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作者：杨倩倩华中农业大学

学位级别：硕士

双半乳糖甘油二脂(digalactosyl diacylglycerol,dgdg)是广泛存在于高等植物叶绿体和蓝藻中的一类半乳糖脂,作为类囊体膜的主要组成成分之一,dgdg对于植物光合作用功能的发挥以及植物的生长发育具有重大意义。而在豆科植物中,dgdg也在... 详细信息

双半乳糖甘油二脂(digalactosyl diacylglycerol,dgdg)是广泛存在于高等植物叶绿体和蓝藻中的一类半乳糖脂,作为类囊体膜的主要组成成分之一,dgdg对于植物光合作用功能的发挥以及植物的生长发育具有重大意义。而在豆科植物中,dgdg也在其根瘤共生体膜上存在。DGD1是dgdg的主要合成酶之一。在前期工作中,已克隆到该基因的全长,通过免疫荧光和免疫电镜发现Mt DGD1定位于根瘤中含菌细胞的共生体膜上,构建了该基因沉默和超表达载体。本研究以豆科模式植物蒺藜苜蓿A17的双半乳糖甘油二脂合成酶基因(Mt DGD1)为对象,在前期已有的工作基础上,对该基因在豆科植物共生固氮中的功能机制进行进一步探究。主要研究内容和结果如下:1.通过生物信息学网站分析、获取、克隆Mt DGD1启动子序列,构建了启动子-GUS融合载体,进行了组织表达定位观察。通过苜蓿基因表达谱网站及转录组分析,利用Realime PCR检测了Mt DGD1的时空表达和组织特异性表达,确证该基因与共生固氮作用密切相关。2.通过植株长势、根瘤切片的光学显微镜和透射电子显微镜观察、根瘤固氮酶活测定以及根瘤中dgdg脂质丰度的测定等多个指标,检测和考察了Mt DGD1沉默及超表达后转基因植株的共生表型,阐明了该基因在共生固氮中的作用;3.通过Realime PCR和LC-MS分别检测了低磷条件下Mt DGD1的转录水平,dgdg及磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC)等脂质丰度的变化,初步明确该基因在根瘤发育过程中的功能机制。本研究获得了以上直接实验证据,确证了Mt DGD1在豆科植物根瘤菌入侵、根瘤发育和共生固氮中的功能,也表明了dgdg在根瘤共生固氮过程中的重要性。聚半乳糖醛酸酶基因(Polygalacturonase,PG)普遍存在于高等植物细胞中,因其能够降解细胞壁、促进细胞分裂和果实成熟等功能,而与植物生长发育过程中有着非常密切的联系。本研究以豆科模式植物蒺藜苜蓿一个PG(Medtr6g005630)基因为对象,对该基因进行了简单生物信息学分析,该基因全长4150 bp,其中编码区1278 bp,编码425个氨基酸;对其编码的聚半乳糖醛酸酶的保守结构域分析结果发现:该酶包括PL-6 superfamily和Glycoydro8两个与细胞壁主要成分--果胶降解有关的保守结构域;氨基酸序列比对和系统进化分析发现该酶与鹰嘴豆、赤豆等豆科植物中的同源关系更近。此外,根据苜蓿基因表达谱数据库分析和RT-PCR实验结果揭示Mt PG在根瘤中特异性表达,而在其他非共生组织如根、茎、叶中表达量很少;此外,从英国John Innes Centre获赠3种Tnt1转座子插入突变体材料(NF0999、NF5561和NF4746),通过对该基因Tnt1转座子插入位点分析设计引物,利用PCR进行突变体筛选、验证及纯合突变体共生表型观察分析等方面揭示了该基因可能对豆科植物共生固氮中的早期侵染过程有很重要的作用。

