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毛细管电泳无胶筛分介质分离dna的机理

化学进展 2006年第7期18卷 987-994页

作者：周丹王延梅中国科学技术大学高分子科学与工程系合肥230026

快速、高效而灵敏的分离技术对于dna的分析是至关重要的。使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的dna分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质。本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了dna在毛细管电泳无胶筛分介质... 详细信息

快速、高效而灵敏的分离技术对于dna的分析是至关重要的。使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的dna分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质。本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了dna在毛细管电泳无胶筛分介质(缠结溶液和稀溶液)中的分离机理,主要包括Ogston筛分模型、各种修正的爬行模型、瞬态缠结偶合机理及其改进机理等。

关键词：毛细管电泳 dna分离无胶筛分介质高分子溶液机理

毛细管电泳紫外检测条件下单碱基分离dna片段

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化学学报 2004年第1期62卷 66-70页

作者：王前许旭中国科学院上海有机化学研究所分析测试中心上海200032

合成了一种水溶性聚合物 ,聚N ,N 二甲基丙烯酰胺 (PDMA)和聚乙烯吡咯烷酮体系 (PVP) ,并用于dna分离 .优选该体系溶液含量为 2 0 %PDMA + 2 0 %PVP ,在紫外检测的条件下 ,对标准dna酶切片段pBR3 2 2 /HaeIII样品进行分离 ,其中 12 3 ... 详细信息

合成了一种水溶性聚合物 ,聚N ,N 二甲基丙烯酰胺 (PDMA)和聚乙烯吡咯烷酮体系 (PVP) ,并用于dna分离 .优选该体系溶液含量为 2 0 %PDMA + 2 0 %PVP ,在紫外检测的条件下 ,对标准dna酶切片段pBR3 2 2 /HaeIII样品进行分离 ,其中 12 3 / 12 4碱基对的分离度 (Rs)为 0 72 .加入甲酰胺 (φ≥ 0 10 )对dna样品进行去活处理后 ,该体系亦能对单链dna片段中的 12 3 / 12 4进行分离 ,分离度 (Rs)为 0 75 .实验还显示进样时存在浓缩效应 .本体系粘度较小 ,筛分能力强 ,具备芯片毛细管dna分离介质的潜力 .

关键词：单碱基分离 dna分离毛细管电泳紫外检测器无胶筛分合成水溶性聚合物

基于纳米水凝胶颗粒的毛细管电泳法分离dna

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分析化学 2019年第5期47卷 772-778页

作者：张禾蓉易达孟子晖薛敏汪海林冯金生北京理工大学化学与化工学院中国科学院生态环境研究中心

采用乳液聚合法,在水相中制备了一系列纳米水凝胶颗粒(NPs),基于动态涂层法应用于毛细管电泳分离dna片段。动态光散射表征结果表明,所制备的NPs分散性好、粒径分布均匀。基于NPs交联网络结构将其作为毛细管电泳分离介质,结果表明,单体... 详细信息

采用乳液聚合法,在水相中制备了一系列纳米水凝胶颗粒(NPs),基于动态涂层法应用于毛细管电泳分离dna片段。动态光散射表征结果表明,所制备的NPs分散性好、粒径分布均匀。基于NPs交联网络结构将其作为毛细管电泳分离介质,结果表明,单体的用量、纳米颗粒的粒径以及NPs在毛细管电泳中的浓度对dna分离效果都有影响。当单体采用N-异丙基丙烯酰胺(87%)、丙烯酸羟乙酯(8%)和丙烯酸(4%),交联剂为N,N’-亚甲基双丙烯酰胺(1%)时,通过改变表面活性剂十二烷基磺酸钠(SDS)的用量,可以改变所制备的纳米颗粒粒径,当SDS用量为53 mg时,NPs粒径约480 nm。将此NPs(8.0 mg/mL)加入TG缓冲溶液(25 mmol/L Tris,192 mmol/L甘氨酸,pH 8.3)用于毛细管电泳,3个长度dna片段(20、50和80 nt)可实现完全分离,分离效果好,且迁移时间较短。

