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Macrophage-secreted exosomes inhibit breast cancer cell migration via the miR-101-3p/dlg5 axis

Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine 2023年第12期13卷 532-538页

作者： Yu Liu Chao-Qun Wang Yong-Kang Zhu Jia-Fang Xu Si-Qi Yin Qing-Jie Hu Rui-Qi Yang First Clinical Medical College Nanjing University of Chinese MedicineNanjing 210001China Department of Breast Surgery The First Affiliated Hospital of Hainan Medical UniversityHaikou 570102China Department of Nuclear Medicine Hainan General HospitalHainan Affiliated Hospital of Hainan Medical UniversityHaikou 570311China Reproductive Medicine Center The First Affiliated Hospital of Hainan Medical UniversityHaikou 570102China

Objective:To investigate the role of macrophages in regulating breast cancer cell migration and its related ***:Human leukemia monocytic cell line THP-1-secreted exosomes were isolated using multi-step ultracentrifugation and verified using nanoparticle tracking *** expressed miRNAs were identified using RNA *** of inhibitors of hsa-miR-101-3p in breast cancer MDA-MB-231 cells was performed by infecting their lentiviral *** luciferase reporter assay was used to evaluate the interaction of dlg5 and ***5 expression was detected using qRT-PCR and Western blot ***:The migration of breast cancer cells was significantly inhibited after addition of *** sequencing results showed that miR-101-3p expression was significantly *** analysis predicted that miR-101-3p could target dlg5,and this prediction was verified using the luciferase *** addition of the miR-101-3p precursor significantly increased the expression of miR-101-3p,and the mRNA and protein levels of dlg5 were *** contrast,inhibiting the expression of miR-101-3p increased the mRNA and protein levels of ***,the scratch assay showed that inhibiting miR-101-3p could promote the migration of MDA-MB-231 ***:Macrophage exosomes can inhibit the migration of breast cancer cells,and increasing the expression of miR-101-3p to inhibit dlg5 expression may play an important role in this process,which needs further investigation.

关键词： Micro-RNA Tumor-associated macrophages Exosomes Breast cancer dlg5

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三阴性乳腺癌的耐药机制及与dlg5的研究进展

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临床医学进展 2023年第11期13卷 18067-18076页

作者：王旭升陈波车景敏王虎霞徐翠香宋张骏西安医学院研究生工作部陕西西安陕西省人民医院感染与免疫疾病重点实验陕西西安陕西省肿瘤医院乳腺病院陕西西安陕西省人民医院肿瘤外科陕西西安

三阴性乳腺癌(Triple Negative Breast Cancer, TNBC)是乳腺癌的一种特定亚型,因其不表达雌激素受体 (Estrogen Receptor, ER)、孕酮受体(Progesterone Receptor, PR)或人表皮生长因子受体-2 (Epi-dermal Growth Factor Receptor, HER-2)具有高侵袭能力,预后较其他类型乳腺癌差,在治疗上往往因为出现耐药性导致癌症进展和复发。早期应用化疗药物对三阴性乳腺癌有明显治疗效果,但随着化疗药物的应用,患者可逐渐出现耐药,导致总体生存率低下。因此,研究三阴性乳腺癌的化疗耐药性是目前乳腺癌的关注热点。本文回顾了三阴性乳腺癌耐药的研究进展,特别是极性蛋白dlg5在三阴性乳腺癌耐药中的作用以及影响,以期为临床治疗提供参考。

关键词：三阴性乳腺癌 dlg5 耐药机制

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Single nucleotide polymorphisms of OCTN1, OCTN2, and dlg5 genes in Greek patients with Crohn's disease

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World Journal of Gastroenterology 2005年第47期11卷 7525-7530页

作者： Maria Gazouli Gerassimos Mantzaris Athanassios J Archimandritis George Nasioulas Nicholas P Anagnou Department of Biology School of MedicineUniversity of AthensAthens 11725Greece Department of Gastroenterology Evagelismos HospitalAthens 11521Greece Department of Internal Medicine Hippokration General HospitalSchool of MedicineUniversity of AthensAthens 11527Greece Molecular Biology Department Research Center HYGEIA "Antonis Papayiannis" AthensGreece

