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cpg-odn对小鼠骨髓造血系统辐射损伤的保护作用

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第二军医大学学报 2011年第4期32卷 372-376页

作者：张超高福崔建国程赢孙顶周传丰刘聪李百龙蔡建明第二军医大学海军医学系放射医学教研室上海200433

目的探讨Toll样受体9(Toll-like recptor 9,TLR9)激动剂———含cpg基序的寡核苷酸(cpg-odn)对小鼠骨髓造血系统辐射损伤的治疗作用。方法小鼠在照射后30 min、24 h、48 h连续腹腔注射cpg-odn(50μg/只),观察小鼠不同剂量照射后存活率... 详细信息

目的探讨Toll样受体9(Toll-like recptor 9,TLR9)激动剂———含cpg基序的寡核苷酸(cpg-odn)对小鼠骨髓造血系统辐射损伤的治疗作用。方法小鼠在照射后30 min、24 h、48 h连续腹腔注射cpg-odn(50μg/只),观察小鼠不同剂量照射后存活率的变化,检测特定时间内血液中白细胞和骨髓中有核细胞的含量及其骨髓病理切片,外源性脾结节集落形成数。结果 cpg-odn能提高照后小鼠的存活率,提高小鼠外周血白细胞和骨髓有核细胞数(Pcpg-odn能减轻小鼠骨髓造血系统辐射损伤。

关键词： cpg-odn Toll样受体9 辐射损伤骨髓造血系统

cpg-odn对^(12)C^(6+)离子照射所致胸腺损伤的防治作用

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辐射研究与辐射工艺学报 2021年第1期39卷 54-60页

作者：张超傅华蔡建明高福中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院放疗科兰州730050 中国人民解放军海军军医大学放射医学教研室上海200433

为了探讨cpg-odn对^(12)C^(6+)离子照射所致胸腺损伤的防治作用,C57BL/6L小鼠受到5 Gy^(12)C^(6+)离子全身照射后观测其30 d存活率,计算照射后1 d和3 d胸腺指数。使用苏木精-伊红染色法评估胸腺组织病理学变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导... 详细信息

为了探讨cpg-odn对^(12)C^(6+)离子照射所致胸腺损伤的防治作用,C57BL/6L小鼠受到5 Gy^(12)C^(6+)离子全身照射后观测其30 d存活率,计算照射后1 d和3 d胸腺指数。使用苏木精-伊红染色法评估胸腺组织病理学变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法检测胸腺细胞凋亡;免疫组化法检测γ-H2AX以判断DNA双链断裂水平;免疫荧光法检测外周血中CD3+T细胞数量。实验结果显示,^(12)C^(6+)离子照射后使用cpg-odn处理小鼠存活率提高50%,胸腺组织损伤减轻,发生凋亡和出现DNA双链断裂的细胞数量减少,外周血中CD3^(+)T细胞数量增加。这些表明cpg-odn能够减轻^(12)C^(6+)离子照射所致的胸腺损伤,其原因可能与抑制胸腺细胞凋亡和减少细胞内DNA双链断裂有关。

关键词： ^(12)C^(6+)离子照射 cpg-odn 胸腺凋亡 DNA双链断裂

cpg-odn对新生大鼠缺血/缺氧性脑损伤的保护作用研究

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中国药理学通报 2017年第7期33卷 956-961页

作者：黄莹叶兰冯占辉王世平冯祝婷靳艳玲贵州医科大学基础医学院药理学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学附属医院神经内科贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院机能学实验室贵州贵阳550025

目的探讨Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)激动剂——含Cp G基序的寡核苷酸(Cp G-odn)对新生大鼠缺血/缺氧性脑损伤的保护作用机制。方法 50只健康7日龄新生Wistar大鼠,♀♂不限,随机分为5组,假手术组、缺血/缺氧性脑损伤(HIBD)... 详细信息