关键词：蒺藜苜蓿 MtDGD1 启动子 dgdg LC-MS 共生表型 PG 聚半乳糖醛酸转座子插入突变

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dgdg在维持植物光合膜结构和功能中的重要作用

DGDG在维持植物光合膜结构和功能中的重要作用

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作者：张珠珠兰州大学

学位级别：硕士

拟南芥dgdl突变体(Arabidopsis thaliana dgdl mutant)是双半乳糖甘油二酯(digalactosyl diacylglycerol,dgdg)缺乏的突变体。已有的研究表明,dgdl突变体中PSⅡ光合活性降低,光合系统中一些大分子结构发生了变化。本文以拟南芥野生型(Ar... 详细信息

拟南芥dgdl突变体(Arabidopsis thaliana dgdl mutant)是双半乳糖甘油二酯(digalactosyl diacylglycerol,dgdg)缺乏的突变体。已有的研究表明,dgdl突变体中PSⅡ光合活性降低,光合系统中一些大分子结构发生了变化。本文以拟南芥野生型(Arabidopsis thaliana Co1—2,wild type)与dgdl突变体为材料,主要研究了dgdg在植物光合系统蛋白质积累以及光系统复合物结构维持中的作用。研究发现: 1、与野生型相比,dgdl突变体的光系统Ⅱ光化学效率(Fv/Fm)较低,光饱和点低,光系统全链电子传递活性较低,反映了突变体的光合能力较低,光合潜能较小;此外,dgdl突变体中叶绿素含量比野生型低,Chl a/b的比值也较低,叶绿素低温(77K)荧光光谱中光系统Ⅰ发射峰发生蓝移,且F6/F比值上升,暗示了突变体中光合系统结构可能发生了一定变化。 2、与野生型相比,dgdl突变体光系统Ⅱ电子传递活性较低,高光辐射下光抑制现象较野生型更严重,且在光恢复过程中恢复程度较低,暗示了其更高的光系统Ⅱ光敏感性;dgdl突变体反应中心蛋白D1,D2的含量较低,其中D1蛋白的表达在转录和翻译两个水平均降低,这表明突变体中光系统Ⅱ结构发生了一定的变化,进而影响到了其光系统Ⅱ的正常光合功能。 3、蓝绿温和胶电泳分析发现,dgdl突变体中出现光系统Ⅰ亚复合物。对于突变体中光系统Ⅰ主要功能蛋白含量的分析,以及不同离液盐处理下光系统Ⅰ基质侧亚基稳定性的研究表明,dgdl突变体中光系统Ⅰ PsaD,PsaE亚基稳定性的降低是PSⅠ亚复合物出现的原因。 4、dgdl突变体中光合系统结构和功能的一系列的重要变化表明,dgdg在光合系统维持其正常结构和功能过程中具有重要作用。此外,突变体中MGDG/dgdg比值的变化对于突变体光合系统结构和功能是否也有影响,还需要进一步的研究。

关键词：类囊体膜 dgdg 光合系统 dgd1突变体

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用柱层析和薄层层析法从菜籽“油脚”中分离MGDG和dgdg的初步研究

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汕头大学学报（自然科学版） 1990年第2期5卷 122-127页

作者：佘纲哲陈碧祥王小坚

本文应用柱层析和薄层层析法,从菜籽“油脚”中分离,提纯单半乳糖甘油二酯(Monogalactosyl Diglyceride,MGDG)和双半乳糖甘油二酯(Digalactosyl Diglyceride,dgdg)并对菜籽中提纯的MGDG和dgdg的脂肪酸组成做了测定。

关键词：菜籽油脚 MGDG dgdg 提取分离

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甘油糖脂的UPLC-Q-TOF-MS研究

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分析测试学报 2008年第S1期27卷 55-58页

作者：陈德莹徐继林严小军李海英宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室浙江宁波315211

The qualitative and quantitative research on glycolipids compounds was analyzed by means of the flight time ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry(UPLC-Q-TOF-MS) *** mass spectrometry was performed in reflective time-of-flight using electron spraying *** components in monoglycosyldiglycerides(MGDG) and diglycosyldiglycerides(dgdg) were determined in positive ion mode,and the sulfoquinovosyl diacylglycerol(SQDG) were analyzed in negative ion *** results showed that each component in golycolipids can be separated effectively with gradient elution in the BEH C18 *** proportion of each components accounts for total glycolipids can be determined by using degree elution.