AIM: To validate novel single nucleotide polymorphisms (SNPs) in Greek patients with Crohn's disease (CD).METHODS: A total of 120 patients with CD, 85 patients with UC, and 100 unrelated healthy controls were genotyped. Genotyping was performed by allele-specific PCR or by PCR-RFLP ***: Our results showed that the 1672T and -207C alleles were obviously over-represented in CD patients only (P＜0.01 and P＜0.05, respectively) compared to the control population. The G113A polymorphism was completely absent in our studied population. The odds ratio for the carriage of the TC haplotype was 2.21 for CD patients as compared with controls. Additionally, the frequency of the TC haplotype was increased in patients with ileocolitis or colitis, and was mainly associated with the fibrostenotic phenotype of the disease. Furthermore, when the TC haplotype was compared jointly with the carriage of at least one mutation of the NOD2/CARD15 gene, there was an increased risk for CD, but not for UC, compared to controls. Regarding the location of the disease, the concomitant presence of the TC haplotype and NOD2/CARD15 mutations was mainly associated with ileocolitis or ileitis. CONCLUSION: Collectively, our results suggest that the 1672T variant of the OCTN1 gene and the -207C variant of the OCTN2 gene represent risk factors for CD in the Greek population.

关键词：单核苷酸 OCTN1 OCTN2 dlg5 希腊肠疾病病理机制

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小肠Crohn's病患者肠黏膜中dlg1和dlg5表达的临床观察

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安徽医科大学学报 2017年第6期52卷 883-886页

作者：杨书红胡翠王晶王兵兵胡静梅俏许建明安徽医科大学第一附属医院消化内科安徽省消化病重点实验室合肥230022

目的探讨小肠型克罗恩病(CD)肠黏膜中dlg1和dlg5的表达以及与临床关联分析。方法收集CD患者小肠手术切除标本45例,另收集15例小肠肿瘤以及右半结肠肿瘤手术标本中正常小肠组织作为对照组,采用免疫组织化学方法研究dlg1和dlg5在CD组患者... 详细信息

目的探讨小肠型克罗恩病(CD)肠黏膜中dlg1和dlg5的表达以及与临床关联分析。方法收集CD患者小肠手术切除标本45例,另收集15例小肠肿瘤以及右半结肠肿瘤手术标本中正常小肠组织作为对照组,采用免疫组织化学方法研究dlg1和dlg5在CD组患者和对照组小肠黏膜上皮组织中的表达,并进行临床观察分析。结果与对照组比较,CD患者小肠黏膜上皮细胞dlg1主要表达在细胞质中,两组患者dlg1表达部位有明显差别(Pdlg5均表达在细胞质中,CD组患者dlg5的表达量明显降低(Pdlg1表达部位和dlg5表达量与CD患者临床特征无明显关联。结论 dlg5表达降低可能参与CD的发病过程。

关键词： dlg1 dlg5 免疫组化克罗恩病

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dlg1和dlg5在克罗恩病患者小肠黏膜中表达的临床研究

DLG1和DLG5在克罗恩病患者小肠黏膜中表达的临床研究

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作者：杨书红安徽医科大学

学位级别：硕士

背景:克罗恩病(Crohn’s disease,CD)是一种病因和发病机制不明的胃肠道慢性非特异性肉芽肿性疾病,是炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的一个主要类型。虽然CD的病因和确切发病机制尚不明确,但越来越多的研究证实免疫因素、... 详细信息

