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野百合碱在5种肝微粒体中的体外代谢研究

中成药 2014年第8期36卷 1764-1767页

作者：刘倩陈龙龙马双成张祖艳李云华钱勇谢天培上海沪丰生物科技有限公司上海200433 上海诗丹德生物技术有限公司上海201203 中国食品药品检定研究院北京100050

目的研究野百合碱在5种不同肝微粒体中的体外代谢。方法通过对肝微粒体蛋白浓度和孵育时间等条件的考察优化野百合碱与肝微粒体的反应体系,用HPLC-MS定性/定量检测孵育体系中的野百合碱及代谢产物,分析比较野百合碱在经地塞米松诱导的F... 详细信息

目的研究野百合碱在5种不同肝微粒体中的体外代谢。方法通过对肝微粒体蛋白浓度和孵育时间等条件的考察优化野百合碱与肝微粒体的反应体系,用HPLC-MS定性/定量检测孵育体系中的野百合碱及代谢产物,分析比较野百合碱在经地塞米松诱导的F344大鼠、F344大鼠、人、SD大鼠、ICR小鼠肝微粒体中代谢率和代谢产物的差异。结果体系的优选条件为肝微粒体质量浓度2 mg/mL,孵育时间90 min,野百合碱在地塞米松诱导的F344大鼠、F344大鼠、人、SD大鼠、ICR小鼠肝微粒体代谢率分别为9.91%,5.45%,0.25%,1.01%,4.25%。在5种肝微粒体中均检测到两个代谢产物:野百合碱-N-氧化物和dhp[(+/-)6,7-dihydro-7-hydroxy-1-hydroxymethyl-5H-pyrrolizine]。结论野百合碱在地塞米松诱导的F344大鼠、F344大鼠、SD大鼠、人及ICR小鼠肝微粒体均可发生代谢,但代谢率有一定差异。

关键词：野百合碱体外代谢液相色谱/串联质谱野百合碱-N-氧化物 dhp

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曝气生物滤池对邻苯二甲酸二己酯的生物降解试验

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安全与环境学报 2012年第6期12卷 89-93页

作者：赵晶余健李伟宋又群湖南大学土木工程学院长沙410082 广西壮族自治区交通规划勘察设计研究院南宁5300111 湖南大学化学生物传感器与计量学国家重点实验室长沙410082

采用陶粒滤料曝气生物滤池(BAF)处理邻苯二甲酸二己酯(dhp)模拟废水,考察了空床接触时间(EBCT)、温度对dhp去除效果的影响,运用气质联用仪(GC-MS)分析了中间降解产物并推测其可能降解途径。结果表明,当温度为25℃,空床接触时间(EBCT)为... 详细信息

采用陶粒滤料曝气生物滤池(BAF)处理邻苯二甲酸二己酯(dhp)模拟废水,考察了空床接触时间(EBCT)、温度对dhp去除效果的影响,运用气质联用仪(GC-MS)分析了中间降解产物并推测其可能降解途径。结果表明,当温度为25℃,空床接触时间(EBCT)为8 h时,BAF对dhp的降解效果良好,去除率达到95.5%;BAF对dhp的去除率随着温度的升高和EBCT的增加而增大,EBCT为去除效果的主要影响因素。BAF出水中检测到邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸二甲酯(DMP)以及邻苯二甲酸(PA)等降解产物。据此推测邻苯二甲酸二己酯的生物降解途径可能为邻苯二甲酸二己酯的长烷基支链先断裂为较短的直链,而后断裂一个酯键形成单酯,接着再断裂另一酯键形成邻苯二甲酸,最终分解成二氧化碳和水。

关键词：环境工程学曝气生物滤池 dhp 生物降解降解产物

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细胞色素Cyp17a2在尼罗罗非鱼类固醇合成及配子发生过程中的功能研究

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细胞色素Cyp17a2在尼罗罗非鱼类固醇合成及配子发生过程中的功能...