关键词：纳米水凝胶颗粒毛细管电泳 dna分离

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用于毛细管电泳dna分离的合成聚合物

化学进展 2003年第4期15卷 275-287页

作者：王前许旭中国科学院上海有机化学研究所金属有机化学国家重点实验室上海200032

毛细管电泳的无胶筛分方法在 dna片段分离、dna测序方面取得了显著的成绩并已成功应用于人类基因组计划。该法是在毛细管柱中充入一定浓度和组成的线性高分子溶液 ,利用其对样品组分电泳迁移时的阻滞作用 ,按分子量大小对 dna等生物大... 详细信息

毛细管电泳的无胶筛分方法在 dna片段分离、dna测序方面取得了显著的成绩并已成功应用于人类基因组计划。该法是在毛细管柱中充入一定浓度和组成的线性高分子溶液 ,利用其对样品组分电泳迁移时的阻滞作用 ,按分子量大小对 dna等生物大分子进行筛分分离分析。因此 ,聚合物筛分介质的类型、组成和性质会显著影响分离效果。近年来 ,由于受到基因组计划的影响 ,出现了许多用于 dna片段分离和dna测序的水溶性高分子聚合物 ,并取得很大进展。本文按照均聚物和共聚物的分类 ,综述了作为筛分介质的各种合成聚合物及其应用效果 ,并简要介绍了有关的筛分理论和分离的评价指标。

关键词：毛细管电泳 dna分离合成聚合物无胶筛分均聚高分子共聚高分子

聚环氧乙烷无胶筛分毛细管电泳分离宽分子量范围dna片段

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高等学校化学学报 2011年第4期32卷 844-850页

作者：李玉荣陈长宝周杰山东农业大学化学与材料科学学院泰安271018

在无胶筛分毛细管电泳中,以聚环氧乙烷为筛分介质,用硅烷化处理的毛细管柱(31.2 cm×75μmi.d.,有效长度21.0 cm)分离DL5000 dna Marker(dna长度为100～5000 bp),考察了筛分介质浓度、缓冲液pH值、分离电压和溴化乙锭浓度对分离双链dna... 详细信息

在无胶筛分毛细管电泳中,以聚环氧乙烷为筛分介质,用硅烷化处理的毛细管柱(31.2 cm×75μmi.d.,有效长度21.0 cm)分离DL5000 dna Marker(dna长度为100～5000 bp),考察了筛分介质浓度、缓冲液pH值、分离电压和溴化乙锭浓度对分离双链dna片段的影响,优化得到分离100～5000 bp dna片段的最佳条件.毛细管电泳的最佳条件为PEO浓度5 mg/mL,缓冲液pH值8.0,电压-12.0 kV及溴化乙锭浓度3.0μg/mL.在此条件下,可对山梨醇脱氢酶基因(SDH)和乙烯受体基因(ETR1)的聚合酶链式反应(PCR)扩增产物同时进行检测,分离和鉴定效果良好.

关键词：无胶筛分毛细管电泳聚环氧乙烷 dna分离

毛细管无胶筛分电泳中一种dna定量分离模型的优化讨论

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分析测试学报 2009年第5期28卷 519-524页

作者：刘春叶张剑许旭陈杰瑢西安医学院药学系陕西西安710021 西安第二炮兵工程学院503教研室陕西西安710025 中国科学院上海有机化学研究所上海200032 西安交通大学生命科学与技术学院陕西西安710049

对已建立的交缠聚合物溶液中dna定量分离模型的影响因素,如dna尺寸、电场强度、聚合物性质及聚合物质量浓度等进行了讨论,并就该模型对聚合物介质选择的指导性进行评价。实验证明,dna链越长,电泳迁移的时间越长;聚合物相对分子质量越高... 详细信息