背景:克罗恩病(Crohn’s disease,CD)是一种病因和发病机制不明的胃肠道慢性非特异性肉芽肿性疾病,是炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的一个主要类型。虽然CD的病因和确切发病机制尚不明确,但越来越多的研究证实免疫因素、环境因素、遗传因素和肠道黏膜屏障损害等多种因素共同作用参与该病的发生发展。肠粘膜屏障受损导致肠黏膜通透性增加,肠黏膜组织长期暴露于大量抗原中,肠道抗原吸收增加,引起肠道免疫反应和炎症损伤,导致CD的发生,肠黏膜屏障受损参与CD的病理生理过程。dlg1和dlg5在维护肠黏膜屏障功能方面具有重要作用,它们属于膜相关鸟苷酸激酶(MAGUKs)家族,主要功能包括调节细胞生长、维持细胞形态和极性等。dlg1和dlg5通过参与上皮细胞间连接形成而维持肠粘膜屏障的完整性,因此,本研究拟探讨dlg1和dlg5在CD的表达情况,进一步探索CD的病因和发病机制。目的:研究小肠型CD肠黏膜中dlg1和dlg5的表达情况以及与临床关联分析,探讨dlg1、dlg5在克罗恩病中发生、发展的意义,进一步探索CD的病因和发病机制,为CD的治疗寻找一种新的途径。方法:1.收集2001年1月至2015年12月于安徽医科大学第一附属医院诊断CD并行小肠部分切除手术45例的患者的临床资料,其中活动期37例,缓解期8例,所有病例诊断符合《2012年我国炎症性肠病诊断与治疗的共识意见》标准。另收集同期15例小肠肿瘤/右半结肠肿瘤手术标本中正常小肠组织作为对照,调取小肠型CD患者手术标本及对照组手术标本中正常小肠组织标本。采用免疫组化EnVision方法研究dlg1和dlg5在CD患者和对照组小肠黏膜上皮组织中的表达,并进行临床观察分析。2.收集2015年6月至2016年1月于安徽医科大学第一附属医院消化内科住院患者,已诊断CD并行肠镜检查的患者15例,其中活动期9例,缓解期6例,所有病例诊断符合《2012年我国炎症性肠病诊断与治疗的共识意见》标准;另收集同期于我院行肠镜检查无明显异常的患者5例作为对照,在电子肠镜下钳取两组患者末段回肠标本2块。采用qPCR方法,检测dlg1和dlg5 mRNA在CD患者小肠黏膜上皮细胞的表达情况。3.采用SPSS 19.0软件,计量资料采用x?s表示,两组间计量资料的比较采用t检验,计数资料采用χ检验,P5为差异有统计学意义。结果:***组与对照组小肠黏膜上皮相比,CD肠黏膜显著的形态学表现为肠黏膜萎缩、杯状细胞减少和假幽门腺化生。对照组小肠黏膜腺上皮细胞中,dlg1在细胞膜和细胞质表达,主要表达在细胞质。CD患者小肠黏膜上皮细胞dlg1主要表达在细胞质中,细胞膜中几乎不表达,两组患者dlg1表达部位有明显差别(P=0.000.05)。2.对照组和CD患者组小肠黏膜上皮细胞dlg5均表达在细胞质中,CD患者组dlg5的表达量明显降低(P=0.00dlg5的表达量与CD患者的性别、年龄、吸烟、疾病行为、肛周病变、活动情况和疾病程度无明显关联(P均>0.05)。***实验结果显示dlg1 mRNA在CD患者组ΔCT值是8.09±1.01,对照组6.87±1.71,根据ΔCT值与基因拷贝数呈反比,因此dlg1 mRNA在CD患者小肠组织中的表达低于对照组小肠组织。应用SPSS 19.0进一步统计分析,t值=4.68(P=0.00dlg5mRNA在CD患者组ΔCT值是5.80±1.60,对照组4.87±1.57,根据ΔCT值与基因拷贝数呈反比,因此dlg5 mRNA在CD患者小肠组织中的表达低于对照组小肠组织。应用SPSS 19.0进一步统计分析,t值=2.26(P=0.045),具有统计学意义。结论:1.在CD患者小肠黏膜中dlg1和DGL5表达量明显降低,dlg1在CD患者小肠黏膜的表达部位异常。***1和dlg5参与细胞间连接的形成、维持细胞形态和极性,表达异常引起肠粘膜屏障功能受损,dlg1和dlg5可能参与CD的发病过程,是CD发病的重要原因之一。

关键词： dlg1 dlg5 免疫组化 qPCR CD

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dlg5与克罗恩病相关性的研究进展

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国际消化病杂志 2008年第4期28卷 277-279页

作者：冯贇郑萍上海交通大学附属第一人民医院 200080

炎症性肠病(IBD)包括Crohn′s病(CD)和溃疡性结肠炎(UC),是一组胃肠道慢性反复发作的非特异性炎性疾病。CD的发病机制尚不明确,但近来一系列研究表明遗传因素在其发病中具有重要的作用。dlg5是一个引人注意的CD候选易感基因,此文就dlg5... 详细信息