作者：杨兰英西南大学

学位级别：硕士

细胞色素P450(cytochrome P450或CYP)是以亚铁血硫素为辅基的细胞色素蛋白酶基因超级族,以其一氧化碳结合物在450 nm处的光吸收峰命名。Cyp17a(cytochrome P450,family 17 and subfamily A)基因属于细胞色素P450超家族,对于性腺和头肾中... 详细信息

细胞色素P450(cytochrome P450或CYP)是以亚铁血硫素为辅基的细胞色素蛋白酶基因超级族,以其一氧化碳结合物在450 nm处的光吸收峰命名。Cyp17a(cytochrome P450,family 17 and subfamily A)基因属于细胞色素P450超家族,对于性腺和头肾中C18、C19、C21激素的合成很重要。在硬骨鱼类中普遍存在两个复制基因cyp17a1和cyp17a2。早期研究表明Cyp17a1具有羟化酶和裂解酶的活性,仅在性腺中表达,对于雌、雄激素的合成非常重要。而Cyp17a2只具有羟化酶的活性,在头肾和性腺中表达,并且在罗非鱼配子成熟时期的滤泡细胞表达上调,可能参与鱼类头肾中皮质醇和性腺中孕激素dhp(17a,20b,21-trihydroxy-4-pregnen-3-one)的合成。但未见关于Cyp17a2在鱼类类固醇合成和配子发生过程中的功能研究的报道,因此本研究以尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)为实验动物,采用CRISPR/Cas9技术成功建立cyp17a2基因纯合敲除系,研究cyp17a2基因突变对性腺发育、配子发生、类固醇生成和精子活力与育性等的影响。本论文的主要研究结果如下:1)Cyp17a基因在性腺及头肾中的表达及细胞定位。Real-time的数据表明cyp17a1和cyp17a2在孵化后60天(day after hatching,dah)之前,卵巢中的表达量高于精巢,之后在精巢中高表达。免疫组化表明,Cyp17a1从5 dah开始在XX个体卵巢的体细胞表达,后期表达于卵巢的间质细胞和颗粒细胞。在XY个体从10 dah开始表达于精巢的体细胞,后期表达于leydig细胞中。Cyp17a2从10 dah开始表达于XX个体卵巢体细胞,后期表达于间质细胞和鞘膜细胞,在XY从90dah开始表达于精巢的leydig细胞。在头肾中没有检测到Cyp17a1的表达,Cyp17a2从5 dah开始表达于肾间细胞。2)Cyp17a2基因纯合突变系的建立。利用CRISPR/Cas9技术在罗非鱼中敲除cyp17a2,并获得纯合突变鱼。Sanger测序及聚丙烯酰氨凝胶电泳的结果都显示成功获得cyp17a2突变系。免疫组化和Western blot的结果同样显示,cyp17a2的卵/精巢中没有Cyp17a2蛋白的表达。3)Cyp17a2基因突变对类固醇合成酶及类固醇激素合成水平的影响。分别在cyp17a2和cyp17a2的90 dah和180 dah时,Real-time发现,cyp17a1和cyp19a1a在卵巢中的表达水平以及cyp17a1和cyp11b2在精巢中的mRNA和蛋白表达水平没有明显变化,并且血清中雌、雄激素也没有显著的差异,这说明Cyp17a2可能不参与雌、雄激素的合成。与对照雌鱼相比,cyp17a2雌鱼不能正常产卵。血清dhp的水平在雌鱼产卵周期第八天出现峰值,而在敲除鱼中无论是否用hCG处理,血清中dhp的水平显著低于对照组。在cyp17a2雌雄鱼头肾中没有Cyp17a2的表达,血清中皮质醇合成水平都显著降低。这些结果说明,Cyp17a2可能参与性腺中dhp的合成及头肾中皮质醇的合成。4)Cyp17a2基因突变对雌鱼性腺发育及卵子发生的影响。在90和120 dah,H.E.(hematoxylin-eosin staining)检测发现cyp17a2卵巢中基本上观察不到卵母细胞,生殖细胞处于卵原细胞阶段;到180 dah时能够观察到III时相的卵母细胞,表明卵子发生已经得到一定程度的恢复。在90 dah,免疫组化显示cyp17a2卵巢中没有检测到雄性特异基因的表达,表明cyp17a2缺失不会导致由雌向雄的性逆转,同样没有检测到I、II时相卵母细胞的marker 42sP50信号,RA合成酶Aldh1a2的信号减弱。Real-time的结果显示,在90 dah,卵巢中vasa和piwil的表达降低,RA的合成酶aldh1a2的表达显著降低,分解酶cyp26b1的表达显著升高,同时,减数分裂的标志基因spo11和sycp3的表达显著降低。在180 dah,aldh1a2和cyp26b1的表达量无显著的差异,spo11和sycp3的表达显著升高。这表明cyp17a2基因的缺失会导致卵巢中生殖细胞的减数分裂的起始延迟,到后期得到一定的恢复。在90 dah,性腺中fshr和lhr的水平显著降低;在180 dah,垂体中fshβ和lhβ的表达水平未出现显著的差异,性腺中fshr的表达升高,lhr的水平依然显著低于对照组。上述的结果表明,Cyp17a2可能通过改变dhp或RA的合成,调控卵母细胞减数分裂的起始,进而影响卵母细胞的最终成熟和排卵。5)Cyp17a2基因突变