目的探讨Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)激动剂——含Cp G基序的寡核苷酸(Cp G-odn)对新生大鼠缺血/缺氧性脑损伤的保护作用机制。方法 50只健康7日龄新生Wistar大鼠,♀♂不限,随机分为5组,假手术组、缺血/缺氧性脑损伤(HIBD)组、Cp G-odn低剂量组(0.35m L·kg-1)、Cp G-odn中剂量组(1.40 m L·kg-1)、Cp Godn高剂量组(5.60 m L·kg-1)。术后48 h对大鼠神经功能进行评分,光学显微镜下观察脑组织病理学改变。免疫印迹法检测缺血/缺氧侧脑组织中磷酸化p38 MAPK、TLR9表达,酶联免疫吸附法检测TNF-α的表达。结果 Cp G-odn低、中剂量组较模型组神经行为学评分降低,病理学损伤减轻,而高剂量组较模型组神经行为学评分升高(Podn低、中剂量可改善新生大鼠脑缺血/缺氧损伤神经行为学评分及神经系统功能,减轻新生大鼠缺血/缺氧性脑损伤,其机制可能是通过适度激活p38 MAPK信号通路,并分泌适量TNF-α发挥作用。

关键词：缺血/缺氧脑损伤脑 TNF-α TLR9 cpg-odn p38丝裂原活化蛋白激酶

cpg-odn调节Th1/Th2型细胞因子表达抑制放射性肺纤维化

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辐射研究与辐射工艺学报 2019年第1期37卷 27-35页

作者：牛冰冰张超蔡建明高福中国人民解放军兰州总医院放疗科兰州730050 中国人民解放军海军军医大学放射医学教研室上海200433

从Th细胞因子平衡的角度着手,探讨cpg-odn在防治放射性肺纤维化中的作用机理。使用单次全肺照射15 Gy的雌性C57BL/6小鼠建立放射性肺损伤模型,通过酶联免疫吸附测定法连续20周检测小鼠体内Th1/Th2相关细胞因子和促纤维化细胞因子的表达... 详细信息

从Th细胞因子平衡的角度着手,探讨cpg-odn在防治放射性肺纤维化中的作用机理。使用单次全肺照射15 Gy的雌性C57BL/6小鼠建立放射性肺损伤模型,通过酶联免疫吸附测定法连续20周检测小鼠体内Th1/Th2相关细胞因子和促纤维化细胞因子的表达水平,免疫组化法评估肺泡巨噬细胞、肺组织纤维化和丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)家族主要蛋白的磷酸化水平。实验结果显示,cpg-odn能促进Th1型细胞因子分泌,同时抑制Th2型细胞因子分泌,导致Th1型免疫反应占主导优势,从而抑制肺泡巨噬细胞的聚集活化,降低促纤维化细胞因子TGF-β1、IGF-1的表达,下调MAPK通路的活化。这提示cpg-odn能通过调节电离辐射后Th1/Th2型细胞因子的失衡而抑制放射性肺纤维化的发生。

关键词：放射性肺纤维 cpg-odn Th1/Th2失衡细胞因子 MAPK家族

cpg-odn对重离子辐射所致脾脏损伤的救治作用

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辐射研究与辐射工艺学报 2023年第4期41卷 43-50页

作者：张超傅华易永华蔡建明高福中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院放疗科兰州730050 中国人民解放军海军军医大学放射医学教研室上海200433

本次研究主要探讨cpg-odn对重离子辐射所致脾脏损伤的救治作用。实验中C57BL/6L小鼠受到5 Gy12C6+离子全身照射,在照射后急性期计算小鼠脾脏指数,苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin staining,HE)染色观察脾脏组织结构变化。另外,免疫组化... 详细信息

