (on chip)进行信号扩增的新技术 ,它既能提供研究分析的敏感性和特异性 ,又能保持立体分析的多元性。RCA亦是一种痕量的分子检测方法。

关键词： dna扩增 dna引物 RCA 微孔板抗体生物标志特异性生物大分子玻片扩增产物

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人RHD基因结构研究及意义

第四军医大学学报 2004年第18期25卷 1659-1662页

作者：周华友兰炯采王晓珠樊红孟庆宝张印则王从容第一军医大学南方医院输血科广东广州510515 秦皇岛市中心血站河北秦皇岛066000 锦州市红十字中心血站辽宁锦州121000 深圳市人民医院输血科广东深圳518000

目的 :研究RHD基因结构 ,重点检测启动子区 ,探究RHD基因的表达机制 .方法 :采用PCR SSP方法 ,设计 3对序列特异性引物 ,对 6 0例无血源关系RhD(+)汉族人样本、98例无血源关系RhD(- )汉族人样本和 2例弱D型汉族人样本RHD基因启动子区约 ... 详细信息

目的 :研究RHD基因结构 ,重点检测启动子区 ,探究RHD基因的表达机制 .方法 :采用PCR SSP方法 ,设计 3对序列特异性引物 ,对 6 0例无血源关系RhD(+)汉族人样本、98例无血源关系RhD(- )汉族人样本和 2例弱D型汉族人样本RHD基因启动子区约 10 0 0bp范围内的 4个RHD基因特异性多态性位点进行检测 .结果 :RhD表型 (- ) /RHD基因型 (- )个体启动子区全缺失 ,表型RhD阴性基因型为部分缺失或不缺失型个体启动子区都不缺失 .结论 :RhD表型 (- ) /RHD基因型 (- )个体符合RhD阴性的普遍机制 ,表型RhD阴性基因型为部分缺失或不缺失型个体存在另一种RhD阴性机制 .

关键词： RHD基因启动区(遗传学) 聚合酶链反应-序列分析 dna引物表型基因型

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孢子丝菌病快速诊断方法的探究

孢子丝菌病快速诊断方法的探究

作者：吴永卓大连医科大学

学位级别：硕士

作为孢子丝菌病的病原菌，申克氏孢子丝菌主要致皮肤、皮下组织及附近淋巴组织的亚急性和（或）慢性感染，偶尔也可向内脏和骨骼播散，严重者甚至可引起全身的播散性感染。本病在我国东北地区相对多发，且部分区域可成批发生，对人们的... 详细信息

作为孢子丝菌病的病原菌，申克氏孢子丝菌主要致皮肤、皮下组织及附近淋巴组织的亚急性和（或）慢性感染，偶尔也可向内脏和骨骼播散，严重者甚至可引起全身的播散性感染。本病在我国东北地区相对多发，且部分区域可成批发生，对人们的健康构成严重威胁。尽管如此，该病的诊断较目前仍较为困难;真菌镜检及培养阳性率均较低，且培养耗时长（真菌生长缓慢）;组织病理也缺乏特异性，仅表现为肉芽肿性炎症，极易与其它感染性疾病想混。在该病的诊断方面，近些年来不少学者进行了多方面的探索（如血清学检测、电镜技术免、疫荧光抗体及免疫病理）。因存在特异性问题，血清学检测未能延续;免疫荧光抗体与免疫病理技术也因存在抗体不易标准化、病理易出现非特异染色等问题而使其应用受限;电镜技术由于存在视野小、操作复杂，寻找病原菌较为困难等问题而难以推广。本研究拟采用改进的CTAB法提取申克孢子丝菌基因组dna，并根据申克孢子丝菌钙调蛋白基因保守序列设计合成一对寡核苷酸引物，通过PCR技术，以探讨快速检测及鉴定申克孢子丝菌的方法，进而建立一种能敏感、特异且快速地检测孢子丝菌病的分子生物学鉴定方法，以期为临床孢子丝菌病的诊疗工作提供可靠依据。目的:1.探究申克孢子丝菌的dna提取方法;2.探索申克孢子丝茵的种特异性引物，运用聚合酶链反应方法鉴定申克孢子丝菌;从而为临床孢子丝菌病的诊疗工作提供分子生物学依据。方法:1.用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁提取孢子丝菌的基因组dna;2.根据申克孢子丝茵钙调蛋白基因序列设计一对寡核苷酸引物，分别对52株申克孢子丝菌及3种6株普通真菌（曲霉、黑霉、白色念珠菌）的基因组dna进行PCR扩增。结果：1.用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁成功提取出孢子丝菌的基因组dna。2.特异性引物对52株申克孢子丝菌均可扩增出一条约430bp的片段，而对白色念珠茵、曲霉、黑霉基因组dna扩增结果均为阴性。结论：1.用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁提取孢子丝菌基因组dna与传统的CTAB法相比不仅操作更简便，而且避免了液氮研磨过程中难于避免的污染。2.运用我们所设计的特异性引物，结合PCR方法对申克孢子丝菌进行分子鉴定，结果显示不仅该引物对申克孢子丝菌特异、敏感而且该方法简便、快捷;有望为孢子丝菌病的分子生物学诊断奠定分子基础。