关键词： Cyp17a2 dhp CRISPR/Cas9 类固醇生成配子发生

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钙离子通道分子药理学进展

国外医学（生理病理科学与临床分册） 1993年第1期13卷 26-27页

作者：郑熙隆广东省心血管研究所

基于升降温全过程的PEC柱耐火性能指标研究

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基于升降温全过程的PEC柱耐火性能指标研究

作者：朱晋德苏州科技大学

学位级别：硕士

自然火灾包含升温和降温两个阶段,其中降温段对结构的耐火性能有很大影响。目前构件的耐火极限大多基于标准升温条件,与实际结构经历火灾的过程存在一定差异。试验和分析表明PEC柱在降温段也可能产生破坏。当外界温度场处于降温阶段时,... 详细信息

自然火灾包含升温和降温两个阶段,其中降温段对结构的耐火性能有很大影响。目前构件的耐火极限大多基于标准升温条件,与实际结构经历火灾的过程存在一定差异。试验和分析表明PEC柱在降温段也可能产生破坏。当外界温度场处于降温阶段时,由于混凝土材料的热惰性,导致结构内部温度场较外部出现温度滞后的现象,结构内部可能在继续升温,使得结构在火灾降温段的承载能力进一步降低,最终可能导致结构在降温段发生破坏。为全面分析PEC柱在升降温全过程的耐火性能,本文基于火灾全过程分析,重点对降温段可能的破坏进行了研究,主要的研究工作如下:(1)应用ABAQUS软件建立了考虑火灾升降温全过程的局部填充混凝土(Partially Encased Concrete,简称PEC)柱耐火性能分析有限元模型,并采用已有的高温下及高温后柱的试验数据验证了模型的正确性。(2)考虑降温段材料属性较升温段有所恢复的特点,分别计算了钢材和混凝土在升温段和降温段的材料属性。(3)定义场变量,编写能够实现材料不同温度阶段的材料属性的自动识别和转换的子程序,实现升降温全过程的计算过程。(4)定义并分析了自然火灾下的耐火性能指标(duration of the heating phase,简称dhp),利用验证后的模型分析了PEC柱在全过程火灾下可能出现的延迟破坏现象。(5)分别考虑荷载比、截面尺寸、长细比、混凝土强度、截面配筋率等五个因素对PEC柱dhp值的影响:火灾荷载比和截面长细比对PEC柱的耐火性能影响较大;截面尺寸对dhp的影响变现为两个过程:当荷载比较小时,dhp随截面尺寸的增大而增大,当荷载比较大时,截面尺寸对dhp的影响变小,dhp不随截面尺寸产生明显的变化;混凝土强度和截面配筋率对耐火性能的影响不大。并以计算的数据为基础拟合出包含这些因素的dhp实用计算公式。

关键词： PEC柱升降温延迟破坏性能指标 dhp

孕激素调控罗非鱼卵子发生及排卵过程的机制研究

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孕激素调控罗非鱼卵子发生及排卵过程的机制研究

作者：宋凌云西南大学

学位级别：硕士

在硬骨鱼类中,卵子发生的过程可以分为原始生殖细胞形成期、卵原细胞形成期、卵母细胞形成期、卵母细胞生长期、卵母细胞成熟期、排卵期。众所周知,17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one(17α,20β-DP,dhp)为鱼类特有的一种孕激素,其通... 详细信息