对已建立的交缠聚合物溶液中dna定量分离模型的影响因素,如dna尺寸、电场强度、聚合物性质及聚合物质量浓度等进行了讨论,并就该模型对聚合物介质选择的指导性进行评价。实验证明,dna链越长,电泳迁移的时间越长;聚合物相对分子质量越高,越利于长链dna的分离;筛分聚合物质量浓度越高,dna分离时所需的迁移时间越长;快速分离要求使用较大的场强,而基于对大片段dna的有效分离则应限制高场强的使用。该模型还可用于计算dna分离的最佳聚合物质量浓度,结果表明高质量浓度聚合物有利于dna的筛分。以上实验结果和模型预测的结论一致,对dna电泳分离模型的研究有较大的促进作用,对毛细管无胶筛分电泳实验参数的选择和优化具有一定的指导意义。

关键词：毛细管电泳 dna分离数学模型无胶筛分

用于毛细管电泳和芯片电泳dna分离的筛分介质

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药物分析杂志 2006年第1期26卷 138-143页

作者：黄欢周国华中国药科大学生命科学与技术学院南京210009

毛细管电泳和微芯片电泳是用于核酸分子分离的强有力工具,其筛分介质的选择尤为重要,是目前研究的热点之一。本文是按照均聚物和共聚物的分类,综述了线性聚丙烯酰胺、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚环氧乙烷、聚 N... 详细信息

毛细管电泳和微芯片电泳是用于核酸分子分离的强有力工具,其筛分介质的选择尤为重要,是目前研究的热点之一。本文是按照均聚物和共聚物的分类,综述了线性聚丙烯酰胺、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚环氧乙烷、聚 N,N-二甲基聚丙烯酰胺、丙烯酰胺与聚 N,N-二甲基聚丙烯酰胺的共聚物等各种筛分体系的性质,包括其优点以及缺点,并对各自在 dna 等生物大分子分离方面的应用进展进行了评述。简要介绍了筛分机理以及添加剂的加入对提高聚合物的分离能力和稳定性的影响。

关键词：筛分介质毛细管电泳芯片电泳 dna分离聚合物

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分离dna的琼脂糖凝胶电泳技术

化学教育 2012年第12期33卷 1-2,19页

作者：尹海权王明召北京师范大学化学学院 100875

介绍在现代生物学中十分重要的琼脂糖凝胶电泳技术的化学原理，涉及胶体电泳、琼脂糖凝胶的多级结构、dna分子结构和粒子的电荷作用等化学和生物学基础知识，旨在为高中教育提供一级学科层面的知识联系，供一线高中化学教师和生物学教... 详细信息

介绍在现代生物学中十分重要的琼脂糖凝胶电泳技术的化学原理，涉及胶体电泳、琼脂糖凝胶的多级结构、dna分子结构和粒子的电荷作用等化学和生物学基础知识，旨在为高中教育提供一级学科层面的知识联系，供一线高中化学教师和生物学教师用于教学实践。

关键词：高中化学琼脂糖凝胶电泳 dna分离

添加剂在毛细管电泳分离dna中的作用研究进展

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高分子通报 2006年第10期84卷 76-81页

作者：周丹王延梅中国科学技术大学高分子科学与工程系合肥230026

使用无胶筛分介质的毛细管电泳(包括毛细管阵列电泳和微芯片电泳)是最重要的dna分离技术之一。在低粘度的无胶筛分介质中加入某种添加剂是一种有效且简单的克服填充困难和提高dna分离性能的方法。本文就各种添加剂(如多羟基化合物、粘... 详细信息

使用无胶筛分介质的毛细管电泳(包括毛细管阵列电泳和微芯片电泳)是最重要的dna分离技术之一。在低粘度的无胶筛分介质中加入某种添加剂是一种有效且简单的克服填充困难和提高dna分离性能的方法。本文就各种添加剂(如多羟基化合物、粘土、金纳米粒子、乳胶粒等)对提高无胶筛分介质中dna的分离性能的作用进行了综述。

关键词：毛细管电泳 dna分离无胶筛分介质添加剂作用