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表达重组蛋白的CHO-GS细胞的无血清培养

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高技术通讯 2005年第7期15卷 73-78页

作者：张芳张立易小萍孙祥明张元兴华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

采用DOEHLERT和HADAMARD统计方法建立了一个适于重组CHO-GS细胞生长和外源蛋白表达的无谷氨酰胺无血清培养基SfMB.对多种硫酸多聚糖进行了考察,选取低分子量硫酸葡聚糖,添加浓度为25 mg/L,可以避免细胞结团.用SfMB在方瓶中培养重组CHO-G... 详细信息

采用DOEHLERT和HADAMARD统计方法建立了一个适于重组CHO-GS细胞生长和外源蛋白表达的无谷氨酰胺无血清培养基SfMB.对多种硫酸多聚糖进行了考察,选取低分子量硫酸葡聚糖,添加浓度为25 mg/L,可以避免细胞结团.用SfMB在方瓶中培养重组CHO-GS细胞,细胞生长优于含10%小牛血清的无谷氨酰胺dmem/f12培养,最大细胞密度提高了40.7%,外源蛋白的表达水平也得到提高.在100 ml转瓶中分批培养,最大细胞密度和蛋白表达分别达到1.5×106 cells/ml和0.48 mg/L.

关键词：重组蛋白 HADAMARD dmem/f12 无血清培养基谷氨酰胺蛋白表达细胞生长细胞密度统计方法低分子量添加浓度外源蛋白分批培养 CHO 多聚糖葡聚糖牛血清 GS 硫酸转瓶

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大鼠胎脑神经干细胞的分离和培养

内蒙古大学学报（自然科学版） 2004年第5期35卷 540-545页

作者：李雪玲扈廷茂苏慧敏陈明杰于海泉 John R.Morrision 内蒙古大学实验动物研究中心哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室呼和浩特010021 Monash Institute of Reproduction and Development

从胚龄14.5～16.5d(E14.5～16.5)的大鼠胎脑组织获得大鼠胎脑神经干细胞(ratfe-talneuralstemcells,rfNSCs),培养于含有碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bfGf)和表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGf)的无血清培养液dmem/f12中,用3[H]胸苷掺入试验检测EGf和bfGf对大鼠胚胎神经干细胞分裂和增殖的影响.BrdU结合反应和nestin免疫组化检测显示培养细胞在早期时代约90%以上具有分裂增殖能力并显示nestin阳性,而且这些细胞在培养过程中可以分化神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,证明分离培养的是神经干细胞,可用于移植、定向分化和基因转移的研究.

关键词：大鼠胎儿神经干细胞 dmem/f12 表皮生长因子碱性成纤维细胞生长因子

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达氏修正依氏培养基/f12的配制

实用医技杂志 2010年第11期17卷 1003-1004页

作者：林少芬毛羽翔周焕娇罗燕唐仕波李斌赖平红中山大学中山眼科中心 510060 湖北省武汉市同济医院江西省人民医院

目的建立达氏修正依氏培养基(dmem)/f12的配制方法。方法 dmem/f12配制所需物品均经过严格地消毒灭菌,配液用dmem/f12粉剂1包+1000mL三蒸水+碳酸氢钠1.2g,在磁力搅拌器搅拌后,利用过滤装置连接真空泵过滤分装培养基;配液后的dmem/f12液... 详细信息

目的建立达氏修正依氏培养基(dmem)/f12的配制方法。方法 dmem/f12配制所需物品均经过严格地消毒灭菌,配液用dmem/f12粉剂1包+1000mL三蒸水+碳酸氢钠1.2g,在磁力搅拌器搅拌后,利用过滤装置连接真空泵过滤分装培养基;配液后的dmem/f12液体4℃冰箱保存6个月,加入血清等保存4周。结果配制的dmem/f12液体无污染,细胞培养效果佳。结论严格执行各种物品清洁消毒和无菌操作而配制的dmem/f12能有效地用来培养细胞。

关键词：培养基过滤消毒细胞 dmem/f12

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奶牛乳腺上皮细胞的原代培养(英文)

Agricultural Science & Technology 2009年第1期10卷 119-123页

作者：吴娟王凤龙王申元内蒙古农业大学动物科学与医学学院病理研究室

1材料与方法1．1材料1．1．1乳腺组织。从屠宰场选取健康的泌乳期奶牛，无菌手术切取乳腺实质组织，置于dmem／f12完全培养液（含10％胎牛血清、100IU／ml青霉素和链霉素）中，尽快运回实验室。

关键词：乳腺上皮细胞原代培养奶牛 dmem/f12 乳腺组织胎牛血清泌乳期屠宰场

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人表皮细胞培养方法的改进

沈阳医学院学报 1998年第1期12卷 47-49页

作者：张慧敏郝振林王东霞张志芬王连璞沈阳医学院附属中心医院烧伤科沈阳医学院医学基础部生物化学教研室沈阳医学院医学基础部人体解剖学教研室

表皮细胞体外培养技术的建立和发展,为烧伤治疗和皮肤病学研究等方面开拓了新的途径。目前国内外对表皮细胞培养技术仍处在不断探索和研究阶段。为进一步寻求更佳的表皮细胞培养方法,笔者在前人工作的基础上对表皮细胞的分离和培养过程... 详细信息

表皮细胞体外培养技术的建立和发展,为烧伤治疗和皮肤病学研究等方面开拓了新的途径。目前国内外对表皮细胞培养技术仍处在不断探索和研究阶段。为进一步寻求更佳的表皮细胞培养方法,笔者在前人工作的基础上对表皮细胞的分离和培养过程进行了改进并获得成功。

关键词：表皮细胞培养培养方法人表皮细胞无血清培养基成纤维细胞 dmem/f12 集落形成率沈阳医学院合蛋白人转铁蛋白

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奶牛卵丘细胞无血清体外培养液的优化

今日畜牧兽医 2009年第11期25卷 67-67页

采集奶牛卵巢表面卵泡中的卵丘一卵母细胞复合物，通过胰蛋白酶消化获得卵丘细胞，分别利用对照组dmem／f12培养液和4个试验组McCoy，s5a培养液对卵丘细胞进行原代及传代培养。试验1组用McCoy，s5a基础培养液，试验2组在McCoy＇s5a基础... 详细信息

采集奶牛卵巢表面卵泡中的卵丘一卵母细胞复合物，通过胰蛋白酶消化获得卵丘细胞，分别利用对照组dmem／f12培养液和4个试验组McCoy，s5a培养液对卵丘细胞进行原代及传代培养。试验1组用McCoy，s5a基础培养液，试验2组在McCoy＇s5a基础培养液中添加29ng·mL-1的睾酮，试验3组同时添加29ng·mL-3叫的睾酮和15μg·mL-3的绿茶多酚，

关键词：卵丘细胞培养液奶牛无血清 dmem/f12 优化体外试验组