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CK19与cyclind1/cdk4、NF-κB在乳腺干细胞及其病变中的表达和相关性研究

CK19与cyclinD1/CDK4、NF-κB在乳腺干细胞及其病变中的表达和相...

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作者：毛俊大连医科大学

学位级别：硕士

目的:干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞。正常情况下,干细胞的自我更新和分化能力受到严格的调控,一旦这种机制被破坏,细胞就会无限制的生长、繁殖、形成异常新生物,即肿瘤。乳腺肿瘤虽然组织类型复杂,但其组织发生却... 详细信息

目的:干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞。正常情况下,干细胞的自我更新和分化能力受到严格的调控,一旦这种机制被破坏,细胞就会无限制的生长、繁殖、形成异常新生物,即肿瘤。乳腺肿瘤虽然组织类型复杂,但其组织发生却有其同源性,都来自于乳腺上皮干细胞。同时,乳腺癌干细胞作为第一个在实体瘤中被鉴定的肿瘤干细胞受到广泛关注。同其他器官一样,乳腺干细胞也是多潜能的,可以产生各级祖细胞,并最终分化成肌上皮和导管上皮。虽然乳腺组织中存在干细胞,但还是缺乏特异性的乳腺干细胞标记物。乳腺中的细胞角蛋白的表达在某种程度上反应了细胞的分化,角蛋白19(CK19)是在胚胎最早表达的角蛋白之一,常在乳腺末梢小管腺泡单位(Terminal Duct Lobular TDLU)的腺上皮细胞表达,在胎儿的乳腺中包含有CK19阳性的腺上皮细胞,目前被认为是乳腺干细胞的标志。本实验应用免疫组化检测乳腺上皮干细胞标记物CK19,转录因子NF-κB和细胞周期素cyclind1及其依赖激酶cdk4在正常乳腺组织、乳腺增生症及浸润性导管癌中的表达,探讨细胞周期在成人乳腺上皮干细胞分化和演变中的作用,揭示乳腺上皮干细胞分化及发生恶性转化时演变规律和机制。方法:1.采用免疫组化SP法分别检测10例正常乳腺组织、17例乳腺增生症、38例浸润性乳腺癌中干细胞标记物CK19的表达情况,探讨CK19在乳腺干细胞及其病变的表达与分化的关系。2.采用免疫组化SP法分别检测细胞周期调控蛋白cyclind1和cdk4及核转录因子NF-κB的表达情况,并对它们在乳腺正常组织、良性增生组织、乳腺肿瘤分化程度上的差异及它们各自之间的相关性进行观察总结。结果:1. CK19在乳腺正常组织、增生、浸润癌组织中的表达逐渐增多,在此三种乳腺组织中的表达存在差异,P41.5%,低分化的乳腺癌CK19阳性表达率为100%,显著高于高分化的乳腺癌(25.0%),差异具有统计学意义(Pcyclind1在正常乳腺组织无表达,乳腺增生病中阳性率为11.8%,38例乳腺癌中有14例表达,阳性率为47.4%,正常和增生组织与乳腺癌之间表达有明显差异(Pcdk4在正常乳腺组织、乳腺增生性疾病和浸润性导管癌中均有表达,其阳性率分别为10.0%、17.6%、45.9%,各组织类型之间的表达有显著的差异(P4. NF-κB在正常乳腺组织、乳腺增生性疾病、浸润性导管癌中均有表达,其阳性率分别为20.0%、35.3%、66.0%,各组织类型之间存在差异性(Pcyclind1的表达呈现正相关,相关系数r=0.535,P=0.038;乳腺癌中CK19和cdk4的表达呈显著正相关,相关系数r=0.821,P=0.00乳腺癌中cyclind1和NF-κB的表达呈显著正相关,相关系数r=0.671,P=0.00。结论:1. CK19在乳腺癌组织中的表达水平高于正常乳腺组织和乳腺增生病,进一步证实了乳腺癌组织中可能存在具有自我更新和分化潜能的干细胞样细胞的理论研究。2. CK19在乳腺癌组织中表达与分化程度关系密切,提示CK19与乳腺癌恶性程度有关,可能是评估乳腺癌预后的重要生物学指标之一。3. cyclind1/cdk4在乳腺癌组织中的表达水平高于正常乳腺组织和乳腺增生病,CK19与cyclind1/cdk4的表达阳性数相关性分析显示,两者呈正相关,提示细胞周期的紊乱是乳腺干细胞分化异常的重要原因。4. cyclind1/cdk4与NF-κB在各乳腺组织类型中的表达显示,两者呈显著正相关,说明在乳腺干细胞癌变过程中,NF-κB的过表达可能促进了cyclind1/cdk4的表达,其机制可能是由于cyclind1启动子含有NF-κB的结合位点,NF-κB的活化可以促进cyclind1表达以及G1/S期转换的功能,从而加速细胞周期的进程。

关键词：乳腺干细胞分化 CK19 cyclind1/cdk4 NF-κB

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cyclind1/cdk4在洛伐他汀抑制裸鼠乳腺癌移植瘤增殖中的作用