炎症性肠病(IBD)包括Crohn′s病(CD)和溃疡性结肠炎(UC),是一组胃肠道慢性反复发作的非特异性炎性疾病。CD的发病机制尚不明确,但近来一系列研究表明遗传因素在其发病中具有重要的作用。dlg5是一个引人注意的CD候选易感基因,此文就dlg5基因与CD的相关性研究进展作一综述。

关键词： dlg5 克罗恩病基因多态性易感基因

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dlg5与炎症性肠病的研究进展

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国际消化病杂志 2007年第5期27卷 353-354,388页

作者：李晨怡陈春晓厉有名浙江大学医学院附属第一医院消化科 310000

炎症性肠病(IBD)是一种多基因疾病,具有遗传易感性,主要表现为家族聚集倾向和单卵双生共患率显著增高[1]。近年来,随着人类基因组和多基因疾病研究方法的进展,相继发现多个IBD的基因易感位点。其中dlg5是近年来研究热点之一的易感基因,... 详细信息

炎症性肠病(IBD)是一种多基因疾病,具有遗传易感性,主要表现为家族聚集倾向和单卵双生共患率显著增高[1]。近年来,随着人类基因组和多基因疾病研究方法的进展,相继发现多个IBD的基因易感位点。其中dlg5是近年来研究热点之一的易感基因,争议也颇多。

关键词： dlg5 炎症性肠病进展

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盘状大同源物5在肺腺癌中的表达及其临床意义

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中国中西医结合外科杂志 2019年第3期25卷 257-261页

作者：车娟娟甄洪超王婧李卉惠曹邦伟首都医科大学附属北京友谊医院肿瘤科

目的:探讨盘状大同源物5(discs large homolog 5,dlg5)在肺腺癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测122例Ⅰ期和ⅢA期肺腺癌组织中dlg5的表达情况,并采用Western blotting法检测20对肺腺癌组织癌组织和癌旁组织dlg5的表达... 详细信息

目的:探讨盘状大同源物5(discs large homolog 5,dlg5)在肺腺癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测122例Ⅰ期和ⅢA期肺腺癌组织中dlg5的表达情况,并采用Western blotting法检测20对肺腺癌组织癌组织和癌旁组织dlg5的表达情况。统计患者的临床资料,分析dlg5表达与临床特征的相关性,采用Kaplan-Meier曲线对随访数据进行预后分析。结果:Ⅰ期肺腺癌组织中dlg5的阳性表达率明显高于ⅢA期肺腺癌组织(Pdlg5的阳性表达率明显低于癌旁肺组织。dlg5表达阳性的患者,5年生存率(OS)明显高于表达阴性的患者(51.1%vs 28.1%,Pdlg5的阳性表达水平与淋巴结转移(Pdlg5和TNM分期是肺腺癌的独立预后影响因素。结论:dlg5在肺腺癌中表达下降,dlg5可能对肺腺癌患者的预后有一定的指导意义。

关键词： dlg5 肺腺癌预后分析

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NOTCH4基因多态性与炎症性肠病的相关性研究

NOTCH4基因多态性与炎症性肠病的相关性研究

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作者：张欣第四军医大学

学位级别：硕士

背景:炎症性肠病(IBD)包括溃疡性结肠炎(UC)、克罗恩病(CD)和不确定性肠炎,是一类病因不明的慢性肠道非特异性炎症性疾病。其发病机制不详,可能为肠道细菌和环境因素作用于遗传易感的人群,导致肠粘膜免疫反应过高所致。传统的流行病学... 详细信息