在硬骨鱼类中,卵子发生的过程可以分为原始生殖细胞形成期、卵原细胞形成期、卵母细胞形成期、卵母细胞生长期、卵母细胞成熟期、排卵期。众所周知,17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one(17α,20β-DP,dhp)为鱼类特有的一种孕激素,其通过与孕激素核受体(progesterone nuclear receptor,pgr)结合来调控鱼类排卵等多种生理过程。通过对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)dhp合成酶基因和核受体pgr的个体发生检测发现,二者均在孵化后5天(days after hatching,dah)开始表达,暗示dhp-PGR信号通路可能在卵巢发育过程中发挥重要作用,但dhp是否参与早期卵巢发育过程,仍有待于进一步研究。因此,为进一步阐明dhp在罗非鱼生殖过程中的重要作用,在pgr基因纯合突变系的基础上,进一步通过组织学、细胞学和分子生物学等手段,检测pgr突变在早期卵巢发育、生殖周期激素合成和排卵等过程中的影响,最终丰富我们对孕激素调控硬骨鱼类,乃至整个脊椎动物卵巢发育和雌性育性的理解和认识。本论文的主要研究结果如下:***基因在雌性性腺中的细胞定位。原位杂交的结果表明在孵化后90天,pgr定位于卵巢的生殖细胞中。在成鱼阶段,pgr表达于卵黄发生前的卵母细胞和滤泡层的颗粒细胞中。***基因突变对雌鱼性腺早期发育的影响。对30 dah,60 dah,90 dah的卵巢进行组织学检测,结果发现,在30 dah,60 dah,pgr纯合敲除雌鱼卵巢的生殖细胞数量比对照少。同时,在60 dah的对照雌鱼卵巢中可以发现大量II时相的卵母细胞存在,然而,pgr敲除卵巢中,大部分的卵母细胞都处于卵原细胞和I时相的卵母细胞阶段。另外,H.E.染色结果观察发现,pgr敲除雌鱼两侧性腺呈现出大量的体细胞和少量的生殖细胞。同时,Real-time PCR的结果与组织学观察结果一致,在60 dah,卵巢中vasa和42sp50的表达降低,说明pgr基因突变造成卵巢生殖细胞少。对类固醇合成通路基因检测发现,pgr敲除雌鱼性腺中St AR1,St AR2,cyp17a1和scc的表达量显著上调,同时,血清中检测到的睾酮(Testosterone,T)含量也显著高于对照组,雌激素合成相关基因的表达(cyp19a1a,foxl2)没有明显差异。卵巢发育到90 dah,从组织切片和Real-time PCR的结果来看,生殖细胞发育已经恢复正常。除了St AR1,其它类固醇合成相关基因基因(St AR2,scc,cyp17a1)的表达与对照相比已无明显差异。***基因突变对成鱼卵母细胞成熟和排卵的影响。在360dah,对照雌鱼在实验室良好的饲养环境下可实现14天产一次卵,而pgr敲除雌鱼无产卵现象。与对照雌鱼不同,pgr敲除卵巢中存在大量白色坏死的卵母细胞,同时,性腺体重系数(gonadosomatic index,GSI)显著高于对照雌鱼。在540dah,由于大量的卵母细胞堆积,无法排出,pgr敲除雌鱼卵母细胞大量液化,整个性腺中充满了大量的绿色液体。通过人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,h CG)体外处理实验发现,处理0h时,对照组和敲除组可见明显的生发泡存在;处理到24h时,对照组和敲除组都完成了生发泡破裂,表明卵母细胞已经成熟。但值得注意的是,此时对照组的卵母细胞排卵过程也已完成,而敲除组卵母细胞表现出排卵失败。上述结果表明,pgr基因敲除不会影响卵母细胞成熟,但会影响卵母细胞排卵过程。***基因突变对生殖周期中激素合成和滤泡破裂的影响。众所周知,在实验室条件下,尼罗罗非鱼的平均产卵周期为14天,已有的观点认为,雌激素(17β-estradiol,E2)和dhp在鱼类卵母细胞生长,成熟和排卵过程中发挥着至关重要的作用。因此,我们收集了对照雌鱼和pgr纯合敲除雌鱼产卵周期中第3、8、12、14天的血清,检测其血清dhp以及E2的水平,结果表明,pgr敲除雌鱼dhp的含量都显著高于对照。值得一提的是,在产卵后第8天至14天之间,对照雌鱼血清dhp含量大幅升高并出现一个峰值,而敲除组中没有此峰存在,呈现dhp周期性波动缺失。另外,与dhp一样,pgr基因敲除也导致E2周期波动缺失。由于dhp的分泌受垂体释放的促性腺激素(luteinizing hormone,LH)的严密调控,通过Real-time PCR和荧光免疫组化检测发现,在pgr纯合敲除雌鱼垂体中lh基因的表达显著高于对照,这可能是pgr纯合敲除导致dhp水平升高的原因之一。除此以外,TUNEL染色结果发现,在对照组的滤泡层细胞中可以检测到明显的阳性信号,而敲除组未检测到阳性信号,