本次研究主要探讨cpg-odn对重离子辐射所致脾脏损伤的救治作用。实验中C57BL/6L小鼠受到5 Gy12C6+离子全身照射,在照射后急性期计算小鼠脾脏指数,苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin staining,HE)染色观察脾脏组织结构变化。另外,免疫组化法检测γ-H2AX蛋白含量以判断脾脏细胞DNA发生双链断裂(Double-strand break,DSB)情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediatedd UTPnickandlabeling,TUNEL)法检测脾脏细胞凋亡水平,荧光标记法检测外周血CD19+B细胞数量。结果显示,经12C6+离子照射后cpg-odn处理,小鼠脾脏指数提高,脾脏红髓萎缩程度减轻,白髓面积增大,其内淋巴B细胞排列密度提高,发生DSB和凋亡的细胞数量减少,外周血CD19+B细胞数量增加。这些表明cpg-odn能减轻12C6+离子照射后脾脏损伤,其原因可能与cpg-odn抑制细胞发生DSB和凋亡有关。

关键词：碳离子辐射 cpg-odn 脾脏凋亡双链断裂

cpg-odn增强表达犬瘟热病毒H蛋白重组质粒免疫效果的分析

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畜牧兽医学报 2008年第12期39卷 1737-1742页

作者：徐向明朱善元张泉薛整风李厚达江苏畜牧兽医职业技术学院泰州225300 扬州大学兽医学院扬州225009

为提高犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)重组质粒的免疫应答水平,合成4条cpg-寡脱氧核苷酸(cpg-oligodeoxynueleotides,cpg-odn);通过体外淋巴细胞增殖试验确定1条刺激活性最显著的cpg-odn,序列为5-′TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT-3′。将30只健康毕格犬随机均分为2大组,每大组再分为5小组,分别以不同的剂量肌肉注射CDV附着蛋白(H)重组质粒pcDNA-H和选定的cpg-odn。在免疫后的第2、4、6周分别测定各组动物的抗CDV中和抗体和γ-干扰素水平。结果表明选定的cpg-odn对提高抗CDV中和抗体效价和干扰素水平具有一定作用,且与对照组差异显著(Pcpg-odn的效果不同,其中以30μg/只的cpg-odn和50μg/只的pcDNA-H的剂量组合效果最佳。以选定剂量的cpg-odn和pcDNA-H免疫5只健康毕格犬,同时以质粒pcDNA-H与生理盐水作为对照;4周后所有动物均接种CDV组织匀浆毒。结果发现试验组动物均未出现犬瘟热临床症状,且攻毒后第3周CDV检测为阴性,而pcDNA-H对照组和生理盐水对照组动物的CDV检测阳性率为2/5和5/5;这表明cpg能够明显促进重组质粒pcDNA-H的免疫保护作用。

关键词： cpg-odn 犬瘟热核酸疫苗免疫应答影响

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cpg-odn对肾小球肾炎进展的影响

中国生物制品学杂志 2008年第7期21卷 572-574页

作者：罗萍顾华卢雪红王静吴曼吉林大学第二临床医院肾病内科长春130041 大连医科大学附属第一医院大连116000

目的观察cpg-odn对肾小球肾炎进展的影响。方法将Wistar雄性大鼠随机分为N组(正常对照)、M组(模型对照)、cpg组和GpC组。N组大鼠经尾静脉注射生理盐水2.5ml/(kg·d),其余3组大鼠经尾静脉注射抗-thy1.1单克隆抗体2.5ml/(kg·d),隔日1次,... 详细信息

目的观察cpg-odn对肾小球肾炎进展的影响。方法将Wistar雄性大鼠随机分为N组(正常对照)、M组(模型对照)、cpg组和GpC组。N组大鼠经尾静脉注射生理盐水2.5ml/(kg·d),其余3组大鼠经尾静脉注射抗-thy1.1单克隆抗体2.5ml/(kg·d),隔日1次,共3次。注射抗-thy1.1单克隆抗体后,隔天,cpg组经尾静脉注射cpg-odn,300μg/只,GpC组经尾静脉注射GpC-odn,300μg/只,隔日注射,共3次。各组大鼠分别于用药前和第1针注射后1周测定尿蛋白;用药后第8周留取大鼠24h尿、血清及肾脏组织,检测24h尿蛋白定量、血清白蛋白和肾功;肾脏组织用于肾脏病理检查以及RT-PCR法检测TLR-9mRNA的表达。结果cpg组与M组和GpC组相比,血清白蛋白含量明显降低,且差异有显著意义;M组、cpg组和GpC组在给药后1周均出现尿蛋白,在给药后8周,24h尿蛋白含量明显增多;cpg组与M组相比,TLR-9mRNA在肾脏的表达水平明显增加,且差异有显著意义;GpC组与M组相比,差异无显著意义;光镜下可见cpg组肾组织病理改变明显加重。结论天然cpg-odn可促进肾小球肾炎病情加重,TLR-9可能在其发生机理中起重要作用。