关键词：申克孢子丝茵基因组dna提取聚合酶链反应 dna引物钙调蛋白基因

对5个S180克隆细胞株RAPD特征的研究

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中国实验动物学报 2005年第3期13卷 173-175页

作者：贺文张焕玲王俊霞刘福英河北医科大学实验动物学部石家庄050017

目的运用随机扩增多态性dna(RAPD)技术建立S180的5个克隆细胞株的特异性图谱。方法运用23条引物对S180-S2D9、S180-S2D7、S180-S1F11、S180-S1H10、S180-S1B115个克隆细胞株的基因组dna进行RAPD-PCR扩增,以琼脂糖电泳观察结果。结果筛选... 详细信息

目的运用随机扩增多态性dna(RAPD)技术建立S180的5个克隆细胞株的特异性图谱。方法运用23条引物对S180-S2D9、S180-S2D7、S180-S1F11、S180-S1H10、S180-S1B115个克隆细胞株的基因组dna进行RAPD-PCR扩增,以琼脂糖电泳观察结果。结果筛选出3条在各克隆株扩增产物间有差异的引物。结论5个S180克隆细胞株的RAPD特征有明显区别。

关键词：随机扩增多态dna技术 S180 克隆细胞 dna引物

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孢子丝菌病快速诊断方法的探究

中国真菌学杂志 2020年第1期15卷 22-25页

作者：吴永卓刘晓明张振颖昆明医科大学第二附属医院昆明650000 香港大学深圳医院深圳518000 大连医科大学大连116000

目的研究申克孢子丝菌dna提取方法;探索申克孢子丝茵的种特异性引物,运用聚合酶链反应方法鉴定申克孢子丝菌;从而为临床孢子丝茵病的分子诊断奠定基础。方法用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁提取孢子丝菌的基因组dna;根据申克孢子丝茵... 详细信息

目的研究申克孢子丝菌dna提取方法;探索申克孢子丝茵的种特异性引物,运用聚合酶链反应方法鉴定申克孢子丝菌;从而为临床孢子丝茵病的分子诊断奠定基础。方法用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁提取孢子丝菌的基因组dna;根据申克孢子丝茵钙调蛋白基因序列设计一对寡核苷酸引物,分别对52株申克孢子丝菌及3种6株普通真茵的基因组dna进行PCR扩增。结果用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁成功提取出孢子丝菌的基因组dna。特异性引物对52株申克孢子丝菌可扩增出一条约430 bp的片段,而对念珠菌、曲霉、黑霉基因组dna扩增结果均为阴性。结论用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁提取孢子丝菌基因组dna与传统的CTAB法相比不仅操作更简便,而且避免了液氮研磨过程中难于避免的污染。运用我们所设计的特异性引物,结合PCR方法对申克孢子丝菌进行分子鉴定,结果显示不仅该引物对申克孢子丝菌特异、敏感而且该方法简便、快捷;可用于申克孢子丝菌病的临床诊断。

关键词：申克孢子丝茵基因组dna提取聚合酶链反应 dna引物钙调蛋白基因

不同产地和不同环境生长的金线莲的ISSR遗传特性分析

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福建医科大学学报 2018年第5期52卷 281-286页

作者：赵会贤黄宛祯黄丽英福建医科大学药学院福州350108

目的研究不同产地及生长方式的金线莲样本间遗传多样性和亲缘关系。方法以20份福建金线莲新鲜叶片为实验材料,采用ISSR-PCR分子标记技术,筛选出15条多态性好、扩增条带清晰的ISSR引物。经琼脂糖凝胶电泳成像后,统计其扩增条带数,运用NTS... 详细信息