关键词： pgr dhp 卵子发生排卵

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并行频繁项集挖掘算法研究

并行频繁项集挖掘算法研究

作者：何镇宏四川师范大学

学位级别：硕士

频繁项集挖掘用来发现数据项集中的频繁模式,在商品关联分析和超市促销策略决策中有着广泛的应用。但是,传统的频繁项集挖掘算法的时间复杂度较高,因此许多国内外的学者们致力于提高相关算法的性能。随着大数据时代的到来,传统的频繁项... 详细信息

频繁项集挖掘用来发现数据项集中的频繁模式,在商品关联分析和超市促销策略决策中有着广泛的应用。但是,传统的频繁项集挖掘算法的时间复杂度较高,因此许多国内外的学者们致力于提高相关算法的性能。随着大数据时代的到来,传统的频繁项集挖掘算法往往受限于单台计算机有限的计算能力和存储容量,无法满足用户对于处理更大规模的频繁项集挖掘问题的迫切需求。随着大数据技术的发展,基于Hadoop平台的频繁项集挖掘算法在时间效率上相比于单机算法有了很大的提高。最新的内存计算框架Spark相比于Hadoop平台具有并行计算,Spark已成为目前工业界搭建分布式计算平台的主流框架。因此,本文将Spark框架和频繁项集挖掘算法相结合,研究在Spark平台下实现并行频繁项集挖掘算法,以提高频繁项集挖掘算法的时间效率。本文的主要工作包含如下几个方面。（1）学习研究了经典的频繁项集挖掘算法,包括Apriori算法,dhp算法,FP-Growth算法。（2）针对Apriori算法由K频繁项集生成K+1频繁项集的过程中,需要多次重复检测项集中的二项子集是否频繁的问题,提出了一种基于二维表的Apriori改进算法,用一个二维表记录二项子集是否频繁,从而减少了判断二项子集是否频繁需要多次扫描事务数据库的时间。实验结果表明,本文所提出的改进Apriori算法比原Apriori算法相比,可以明显减少算法的运行时间。（3）学习研究了Spark框架的相关技术,基于Linux操作系统,运用Java结合Scala开发语言,搭建了基于Spark平台的分布式开发环境,用于实现所提出的并行频繁项集挖掘算法。（4）针对dhp在第一次统计桶中项集数目时,会生成许多重复的候选项集,提出了基于Spark单节点的压缩dhp算法,该算法用形象地数字形式代替重复的项集数,并且在第一次扫描事务数据库时就实施,通过实际的试验证明,提出的这个压缩改进算法在时间复杂度上明显比没有采用压缩dhp的单节点dhp算法要低。（5）针对单节点只有一个计算单元的不足,研究了基于集群的Spark分布式计算框架。利用Spark多节点集群分布式结构实现了分布式dhp算法和分布式FP-Growth算法,充分利用了集群的优势。在模拟数据和UCI数据集Pumsb star上的实验结果表明,基于集群的并行策略比基于单节点的并行环境具有更好的时间效率。

关键词： Spark平台关联规则频繁项集挖掘算法 dhp FP-Growth

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多壁碳纳米管化学修饰电极测定替硝唑的研究

分析化学 2004年第3期32卷 412-412页

作者：吕少仿孝感学院化学系孝感432100

替硝唑(Tinidazole，TNZ)是继甲硝唑后新一代的抗厌氧菌和抗滴虫的国家级二类新药，可广泛应用于临床各种厌氧菌感染。其测定方法有紫外分光光度法、高效液相色谱法、光度法及电化学方法等。但用碳纳米管修饰电极测定TNZ还未见报道。

关键词：还原峰电流 TNZ MWNT dhp 修饰电极玻碳电极替硝唑

1,4-Dihydropyridines as pharmacophores for voltage-gated Ca2+ channels

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Acta Pharmacologica Sinica 1996年第1期 78-78页

作者： David J TRIGGLE(School of Pharmacy, State Univeristy of New York atBuffalo, Buffalo NY 14260, USA)

AIM: To determine structural requirements for interaction of 1,4-dihydropyridines (1,4-dhp) with Ca2+channels of the L-class. METHODS: Chemical synthesis:radioligand binding in intact cardiac and neuronal cells. RESUL... 详细信息

关键词： dhp Dihydropyridines as pharmacophores for voltage-gated Ca channels