关键词： UPLC-Q-TOF-MS MGDG dgdg SQDG

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甘油糖脂的UPLC-Q-TOF-MS研究

甘油糖脂的UPLC-Q-TOF-MS研究

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2008年全国有机质谱学术会议

作者：陈德莹徐继林严小军李海英宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室

糖脂是植物光合膜脂的主要成分,在影响光合作用的效率、帮助植物体适应生态条件的改变等方面起着非常重要的作用,糖脂及其降解产物在抗肿瘤活性及影响细胞凋亡、分化、衰老等方面的研究现在也越来越深入,所以研究植物膜糖脂具有十分重... 详细信息

糖脂是植物光合膜脂的主要成分,在影响光合作用的效率、帮助植物体适应生态条件的改变等方面起着非常重要的作用,糖脂及其降解产物在抗肿瘤活性及影响细胞凋亡、分化、衰老等方面的研究现在也越来越深入,所以研究植物膜糖脂具有十分重要的意义。由于市场上无法购

关键词： UPLC-Q-TOF-MS MGDG dgdg SQDG

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基于2D（NP/RP）LC-MS/MS的蓝细菌脂质组学分析

基于2D（NP/RP）LC-MS/MS的蓝细菌脂质组学分析

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中国化学会第二届全国质谱分析学术报告会

作者：单雅冰刘轶群杨丽白玉孙青刘虎威赵进东北京大学化学与分子工程学院国家地质实验测试中心北京大学生命科学学院

甘油脂是构成蓝细菌光合膜（类囊体膜）的主要成分,类囊体膜是光合作用电子传递以及放氧的场所。目前已经展开了很多甘油脂的研究工作,主要是通过构造突变体来研究各类甘油脂在光合作用中的功能及其与蛋白质结合形成的蛋白复合物的生理... 详细信息

甘油脂是构成蓝细菌光合膜（类囊体膜）的主要成分,类囊体膜是光合作用电子传递以及放氧的场所。目前已经展开了很多甘油脂的研究工作,主要是通过构造突变体来研究各类甘油脂在光合作用中的功能及其与蛋白质结合形成的蛋白复合物的生理功能。但在光合作用中甘油脂的分离和鉴定方面的研究还比较少[1]。我们课题组开发了正相/反相二维液相色谱-质谱（2D（NP/RP）LC-MS/MS）联用方法[2],并用于多种生物样品的脂质类化合物轮廓分析[]针对甘油脂分离鉴定的问题,运用发现了一些此前未被检测鉴定出的甘油脂质[3-6]。本文以蓝细菌Synechococcus *** 7002为研究对象,首先建立了光合作用中甘油脂的数据库,采用（2D（NP/RP）LC-MS/MS）方法成功实现了单半乳糖甘油二脂（MGDG）、单葡萄糖甘油二酯（Glc DG）这对同分异构体的分离,及双半乳糖甘油二脂（dgdg）、磷脂酰甘油（PG）、硫代异鼠李糖甘油二脂（SQDG）的定性与定量,这对进一步研究甘油脂的生理功能提供了可能。我们首次从蓝藻中鉴定出三种分别含有C17:0,C17:1,C17:3脂肪酰基链的PG。

关键词：甘油脂脂质组学 MGDG Glc DG dgdg PG SQDG LC-MS

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浅谈糖脂的开发和利用

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中国油脂 2000年第6期25卷 155-156页

作者：佘纲哲汕头大学海洋生物实验室广东省汕头市515063

简述糖脂的分类、结构及其应用研究的一些情况 ,并介绍从菜籽“油脚”中提取分离MGDG和dgdg的方法。

关键词：提取分离糖脂油脚 MGDG dgdg 植物油

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