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Molecular Cloning and Bacterial Expression of Germacrene A Synthase cDNA from crepidiastrum sonchifolium

Chemical Research in Chinese Universities 2006年第5期22卷 606-611页

作者： REN Jie LIU Yan-qiu YANG Li NI Rui YOU Song School of Pharmaceutical Engineering Shenyang Pharmaceutical UniversityShenyang 110016 P. R. China

Germacrene A synthase（GAS） catalyzes the biosynthesis of germacrene A, which is a key precursor for sesquiterpone lactones. Cloning of a novel full-length cDNA encoding GAS from the medicinal plant crepidiastrum sonchifolium（dosignated CsGAS） is reported in this study. The cDNA is 1837 bp long and contains a 1680-bp open reading frame encoding a 559 amino-acid protein. The functional expression of the cDNA in Escherichia coli, as an N-terminal thioredoxin fusion protein, with the pET32a vector yielding a recombinant enzyme. Sequence analysis was used to compare this enzyme with the mechanistically related epi-aristolochene synthase from tobacco, and the effect of possible involvement of a number of amino acids in sesquiterpone synthase on product specificity was also discussed.

关键词： Germacrene A synthase crepidiastrum sonchifolium Sesquiterpene synthase Expression Fusion protein

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