CyclinD1/CDK4在洛伐他汀抑制裸鼠乳腺癌移植瘤增殖中的作用

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首届中国西部营养与健康、亚健康学术会议

作者：罗远琼糜漫天第三军医大学营养与食品卫生学教研室

目的:本研究以裸鼠乳腺癌异种移植瘤动物模型为研究对象,检测了 LOV 对高表达 BRCA1基因乳腺癌异种移植瘤生长能力的影响,并初步探讨了其作用的分子机制。

关键词：乳腺癌 cyclind1/cdk4 cdk 移植瘤洛伐他汀

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RNAi对人黑素瘤细胞Fas/FasL系统表达的影响

RNAi对人黑素瘤细胞Fas/FasL系统表达的影响

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第六届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛

作者：崔兰英宋熙瑶哈尔滨医科大学附属第一医院

目的构建靶向抑制黑素瘤M14细胞Fas/FasL系统表达的siRNA表达质粒,抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。方法构建靶向FasL系统的siRNA表达质粒,转染体外培养的M14细胞,应用RT-PCR检测mRNA的干扰效果。结果靶向FasL基因的特异性siRNA序列,可以... 详细信息

目的构建靶向抑制黑素瘤M14细胞Fas/FasL系统表达的siRNA表达质粒,抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。方法构建靶向FasL系统的siRNA表达质粒,转染体外培养的M14细胞,应用RT-PCR检测mRNA的干扰效果。结果靶向FasL基因的特异性siRNA序列,可以高效地抑制M14细胞FasL基因表达,在mRNA水平表达抑制率为65.12%（P＜0.01）;M14细胞中过表达的cyclin D1/cdk4和survivin基因,均出现了不同程度的表达下调,而低表达的Fas和caspase-3则呈上调表现（P＜0.05）。结论构建的靶向FasL的RNAi表达质粒,通过改变G1期相关信号转导通路影响细胞周期进程。通过调控cyclind1/cdk4,survivin/caspase-3的表达水平,可以显著地抑制M14细胞增殖、诱导其凋亡。

关键词：恶性黑素瘤 RNA干扰 Fas/FasL cyclind1/cdk4 survivin/caspase-3

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RNAi对人黑素瘤细胞Fas/FasL系统表达的影响

RNAi对人黑素瘤细胞Fas/FasL系统表达的影响

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第四届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛

作者：崔兰英宋熙瑶哈尔滨医科大学附属第一医院

目的:构建靶向抑制黑素瘤M14细胞Fas/FasL系统表达的siRNA表达质粒,抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。方法:构建靶向FasL系统的siRNA表达质粒,转染体外培养的M14细胞,应用RT-PCR检测mRNA的干扰效果。结果:靶向FasL基因的特异性siRNA序列,可... 详细信息

目的:构建靶向抑制黑素瘤M14细胞Fas/FasL系统表达的siRNA表达质粒,抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。方法:构建靶向FasL系统的siRNA表达质粒,转染体外培养的M14细胞,应用RT-PCR检测mRNA的干扰效果。结果:靶向FasL基因的特异性siRNA序列,可以高效地抑制M14细胞FasL基因表达,在mRNA水平表达抑制率为65.12%（P＜0.01）;M14细胞中过表达的cyclin D1/cdk4和survivin基因,均出现了不同程度的表达下调,而低表达的Fas和caspase-3则呈上调表现（P＜0.05）。结论:构建的靶向FasL的RNAi表达质粒,通过改变G1期相关信号转导通路影响细胞周期进程。通过调控cyclind1/cdk4,survivin/caspase-3的表达水平,可以显著地抑制M14细胞增殖、诱导其凋亡。

关键词：恶性黑素瘤 RNA干扰 Fas/FasL cyclind1/cdk4 survivin/caspase-3

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RNAi对人黑素瘤细胞Fas/FasL系统表达的影响

RNAi对人黑素瘤细胞Fas/FasL系统表达的影响

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纪念中国微生物学会临床微生物学专业委员会成立五周年-第五届中国临床微生物学大会暨台湾海峡两岸微生物学与免疫学论坛

作者：崔兰英宋熙瑶哈尔滨医科大学附属第一医院

构建靶向抑制黑素瘤M14细胞Fas/FasL系统表达的siRNA表达质粒,抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。方法构建靶向FasL系统的siRNA表达质粒,转染体外培养的M14细胞,应用RT-PCR检测mRNA的干扰效果。结果靶向FasL,基因的特异性siRNA序列,可以高效... 详细信息

构建靶向抑制黑素瘤M14细胞Fas/FasL系统表达的siRNA表达质粒,抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。方法构建靶向FasL系统的siRNA表达质粒,转染体外培养的M14细胞,应用RT-PCR检测mRNA的干扰效果。结果靶向FasL,基因的特异性siRNA序列,可以高效地抑制M14细胞FasL基因表达,在mRNA水平表达抑制率为65.12%(P4细胞中过表达的cyclin D1/cdk4和survivin基因,均出现了不同程度的表达下调,而低表达的Fas和caspase-3则呈上调表现(Pcyclind1/cdk4,survivin/caspase-3的表达水平,可以显著地抑制M14细胞增殖、诱导其凋亡。

关键词：恶性黑素瘤 RNA干扰 Fas/FasL cyclind1/cdk4 survivin/caspase-3

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