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Enhancement Effect of CpG DNA on the Somatostatin DNA Vaccine in Mice

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Agricultural Sciences in China 2007年第7期6卷 882-889页

作者： XUE Chun-lin MAO Da-gan YANG Li-guo CHENG Bao College of Animal Science and Technology Huazhong Agricultural University Wuhan 430070 P.R.China Research Institute of Animal Breeding ＆ Reproduction Nanjing Agricultural University Nanjing 210095 P.R.China Yancheng Institute of Animal Husbandry ＆ Veterinary Yancheng 224002 P.R. China

To study the immune effect of cpgdna on somatostatin （SS） DNA vaccine, the 20-day-old experimental mice were immunized with 20 lag SS eukaryotic expression plasmid pES/2SS with different adjuvants in equal dose, such as the synthetic CpG-ODN, the pE-CpG plasmid, E. coli DNA and the crude liposome. A booster was given two weeks later. The results showed that the body weight gain of female mice in the SS immunized group was higher than that of the control （P 〈0.05）. The levels of antibodies against SS, IgG2a/IgG1, spleen lymphocyte proliferation activity and the concentrations of GH and IGF-Ⅰ in the DNA vaccine groups combined with cpgdna were significantly increased compared to that of the group immunized with DNA vaccine alone. All these suggested the recombinant SS expression plasmid can stimulate animals to produce antibodies against SS, and cpgdna adjuvant can enhance the immune effect of DNA vaccine against SS and influence the concentration of GH and IGF-Ⅰ .

关键词： immnostimulatory sequence cpgdna somatostatin DNA vaccine

LPS和cpgdna为双靶点的中药抗脓毒症活性成分的筛选、分离和活性研究

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中国药理通讯 2010年第2期27卷 20-21页

作者：郑江刘鑫周红第三军医大学西南医院综合实验研究中心第三军医大学药学院药理学教研室重庆400038

目的脓毒症是由感染因素导致的全身性炎症反应综合征（systematic inflammatory response syndrome，SIRS）。是临床创伤、烧伤和感染性疾病患者的常见并发症，其发病率和死亡率居高不下。因此，国际上针对脓毒症的防治性研究一直是临... 详细信息

目的脓毒症是由感染因素导致的全身性炎症反应综合征（systematic inflammatory response syndrome，SIRS）。是临床创伤、烧伤和感染性疾病患者的常见并发症，其发病率和死亡率居高不下。因此，国际上针对脓毒症的防治性研究一直是临床医学关注的焦点问题。既往研究主要以诱导脓毒症的主要病原分子内毒素（LPS），但单独针对LPS这一靶点开发出的药物疗效不显著。

关键词：脓毒症 cpgdna 活性成分双靶点 LPS inflammatory 全身性炎症反应综合征筛选

cpgdna的免疫原性与系统性红斑狼疮发病机理的关系

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上海免疫学杂志 1999年第5期19卷 316-316页

作者：马爱妞吴厚生上海医科大学上海200032

系统性红斑狼疮患者血浆中不仅游离ＤＮＡ含量显著增高，且出现非甲基化ＣｐＧＤＮＡ以及凋亡小体，它们很可能是由于自身淋巴细胞活化后引起的。这种自身ＤＮＡ量和质的变化，很可能是诱导致病性ＩｇＧ类抗ｄｓＤＮＡ抗体生成的... 详细信息

系统性红斑狼疮患者血浆中不仅游离ＤＮＡ含量显著增高，且出现非甲基化ＣｐＧＤＮＡ以及凋亡小体，它们很可能是由于自身淋巴细胞活化后引起的。这种自身ＤＮＡ量和质的变化，很可能是诱导致病性ＩｇＧ类抗ｄｓＤＮＡ抗体生成的真正原因，是诱发ＳＬＥ的自身免疫原。

关键词： SLE cpgdna 病理免疫原性

减毒鼠伤寒沙门氏菌运送的鸡传染性支气管炎病毒s1基因DNA疫苗及其免疫效力研究

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病毒学报 2007年第3期23卷 212-217页

作者：焦红梅焦新安田华荣潘志明殷月兰崔一晨黄金林扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009

为研制鸡传染性支气管炎新型基因工程疫苗,构建和表达了运送鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌。首先将鸡传染性支气管炎病毒M41株的全长s1基因插入到嵌合CpG DNA的真核表达质粒pVAX1中,构建出重组真核表达质粒... 详细信息

为研制鸡传染性支气管炎新型基因工程疫苗,构建和表达了运送鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌。首先将鸡传染性支气管炎病毒M41株的全长s1基因插入到嵌合CpG DNA的真核表达质粒pVAX1中,构建出重组真核表达质粒pVAX1-S1-CpG。然后将重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建出运送DNA疫苗的重组减毒沙门氏菌SL7207(pVAX1-S1-CpG)。将重组菌SL7207(pVAX1-S1-CpG)分别以1×109CFU,5×109CFU,1×1010CFU的剂量滴鼻和口服接种4日龄雏鸡,2周内所有试验鸡均无任何不良反应,试验结果表明重组菌SL7207(pVAX1-S1-CpG)具有良好的安全性。在免疫后35 d,商品鸡体重测定结果表明重组菌免疫不影响鸡体增重。以5×109CFU重组菌滴鼻和口服两次接种4日龄商品代伊莎褐蛋鸡,二免3周后,血清抗体和小肠黏膜抗体测定结果表明,SL7207(pVAX1-S1-CpG)免疫组抗体水平与空白对照组、空载体对照组之间分别存在极显著性差异(P<0.01)。攻毒试验结果表明,重组菌SL7207(pVAX1-S1-CpG)免疫组有较高的免疫保护效力,与灭活苗和减毒苗效力相当,显示出一定的应用前景。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 DNA疫苗 cpgdna 减毒鼠伤寒沙门氏菌安全性免疫效力

