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疏筋解毒方阻抑多巴胺能神经元变性缓解帕金森病的作用机制研究

疏筋解毒方阻抑多巴胺能神经元变性缓解帕金森病的作用机制研究

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作者：刘燕陕西中医学院

学位级别：硕士

目的:实验从大鼠行为学变化、da代谢途径以及细胞凋亡调控分子方面,研究疏筋解毒方对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHda)诱导PD大鼠模型的防治作用,从而揭示疏筋解毒方对PD治疗作用的可能机制,为中药治疗PD提供一定的实验依据和临... 详细信息

目的:实验从大鼠行为学变化、da代谢途径以及细胞凋亡调控分子方面,研究疏筋解毒方对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHda)诱导PD大鼠模型的防治作用,从而揭示疏筋解毒方对PD治疗作用的可能机制,为中药治疗PD提供一定的实验依据和临床参考。方法:实验选取Sprague-dawley(SD)雄性大鼠,随机分为五组:假手术组、模型组、左旋多巴(L-dopamine,LD)组(LD组)、疏筋解毒大剂量组(SJL组)、疏筋解毒中剂量组(SJM组)和疏筋解毒小剂量组(SJS组)。采用脑立体定位黑质内注射6-OHda建立PD大鼠模型,分别进行了PD大鼠行为学观察;应用高效液相色谱法(high peformance liquid chromatography,HPLC)检测PD大鼠黑质纹状体da及其代谢产物高香草酸(homovanillicacid,HVA)、3,4-二羟基苯乙酸(dihydr oxyphenylaceticacid,DOPAC)的含量;应用原位杂交法(in situ hybridization, ISH)检测PD大鼠黑质纹状体Bcl-2mRNA/BaxmRNA分布及表达。实验结果: 1疏筋解毒方对PD大鼠行为学的影响 LD组及SJL、SJM组均可以有效缓解PD大鼠的旋转行为,与模型组、SJS组比较有统计学差异(Pda及其代谢产物的影响高效液相色谱结果:与假手术组比较其它各组PD大鼠纹状体内da含量均降低,有统计学差异(Pda含量增高与模型组及SJS组比较具有统计学差异(Pda/HVA比值降低;SJL、SJM组DOPAC、HVA含量降低,da/HVA比值回升至正常水平,与LD组比较具有统计学差异(Pda水平,改善PD症状的作用。 2疏筋解毒方具有保护黑质致密部多巴胺能神经元的作用,与LD类药物的替代治疗机制不同,它可能通过促进PD大鼠损毁侧黑质残存多巴胺能神经元分泌da,同时抑制da分解,从而提高内源性儿茶酚胺类物质的含量,达到其治疗作用。 3疏筋解毒方可能在基因调控层面,通过上调凋亡抑制因子Bcl-2mRNA,下调促调往因子BaxmRNA,提高Bcl-2mRNA/BaxmRNA比率,来调节调亡因子的表达,从而达到抑制PD大鼠中脑多巴胺能神经元凋亡,减少多巴胺能神经元丢失的作用,减缓PD病程的进展。

关键词：疏筋解毒方 PD大鼠行为学 da及其代谢产物 Bcl-2mRNA/BaxmRNA

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