关键词： cpg-odn Toll样受体-9 肾小球肾炎

cpg-odn及PolyICLC在结核亚单位疫苗中的佐剂效应

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免疫学杂志 2012年第7期28卷 568-571,594页

作者：刘宝元祝秉东胡永浩牛红霞苏娟唐克峰刘万波亢鸿飞李青甘肃农业大学动物医学院兰州730070 兰州大学基础医学院病原生物学研究所暨结核病研究中心 730000 兰州大学基础医学院病理生理学研究所 730000

目的观察TLR识别配体不同组合佐剂对结核分枝杆菌融合蛋白免疫原性的影响及DDA对TLR识别配体的辅助效应。方法 cpg-odn(cpg)和/或PolyICLC联合/不联合DDA,分别与融合蛋白Mtb10.4-HspX(MH)混合,制备亚单位疫苗,于第1、4、7周皮下免疫C57B... 详细信息

目的观察TLR识别配体不同组合佐剂对结核分枝杆菌融合蛋白免疫原性的影响及DDA对TLR识别配体的辅助效应。方法 cpg-odn(cpg)和/或PolyICLC联合/不联合DDA,分别与融合蛋白Mtb10.4-HspX(MH)混合,制备亚单位疫苗,于第1、4、7周皮下免疫C57BL/6小鼠。以PBS和BCG(仅免疫1次)作为对照。末次免疫后6周,采血检测血清抗体水平,并分离脾淋巴细胞,检测分泌IFN-γ的淋巴细胞水平。结果经MH及HspX抗原刺激后,MH+cpg+PolyICLC+DDA组小鼠分泌IFN-γ的脾淋巴细胞数高于其它各组(Pcpg+PolyICLC组其次,显著高于MH+cpg及MH+PolyICLC组(Pcpg+PolyICLC+DDA组3种抗体水平最高;各亚单位疫苗组IgG2c/IgG1均高于BCG组(Pcpg+PolyICLC+DDA佐剂增强了结核分枝杆菌融合蛋白的免疫原性;cpg和PolyICLC具有佐剂协同作用;DDA有助于cpg和/或PolyICLC诱导特异性细胞免疫应答。

关键词： cpg-odn PolyICLC 佐剂亚单位疫苗

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cpg-odn免疫佐剂的应用与研究进展

中国预防兽医学报 2002年第6期24卷 484-485页

作者：常维山柴同杰赵宏坤山东农业大学山东泰安271018

随着对核酸免疫学特性的深入了解 ,人们对cpg特征结构在DNA免疫学中的重要作用有了逐步的认识 ,并在DNA疫苗、肿瘤免疫、病毒免疫等方面进行了临床应用。本文就cpg特征结构的特点、在不同动物中不同DNA序列的cpg免疫学活性及应用进行了... 详细信息

随着对核酸免疫学特性的深入了解 ,人们对cpg特征结构在DNA免疫学中的重要作用有了逐步的认识 ,并在DNA疫苗、肿瘤免疫、病毒免疫等方面进行了临床应用。本文就cpg特征结构的特点、在不同动物中不同DNA序列的cpg免疫学活性及应用进行了探讨。

关键词： cpg-odn 特征结构免疫活性核酸疫苗作用机理