目的研究不同产地及生长方式的金线莲样本间遗传多样性和亲缘关系。方法以20份福建金线莲新鲜叶片为实验材料,采用ISSR-PCR分子标记技术,筛选出15条多态性好、扩增条带清晰的ISSR引物。经琼脂糖凝胶电泳成像后,统计其扩增条带数,运用NTSYS-Pc 2.1和POPGENE 32软件进行UPGMA聚类分析。结果共扩增出130条清晰可见的条带,多态性比率达100%,遗传相似系数分布在0.647 6～0.971 4,遗传距离分布在0.029 0～0.434 5,其中编号为3和4的样本具有较近的亲缘关系。聚类分析结果显示,当相似系数取0.78时,20份样本被分为3类,可以区分不同的产地和种类。结论运用ISSR标记技术,可以从分子水平上揭示福建省内金线莲的遗传多样性。

关键词：兰科 dna引物基因扩增多态现象,遗传聚类分析

人转化生长因子β1质粒真核表达载体的构建与鉴定

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中国新医药 2003年第11期2卷 4-5,3页

作者：储庆吴织芬孙强何海丽刘玲侠第四军医大学口腔医学院710032

目的构建并鉴定人转化生长因子β1(TGF-β1)基因真核表达栽体。方法设计含XbaI和XhoI酶切住点的TGF-β1cdna引物，采用RT-PCR法，扩增TGF-β1cdna片段，纯化PCR产物，XbaI和XhoI双酶切并连接至pcdna3。转化感受态大肠杆菌DH5α。酶切鉴... 详细信息

目的构建并鉴定人转化生长因子β1(TGF-β1)基因真核表达栽体。方法设计含XbaI和XhoI酶切住点的TGF-β1cdna引物，采用RT-PCR法，扩增TGF-β1cdna片段，纯化PCR产物，XbaI和XhoI双酶切并连接至pcdna3。转化感受态大肠杆菌DH5α。酶切鉴定阳性重组子，并进行序列测定。结果琼脂糖凝胶电泳显示，用XbaI和XhoI双酶切后可形成两条带，分子量分别为1．2kb和5．38kb。符合物理图谱，表明栽体成功构建，并且测序结果与预期结果完全一致。结论成功构建了人TGF-β1基因真核表达栽体。

关键词： TGF-β1基因转化生长因子β1 真核表达载体栽体质粒 DH5α dna引物酶切重组子 PCR产物

用Chelex法制备AP-PCR细菌dna模板

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福建医科大学学报 2002年第2期36卷 221-223页

作者：黄晓晶刘天佳蔡志宇福建医科大学附属口腔医院牙体牙髓科福州350002 四川大学华西口腔医院福建医科大学附属协和医院口腔科福州350001

近年来,dna分析技术已被广泛应用于口腔细菌学的研究.当前研究细菌基因分型的方法较多,包括质粒dna图谱、染色体dna指纹、核型分析法等,但这些传统方法都有一共同缺陷,即技术复杂,费时费力+[1].因此随着近年来随机引物聚合酶链反应(AP-P... 详细信息

近年来,dna分析技术已被广泛应用于口腔细菌学的研究.当前研究细菌基因分型的方法较多,包括质粒dna图谱、染色体dna指纹、核型分析法等,但这些传统方法都有一共同缺陷,即技术复杂,费时费力+[1].因此随着近年来随机引物聚合酶链反应(AP-PCR)技术的不断完善,由于其对口腔同种细菌不同克隆型的分辨力好,而操作又较其他经典方法简便、快捷,已被广泛应用于口腔细菌的研究中[2].目前AP-PCR dna模板的制备大多仍采用传统的dna提取方法,即通过蛋白酶K消化菌细胞,酚、氯仿抽提而获取dna.这种方法操作复杂,费时.同时,需要在多个离心管之间转移,增加了标本被污染的可能性.为更简便快速地获得AP-PCR模板dna,笔者探讨采用Chelex 100为介质提取细菌dna的可行性,报告如下.

关键词： dna引物 dna 模板聚合酶链反应随机扩增多态dna技术

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通用引物PCR研究进展

国际检验医学杂志 2008年第6期29卷 522-524页

作者：袁晓辉（综述）曲章义（综述）王迎晨（综述）陈晶（综述）曲章义（审校）哈尔滨医科大学卫生微生物学教研室 150081

通用引物PCR是应用与不同序列的保守区互补的通用引物,来进行PCR扩增,它能够高通量地对相关微生物或其亚型进行检测与鉴定分型,是一种简便、快速、灵敏、特异的鉴定分型方法,目前广泛应用于病毒、细菌、支原体及真菌等微生物的检测与鉴定。

关键词：聚合酶链反应 dna引物保守序列蛋白质亚型临床实验室技术