背景:炎症性肠病(IBD)包括溃疡性结肠炎(UC)、克罗恩病(CD)和不确定性肠炎,是一类病因不明的慢性肠道非特异性炎症性疾病。其发病机制不详,可能为肠道细菌和环境因素作用于遗传易感的人群,导致肠粘膜免疫反应过高所致。传统的流行病学研究显示IBD具有遗传易感性,其主要证据来源于不同人种的IBD发病率、家族聚集现象、双生子的研究等。以后发展的全基因组扫描研究及IBD易感基因的研究,均证实IBD发病具有遗传易感性。近年来,有关IBD遗传因素的研究取得了一些重要进展,确定了一些易感基因。例如,1996年发现位于16号染色体着丝粒附近的NOD2/CARD15基因是CD的第一个易感基因,其基因产物表达于单核细胞,它在炎症的发生中可以与细菌的脂多糖和肽聚糖一起激活NF-κB。Stoll等证实位于10号染色体上的dlg5基因的两个单倍体是CD的易感基因。一个加拿大研究组报道了位于5号染色体上的OCTN基因与CD相关。由此可见,IBD是一种复杂的多基因的遗传易感性疾病。通过对该病遗传机制的认识,可确定或发现IBD易感基因或致病基因,对该病的基因治疗、遗传咨询以及易感人群的合理预防起到重要作用。既往研究显示,NOD2/CARD15基因、dlg5基因及OCTN基因多态性与欧美白种人群IBD发病相关。日本和香港的研究显示NOD2/CARD15基因多态性不存在于亚洲人群,我国人群的小样本研究也证实NOD2/CARD15在中国人群无多态性。日本人群遗传学研究显示dlg5、OCTN与日本人群CD无显著相关,但亚洲人群dlg5、OCTN与UC的相关研究未见报道。因此,找到与我国人群IBD相关的基因成为目前IBD研究的热点。研究发现位于6p21.3的HLA基因群上多个位点与炎症性肠病相关。HLA是一群紧密连锁的基因群,共分三个区域。它们编码的抗原,决定着机体的组织相容性且与免疫应答和免疫调节相关。NOTCH4基因位于其第Ⅲ区,富含多种多态性。NOTCH4基因作为HLA上的一个重要位点,自然也成为炎症性肠病的一个候选基因。目的:检测我国汉族人群NOTCH4基因(rs915894 C/A, rs422951 A/G与rs1044506 C/A)的遗传多态性及其与IBD的相关性。以已知IBD相关基因dlg5、OCTN及NOD2 /CARD15为对照。方法:采用PCR-SSP、PCR-RFLP技术及DNA序列测定,对138例UC、63例CD患者以及186例健康对照的NOTCH4基因(rs915894 C/A, rs422951 A/G与rs1044506 C/A)、dlg5基因(rs1248696 G/A,rs2289310 C/A)、OCTN基因(rs1050152 C/T,rs2631367 G/C)及NOD2 /CARD15基因(rs2066844 C/T,rs2066845 G/C)的遗传多态性进行分析。并收集50例UC患者病变部结肠组织及32例结肠癌患者手术后标本两端的正常粘膜组织,用免疫组化方法检测Notch4在结肠粘膜组织中的表达情况。数据统计使用SAS软件进行χ2检验和单倍体分析。结果:①NOTCH4基因rs915894C/A, rs422951A/G与rs1044506 C/A在我国人群中存在遗传多态性,这3个位点各自的遗传多态性与IBD的发病无相关性。但对rs915894 C/A和rs422951 A/G位点进行单倍体分析时发现这两个位点的CA单倍体型可能与CD相关(P=0.0004)。②dlg5基因(rs1248696 G/A)、OCTN基因(rs1050152 C/T,rs2631367 G/C)及NOD2 /CARD15基因(rs2066844 C/T,rs2066845 G/C)在我国人群中不存在遗传多态性。dlg5基因(rs2289310 C/A)在我国人群中存在多态性,但与IBD的发病无显著相关。③免疫组化结果显示,UC患者Notch4表达阳性率为64.0%。对照的结肠癌患者正常粘膜组织Notch4表达阳性率为59.4%。UC患者病变结肠组织与对照者的正常结肠组织中Notch4的表达是无差异的,且Notch4在UC患者肠粘膜组织中的表达与疾病严重程度及病变部位无关(P >0.05)。结论:本研究发现①NOTCH4基因rs915894C/A和rs422951A/G位点与我国汉族人群CD的发病有相关性。但与UC无关。②NOTCH4基因rs915894C/A和rs422951A/G位点与我国汉族人群UC发病无关,UC组织学上Notch4表达亦无特殊,二者一致。③dlg5基因(rs1248696 C/A)、OCTN基因(rs1050152 C/T,rs2631367 G/C)在我国人群中不存在遗传多态性;而dlg5基因(rs2289

关键词： IBD UC CD SNP NOTCH4 NOD2 dlg5 OCTN

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