CpG DNA增强口蹄疫病毒DNA疫苗诱发豚鼠产生的免疫应答

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科学通报 2001年第6期46卷 477-480页

作者：李光金李颖杰严维耀徐泉兴吴永庆谢雍尤永进郑兆鑫复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433 上海农业科学研究院畜牧兽医研究所上海201106 香港科技大学生物系

CpG DNA是一些具有免疫刺激作用的核苷酸序列, 这些序列在DNA疫苗诱发机体产生的免疫应答中起着重要作用. 设计并化学合成了一段含CpG DNA的寡核苷酸, 将其插入编码大肠杆菌?-半乳糖苷酶及O型口蹄疫病毒抗原表位融合蛋白的表达质粒中, ... 详细信息

CpG DNA是一些具有免疫刺激作用的核苷酸序列, 这些序列在DNA疫苗诱发机体产生的免疫应答中起着重要作用. 设计并化学合成了一段含CpG DNA的寡核苷酸, 将其插入编码大肠杆菌?-半乳糖苷酶及O型口蹄疫病毒抗原表位融合蛋白的表达质粒中, 并观察了其对重组质粒介导的免疫应答的影响. 结果显示, 插入的寡核苷酸能增强重组质粒诱发豚鼠产生的病毒中和抗体及T细胞增殖反应, 并能提高豚鼠的抗病毒感染能力, 证明将CpG DNA克隆进DNA疫苗中是提高DNA疫苗免疫活性的一条有效途径. 同时, 构建的DNA疫苗为抗口蹄疫DNA疫苗的应用奠定了一定的基础.

关键词： cpgdna DNA疫苗口蹄疫病毒免疫刺激序列免疫应答豚鼠抗病毒感染能力免疫活性

CpG DNA重组质粒对猪O型口蹄疫病毒抗原的免疫佐剂效应

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畜牧兽医学报 2009年第6期40卷 862-866页

作者：景志忠蒙学莲窦永喜陈国华房永祥黄银君王超英刘西兰张军才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室兰州730046

作者应用含CpG基序序列的重组质粒（即CpG DNA）作为免疫佐剂,评价其对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗的免疫增强效果。结果表明：CpG DNA重组质粒与猪口蹄疫灭活病毒抗原疫苗配伍免疫小鼠,CpG DNA重组质粒对小鼠具有较强的免疫佐剂效应,能促... 详细信息

作者应用含CpG基序序列的重组质粒（即CpG DNA）作为免疫佐剂,评价其对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗的免疫增强效果。结果表明：CpG DNA重组质粒与猪口蹄疫灭活病毒抗原疫苗配伍免疫小鼠,CpG DNA重组质粒对小鼠具有较强的免疫佐剂效应,能促进口蹄疫病毒抗原诱导产生较高水平的特异性抗体,其抗体滴度是空载体疫苗对照的2倍。CpG DNA重组质粒与商品化猪口蹄疫灭活疫苗配伍免疫试验猪,其增强抗原诱导的特异性抗体滴度最高可达标准疫苗的4倍以上,也显著高于空载体疫苗对照与病毒纯化抗原配伍免疫动物,攻毒后其免疫保护效力的PD50高达13.00,远高于标准疫苗对照（PD504.69）。在CpG DNA重组质粒剂量选择试验中,含低剂量的CpG DNA疫苗（50、200μg.头份-1）都比高剂量组（500μg.头份-1）诱导的抗体滴度高,其中50和200μg.头份-1的CpG DNA剂量,在接种后14~32 d诱导的抗体滴度高达1∶1500,是标准疫苗的4~5倍,而500μg.头份-1剂量诱导的抗体仅是标准疫苗的2倍,说明CpG DNA重组质粒在低剂量时即可发挥强烈的佐剂效应。研究表明CpG DNA对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗有较强的免疫佐剂效应,且使用剂量低,应用前景广阔。

关键词： cpgdna O型口蹄疫病毒抗原佐剂效应

氯喹抑制LPS和CpG DNA诱导人外周血单个核细胞释放促炎细胞因子的研究

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山东医药 2004年第11期44卷 9-11页

作者：丁国富王良喜周红刘玮第三军医大学药理教研室重庆400038

目的观察氯喹对脂多糖(LPS)和CpG DNA诱导人外周血单个核细胞释放促炎细胞因子的抑制作用。方法采用密度梯度离心法从新鲜人外周血中分离单个核细胞(hPBMC)。先用LPS和CpG DNA刺激hPBMC分泌TNF-α、IL-6,再加入不同浓度氯喹进行拮抗,... 详细信息

目的观察氯喹对脂多糖(LPS)和CpG DNA诱导人外周血单个核细胞释放促炎细胞因子的抑制作用。方法采用密度梯度离心法从新鲜人外周血中分离单个核细胞(hPBMC)。先用LPS和CpG DNA刺激hPBMC分泌TNF-α、IL-6,再加入不同浓度氯喹进行拮抗,观察其量效关系;在不同时相点加入氯喹观察时效关系;用ELISA法检测培养上清中促炎细胞因子的含量。采用甲基四唑蓝(MTT)法检测氯喹对细胞活性的影响。结果氯喹在50μg/ml时显著抑制LPS和CpG DNA刺激hPBMC释放TNF-α和IL-6(P0.05)。结论氯喹对LPS和cpgdna诱导人外周血hPBMC释放促炎细胞因子的抑制作用呈明显的剂量和时间依赖关系。

关键词：氯喹抑制LPS cpgdna 诱导人外周血单个核细胞释放促炎细胞因子